合谷穴位埋线对大鼠分娩的镇痛作用及机制研究

目的:观察合谷穴位埋线在大鼠分娩模型中的镇痛效果,并探究其对合谷穴局部降钙素基因相关肽信号(calcitonin gene-related peptide,CGRP)等生物标志物的影响。方法:将36只孕鼠随机分为对照组、合谷针刺组和合谷埋线组。在引产前、分娩启动前、分娩启动时及半产程时,采用热水甩尾法和热刺激缩足反应潜伏期测定法评估痛阈变化。半产程时采集合谷穴局部组织,通过免疫荧光技术检测CGRP、P物质(substance P,SP)和肥大细胞的表达情况,采用ELISA方法测定ATP和腺苷的浓度。结果:引产前,三组的热水甩尾时间、热刺激缩足反应潜伏期差异无统计学意义(P>0.05);分娩启动前,针刺组和埋线组的热水甩尾时间、热刺激缩足反应潜伏期均明显高于对照组(P<0.05);分娩启动时和半产程时,埋线组的热水甩尾时间、热刺激缩足反应潜伏期均明显高于对照组和针刺组(P<0.05)。半产程时CGRP、SP、肥大细胞表达、ATP和腺苷浓度显著高于对照组和针刺组(P<0.05),并且CGRP、SP与肥大细胞呈共表达现象。结论:合谷穴位埋线可有效缓解分娩疼痛。其机制可能与局部CGRP和SP的表达增加,促进肥大细胞脱颗粒,释放ATP并转化为腺苷有关。

塞来昔布诱导不表达环氧合酶-2的胃癌细胞凋亡研究

目的:探讨选择性COX-2抑制剂celecoxib诱导COX-2不表达胃癌细胞MGC-803凋亡。方法:应用MTT法研究celecoxib对细胞存活率的影响;Hoechst33258染色,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术分别检测cele-coxib处理后细胞形态学改变,DNA断裂情况和DNA含量的变化。结果:COX-2高表达于AGS胃癌细胞株,而MGC-803中未检测到COX-2表达;选择性COX-2抑制剂celecoxib呈浓度和时间依赖性诱导MGC-803细胞凋亡。结论:Celecoxib可诱导不表达COX-2的胃癌细胞MGC-803凋亡。

吲哚美辛通过Akt/GSK3β/NAG-1信号通路诱导胃癌细胞的凋亡

目的:探讨非选择性环氧合酶抑制剂吲哚美辛诱导胃癌细胞凋亡作用与Akt/GSK3β/NAG-1信号通路的关系。方法:MTT法测定胃癌细胞的活力;Hoechst 33258染色检测细胞形态学改变,流式细胞术检测DNA含量的变化,Western blotting检测蛋白表达的变化。结果:吲哚美辛通过caspase通路诱导胃癌细胞MGC-803的凋亡,明显降低Akt和GSK3β的磷酸化水平,同时上调NAG-1的表达。单独抑制PI3K或Akt的活性亦可上调NAG-1的表达,而GSK3β抑制剂预处理后则取消吲哚美辛上调NAG-1表达的作用。结论:吲哚美辛可通过Akt/GSK3β/NAG-1信号通路诱导胃癌细胞MGC-803的凋亡。

IL-1基因多态性与广东地区胃癌关系的研究

【目的】研究IL-1(interleukin-1)B基因+3954、-511、-31位点和IL-1受体拮抗因子基因(IL-1RN)多态性在广东地区普通人群和胃癌患者中的分布,探讨IL-1基因多态性与我国胃癌发生的关系。【方法】用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)分析法检测广东省192名普通人和84例胃癌患者的IL-1基因多态性。【结果】胃癌患者IL-1B-511和IL-1B-31 T基因携带者(T+)频率显著高于普通人群(78.6％vs54.7％,x^2=14.1,P<0.01,OR=3.0,95％CI 1.7-5.5和35.7％ vs 18.8％,x^2=9.2,P<0.01,OR=2.4,95％CI 1.4-4.3),而IL-1 B+3954位点T和IL-1RN2基因携带者频率在两组间无显著差异(x^2=2.1和0.6,P>0.05)。【结论】IL-1B-511和-31位点T等位基因可能与我国广东地区胃癌的发生有关。

