丙酸睾丸酮早期处理对大鼠行为及脑内多巴胺转运体的影响

目的:观察丙酸睾丸酮早期处理对大鼠行为及脑内多巴胺转运体的影响。方法:分别以开放广场实验及免疫组织化学技术观察丙酸睾丸酮处理大鼠行为及脑内多巴胺转运体(DAT)的变化。结果:开放广场实验显示早期注射丙酸睾丸酮可使大鼠活动增多,表现为水平运动、垂直运动、运动的总径长以及清洁动作次数显著增加;免疫组织化学显色结果表明丙酸睾丸酮处理组大鼠黑质和尾壳核DAT免疫反应强度增强,其灰度值显著低于对照组。结论:丙酸睾丸酮早期处理大鼠活动的增加可能与雄激素影响黑质-尾壳核多巴胺能神经体系有关。

己酮可可碱预处理对癫痫发作大鼠海马损伤的影响

目的观察己酮可可碱(Ptx)预处理对癫痫发作大鼠海马损伤的影响。方法健康、成年雄性Wistar大鼠分为3组:对照组、癫痫组和Ptx预处理组。对照组腹腔注射生理盐水(127mg·kg^(-1));癫痫组和Ptx组大鼠用氯化锂-匹罗卡品(Li-Pc)诱发癫痫发作,先腹腔注射氯化锂(127mg·kg^(-1)),20h后背部皮下注射匹罗卡品(15mg·kg^(-1));Ptx组大鼠在匹罗卡品注射前30min通过腹腔给予Ptx(60mg·kg^(-1))。观察大鼠癫痫发作情况,利用Timm和Thionin染色分别观察海马苔藓纤维发芽(MSF)和神经元损伤情况。结果癫痫组大鼠在海马苔藓纤维发芽明显增多,并伴有海马神经元的损伤和脱失,Ptx预处理降低了Li-Pc诱发大鼠的癫痫发作率和癫痫发作程度,延长了其癫痫发作潜伏期,减轻了Li-Pc诱发大鼠海马的苔藓纤维出芽及神经元的损伤。结论 Ptx预处理缓解了Li-Pc诱发大鼠的癫痫发作和海马损伤,可能成为治疗癫痫的一种方法。

己酮可可碱对癫痫大鼠黑质多巴胺能神经元的影响

目的观察己酮可可碱(Ptx)预处理对癫痫发作大鼠多巴胺(DA)能神经元的影响。方法健康、成年雄性Wistar大鼠分为3组:对照组、癫痫组和Ptx预处理组(PTX组)。对照组腹腔注射生理盐水(127mg·kg^(-1));癫痫组和PTX组大鼠用氯化锂-匹罗卡品(Li-Pc)诱发癫痫发作,先腹腔注射氯化锂(Li,127mg·kg^(-1)),20h后背部皮下注射匹罗卡品(Pc,20mg·kg^(-1));PTX组大鼠在Pc注射前30min通过腹腔给予Ptx(60mg·kg^(-1))。观察大鼠癫痫发作情况;利用免疫细胞化学、蛋白印迹和液质联用检测黑质(SN)DA能神经元功能活动;通过分光光度法检测SN和尾壳核(CPu)处丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物岐化酶(SOD)活性,探讨Ptx预处理对Li-Pc诱发癫痫大鼠DA能神经元的影响及氧化应激的参与。结果 (1)Ptx预处理降低了Li-Pc诱发大鼠的癫痫发作率,显著延长了大鼠的癫痫发作潜伏期(P<0.01);(2)免疫细胞化学和蛋白印迹显示癫痫组大鼠SN和CPu处TH免疫反应强度和蛋白含量比对照组明显降低;与癫痫组相比,PTX组大鼠SN和CPu的TH免疫反应强度和蛋白含量显著增加(均P<0.05);(3)癫痫组大鼠CPu的DA、二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)含量较对照组明显降低;与癫痫组相比,PTX组大鼠DA、DOPAC和HVA含量显著增加(均P<0.05);(4)与对照组相比,癫痫组大鼠SN和CPu的MDA含量明显增多,GSH含量明显减少,SOD活性显著降低;与癫痫组相比,PTX组大鼠SN和CPu的MDA含量明显降低,GSH含量和SOD活性明显升高(均P<0.05)。结论 Ptx预处理缓解了Li-Pc诱发癫痫大鼠脑内的氧化应激状态和DA能神经元功能活动的降低。

老年大鼠脑内多巴胺转运体的表达

目的观察老年大鼠脑内多巴胺转运体(DAT)的表达变化。方法健康雄性Wistar大鼠3月龄、12月龄和24月龄组各20只;应用免疫组织化学和免疫印迹技术观察大鼠脑内多巴胺转运体在衰老过程中的表达。结果大鼠黑质、尾壳核多巴胺转运体免疫反应强度在24月龄组明显低于3月龄(P<0.01)及12月龄组(P<0.05);24月龄组大鼠黑质、尾壳核DAT与β-actin免疫印迹条带相对吸光度的比值低于3月龄和12月龄组(P<0.05,P<0.01)。结论大鼠脑内多巴胺转运体的表达随衰老而减少。

鱼藤酮致帕金森大鼠脑内5-羟色胺和5-羟色胺转运体的表达改变

目的通过观察鱼藤酮处理大鼠脑内相关脑区5-羟色胺(5-HT)和5-羟色胺转运体(SERT)的表达变化,探讨鱼藤酮对5-HT能神经元的影响。方法选用健康成年雄性Wistar大鼠42只,背部皮下注射鱼藤酮制作帕金森病大鼠动物模型,以免疫组织化学染色、免疫印迹法及流式细胞术显示大鼠脑内相关脑区5-HT和SERT的表达变化。结果 1.5-HT:免疫组织化学染色显示,鱼藤酮组大鼠中脑中缝背核5-HT免疫反应阳性神