慢性疼痛的细胞因子微环境假说

慢性疼痛常常伴有记忆和情感障碍,严重影响患者的生活质量和工作能力,但目前慢性疼痛机制不清。慢性疼痛常常伴有神经系统致炎细胞因子异常升高,在外周神经或中枢施以致炎细胞因子可模拟神经损伤引起的慢性疼痛和记忆情感障碍。根据致炎细胞因子可模拟神经损伤,持久改变神经元的兴奋性和突触可塑性,我们提出慢性疼痛细胞因子微环境假说,即,在神经损伤等强伤害性刺激的作用下,神经系统细胞因子微环境发生异常改变,即致炎细胞因子升高,抗炎细胞因子减少,导致神经系统的结构和功能发生变化,引起慢性疼痛及其相伴的认知和情感障碍。防止或纠正细胞因子微环境的失衡可能从根本上预防和治疗慢性疼痛。

感觉神经损伤,还是运动神经损伤引起神经病理性疼痛?

外周神经损伤引起的神经病理性疼痛可持续数月、数年,甚至终身,神经病理性疼痛的临床表现和机制与生理性疼痛明显不同,被认为是神经系统的一种疾病。迄今,该病的预防和治疗仍然是医学界的难题,原因在于人们对其发病机制的了解仍然非常有限。一些基本的科学问题尚待厘清。例如,外周神经包括感觉纤维和运动纤维,到底损伤哪类纤维会引起神经病理性疼痛?回答这一最基本的科学问题对确定研究神经病理性疼痛起始点至关重要,对该病的临床治疗,尤其是外科治疗具有指导意义。由于神经病理性疼痛表现为躯体感觉异常,人们理所当然地认为它可能是由感觉神经损伤引起的。然而,近年来的大量动物实验和临床研究证据表明,感觉纤维损伤既非引起神经病理性疼痛的必要条件也非充分条件;而运动纤维损伤几乎总会导致神经病理性疼痛。本文将综述运动纤维损伤导致外周敏化(初级感觉神经元异位放电)和中枢敏化(脊髓背角C-纤维突触传递长时程增强)的机制,重点阐述胶质细胞活化、致炎细胞因子和脑源性神经营养因子过表达的作用。

中药肠炎清治疗小鼠葡聚糖硫酸钠所致结肠炎的机制

目的:探讨肠炎清的疗效及其机制.方法:以葡聚糖硫酸钠(DSS)饮水法复制小鼠实验性结肠炎40只,随机平均分为4组:肠炎清中药组、柳氮磺胺吡啶(SASP)西药组、肠炎清和SASP中西药结合组和模型组.观察肠炎清(灌胃剂量为0.2mL/(20g?d)、1次/d、疗程7d)对疾病活动指数(DAI)和肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性及TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA表达的影响.结果:与模型组相比,肠炎清可降低DAI(1.413±0.835vs2.167±0.911,P<0.05)和MPO活性(72.4±0.590nkat/gvs117.0±0.902nkat/g,P<0.05),并降低肠组织TNF-α(0.841±0.190vs1.320±0.282,P<0.05)、IL-1β(0.641±0.095vs0.920±0.082,P<0.05)和IL-6mRNA(1.241±0.247vs1.620±0.312,P<0.05)的表达,中西医结合组以上指标下降更为明显(DAI:0.608±0.449;MPO:27.3±0.211;TNF-α:0.339±0.081;IL-1β:0.239±0.073;IL-6:0.639±0.141)(P<0.01).肠炎清与柳氮磺胺吡啶(SASP)的作用相当(P>0.05).结论:肠炎清可治疗DSS结肠炎,其降低肠组织TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA的表达可能是其疗效机制之一.

蛋白酪氨酸激酶与糖尿病大鼠主动脉平滑肌高反应性的关系

目的 探讨蛋白酪氨酸激酶在糖尿病大鼠主动脉平滑肌高反应性中的作用。方法 离体主动脉环张力实验。结果 在 8～ 10wk的糖尿病大鼠 :①主动脉平滑肌对苯肾上腺素的浓度依赖性收缩反应显著增加 ,最大收缩反应为( 167± 2 3 ) g·g-1组织净重 ,较对照组 ( 10 0± 17) g·g-1组织净重增加了约 67% ,②蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂sodiumor thovanadate的浓度依赖性收缩反应也明显增强 ,1mmol·L-1sodiumorthovanadate的收缩反应为 ( 2 0 8± 2 5 )g·g-1组织净重 ,较对照组 ( 113± 18) g·g-1组织净重增加了约 85 % ,③蛋白酪氨酸激酶抑制剂 genistein均浓度依赖性地抑制糖尿病组和对照组主动脉平滑肌对苯肾上腺素的收缩反应 ,但在对照组的抑制率显著大于糖尿病组。结论 糖尿病大鼠主动脉平滑肌的高反应性可能与糖尿病时蛋白酪氨酸激酶的活性增加有关。

山莨菪碱对家兔油酸性急性肺损伤的防治作用

目的 观察山莨菪碱 (6 5 4 2 )对油酸致急性肺损伤的作用。方法 测量家兔血清中丙二醛 (MDA)的含量 ,及支气管肺泡灌洗液 (BALF)中MDA、蛋白含量和肺湿 /干重比。结果 6 5 4 2可明显减少油酸性急性肺损伤家兔血清及BALF中MDA和BALF中蛋白含量 ,并使肺湿 /干重比降低。结论 6 5 4 2可通过其抗膜脂质过氧化对油酸性肺损伤起到有效的防治作用。

内皮生长因子和胎盘生长因子对小鼠胎肝造血干细胞髓系分化的作用

【目的】观察VEGF(内皮生长因子)和PlGF(胎盘生长因子)对小鼠胎肝造血干细胞髓系分化的影响,并探讨其调控机制。【方法】体外培养E13胎肝造血细胞,培养造血集落CFU-GM,观察VEGF和PlGF对胎肝造血干细胞髓系分化的作用,应用Western-Blot检测不同处理条件对胎肝造血细胞Akt蛋白以及p-Akt蛋白表达水平的影响,用MTT法来评估不同浓度的LY294002(PI3K/Akt抑制剂)对胎肝造血细胞增殖的影响,通过CFU-GM观察LY294002对VEGF和PlGF调控胎肝造血作用的影响。【结果】VEGF和PlGF均可促进胎肝造血干细胞髓系分化,集落数分别为对照组的141%(P<0.01)和123%(P<0.05);PlGF可上调胎肝造血细胞p-Akt蛋白表达,其表达水平为对照组的143%(P<0.05);VEGF及其与PlGF联合应用对胎肝造血细胞p-Akt蛋白表达水平无明显影响。LY294002可抑制胎肝造血细胞的增殖,并具有明显的剂量依赖关系(r=0.9647,P<0.01),在LY294002存在的条件下加入VEGF或PlGF,其CFU-GM产率与单独应用LY294002相比无明显差异(P>0.05)。【结论】VEGF和PlGF均能促进胎肝造血干细胞的髓系分化;PlGF可通过上调胎肝造血细胞Akt的磷酸化水平调节胎肝造血细胞的髓系分化;LY294002可通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制VEGF和PlGF对胎肝造血干祖细胞髓系分化的调控作用。

肿瘤坏死因子α对背根神经节电压门控性钠通道表达的影响

【目的】探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对背根神经节(DRG)电压门控性钠通道(Nav1.3)表达的影响,并探讨其在神经病理性疼痛形成中的可能作用。【方法】采用免疫荧光组织化学方法和免疫荧光细胞化学方法,观察外源性重组TNF(rrTNF)对在体大鼠和离体培养的大鼠DRG神经元Nav1.3表达的影响。【结果】①不损伤任何神经,仅在大鼠坐骨神经周围给予100pg/mL的rrTNF可引起病理性疼痛的产生,并引起L5和L4DRG神经元内Nav1.3显著上调;②在分离培养的正常成年大鼠DRG神经元表面直接给予100pg/mLrrTNF显著诱导Nav1.3表达上调,其上调分布于DRG神经元的胞膜和胞浆,并以胞膜上调更为显著。【结论】TNF-α在神经病理性疼痛形成中具有重要作用,外周神经损伤可能通过DRG内TNF-α的上调,促发Nav1.3异常表达,由初级感觉传入异常兴奋,参与病理性疼痛的产生。

蛋白酪氨酸磷酸化参与调控主动脉平滑肌细胞容积调节性氯通道电流

目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸化在胚胎鼠主动脉平滑肌细胞系A10细胞容积调节性氯通道电流中的调控作用。方法 膜片钳全细胞记录技术。结果 ①在A10细胞 ,低渗溶液激活一外向整流电流 ,该电流在正电位 (≥ 6 0mV)时缓慢失活。其反转电位为 (- 1 5± 3 4 )mV ,接近Cl-平衡电位 (Ecl=0mV)。降低胞外Cl-浓度其反转电位随之变化。高渗溶液可抑制该电流。②DIDS(10 0 μmol·L-1)电压依赖性抑制容积调节性氯通道电流 ,在 +80mV和 - 80mV的抑制率分别为 5 3 7%± 6 2 %和 2 9 8%± 4 9%。③酪氨酸激酶抑制剂genistein (30 μmol·L-1)抑制该电流 ,在 +80mV和 - 80mV对其抑制率分别为6 2 3%± 11 3%和 6 6 9%± 10 5 % ,其抑制作用无电压依赖性。④酪氨酸磷酸酶抑制剂sodiumorthovanadate(Na3 VO4,5 0 0 μmol·L-1)增强该电流 ,其作用无电压依赖性 ,在 +80mV和 - 80mV电流幅度分别增加了 4 4 8%±14 5 %和 4 7 1%± 13 6 %。结论 A10细胞上存在有容积调节性氯通道。

川芎嗪对家兔油酸性肺损伤的防治作用

目的观察川芎嗪对油酸性肺损伤的防治作用。方法家兔随机分成对照组、油酸组和油酸 +川芎嗪组。比较各组肺冲洗液中MDA含量和肺的湿 /干重比值。结果川芎嗪 +油酸组的血清丙二醛(MDA)含量明显低于油酸组 (P <0 .0 5 ) ,支气管肺泡灌洗液 (BALF)中的MDA、蛋白含量和肺湿重 /干重比值与对照组无明显差异 ,但显著低于油酸组 (P <0 .0 1 )。结论川芎嗪通过抗自由基损伤和膜脂质过氧化等作用 。

节约保护水资源 大力建设生态文明

水是人类赖以生存和发展的自然资源．是社会和经济发展的很重要的制约因素之一。联合国决定今年第二十一届“世界水日”的宣传主题为“水合作”．同时我国把为期1周的第二十六届“中国水周”活动的宣传重点确定为“节约保护水资源，大力建设生态文明”。“大力推进生态文明建设，努力实现中华民族永续发展”是党的十八大为造福子孙，惠及中国人民千秋万代的最伟大的、根本性的事业确立的新目标。

大田膜下滴灌高效节水工程应用效果分析

以乌拉特前旗额尔登布拉格地区大田滴灌高效节水工程为例,结合当地节水灌溉实际情况,分析大田膜下滴灌技术在当地山旱牧区的应用效果,以促进该项高效节水技术的推广应用。

机械敏感性离子通道Piezo1参与慢性避水应激肠易激综合征大鼠内脏高敏感性和5-羟色胺代谢异常

目的:研究机械敏感性离子通道Piezo1在慢性避水应激(WAS)肠易激综合征大鼠模型结肠组织中的变化及作用。方法:采用成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为实验组与对照组,每组6只。实验组大鼠受到连续10 d、每天1 h的WAS以建立内脏高敏感性模型;记录24 h粪便颗粒数、含水量及胃肠道转运时间来检测大鼠肠道分泌及运动功能的变化;以结直肠扩张所导致的腹壁撤退反射(AWR)来检测内脏敏感性;用旷场实验和强迫游泳实验来观察大鼠焦虑及抑郁样行为;RT-qPCR、免疫组化和Western blot检测结肠黏膜Piezo1的表达变化;ELISA检测结肠和血清5-羟色胺(5-HT)的含量。结果:与对照组相比,WAS组大鼠出现腹泻型肠易激综合征的表现,大鼠胃肠道转运时间显著缩短(P<0.05),在40 mmHg和60 mmHg结直肠压力扩张下的AWR评分显著增加(P<0.05),并出现焦虑抑郁样行为,大鼠结肠组织Piezo1的mRNA及蛋白表达水平显著增加(P<0.05),结肠黏膜5-HT含量显著增加(P<0.05),血清5-HT含量变化不明显。大鼠结肠黏膜Piezo1表达与内脏敏感性显著相关(R2=0.5420,P=0.0373),与结肠组织5-HT含量呈显著正相关(R2=0.8351,P=0.0108)。结论:连续10 d的WAS使大鼠结肠粘膜内机械敏感性离子通道Piezo1表达增加(可能是内脏高敏感性的标志物),并通过促进结肠5-HT的分泌和释放,改变肠道分泌和运动,增加肠道的敏感性,从而导致大鼠肠易激综合征的发生。

大鼠DRG内ClC-3敲减导致的TNF-α/IL-10失衡对电压门控性钠通道表达和机械痛敏的影响

目的:研究敲减大鼠背根神经节(DRG)内ClC-3氯通道/反向转运体对神经元电压门控性钠通道表达和大鼠机械痛敏的影响及机制。方法:成年SD大鼠鞘内注射ClC-3 shRNA腺相关病毒(AAV-ClC-3 shRNA)以敲减DRG内ClC-3的表达,RT-qPCR、免疫荧光染色和Western blot从mRNA和蛋白水平检测ClC-3、细胞因子和电压门控性钠通道表达的变化,用up-down方法检测机械痛敏。结果:鞘内注射AAV-ClC-3 shRNA后DRG组织ClC-3的表达下调,大鼠出现机械触诱发痛。敲减DRG组织ClC-3的表达可致电压门控性钠通道Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9的表达增加。敲减DRG组织ClC-3的表达可提高肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,降低白细胞介素10(IL-10)水平。结论:大鼠DRG内ClC-3下调导致TNF-α/IL-10失衡,进而增加电压门控性钠通道Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9表达,增强神经组织兴奋性,最终导致机械痛敏。

白细胞介素-1B-511单核苷酸多态性与胃癌关系的流行病学研究

目的研究中国胃癌高、低发区白细胞介素(IL)-1B-511单核苷酸多态性、幽门螺杆菌(Hp)感染与胃癌的关系。方法胃癌高发区(陕西省)胃癌患者、健康志愿者各102例,胃癌低发区(广东省)胃癌患者、健康志愿者各104例,两组人群在性别比及年龄上均匹配。采用限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析 IL-1B-511甲核苷酸多态性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清抗 Hp-IgG 抗体。结果在胃癌低发区,胃癌患者 IL-1B-511 T/T 基因型频率明显高于对照人群(26.9%比13.4%,x^2=5.85,P<0.05;OR=2.37.95% CI 为1.16～4.82)。在胃癌高发区,胃癌患者 IL-1B-511 T/T 基因型频率与对照人群无明显差异(27.5%比24.5%,x^2-0.41,P>0.05);高发区对照人群的 IL-1B-511 T/T基因型频率明显高于低发区相应人群(24.5%比13.4%.x^2=4.1,P<0.05)。Hp 感染轻度增加低发区人群发生胃癌的危险性(OR=3.03,95%CI 为1.61～5.71),而 IL-1B-511 T/T 基因型增加 Hp 感染后胃癌发生的危险性(OR=8.0.95%CI 为1.39～35.7)。结论 IL-1B-511 T/T 基因型与中国人胃癌发生有关,IL-1B-511 T/T 基因型增加 Hp 感染后胃癌发生的危险性。

罗格列酮经p38MAPK通路下调胃癌细胞基质金属蛋白酶2表达

在我国，胃癌的死亡率居各类恶性肿瘤之首，侵袭和转移是其主要致死原因。过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）是一类由配体激活的核转录因子，与恶性肿瘤的关系已越来越引起人们的关注。以罗格列酮为代表的唑烷二酮类化合物是一类高亲和力PPARγ激动剂，临床用作胰岛素增敏剂。研究证实PPAR3,激动剂对多种肿瘤细胞具有抑制作用，我们前期研究已经发现罗格列酮能够通过非PPA阶依赖途径抑制来源于胃癌转移瘤的SGC-7901细胞的侵袭转移，并可下调基质金属蛋白酶2（MMP-2）的表达。本研究拟在此基础上探讨罗格列酮下调MMP-2表达的分子机制。

大田膜下滴灌高效节水工程应用效果分析

以乌拉特前旗额尔登布拉格地区大田滴灌高效节水工程为例,结合当地节水灌溉实际情况,分析大田膜下滴灌技术在当地山旱牧区的应用效果,以促进该项高效节水技术的推广应用。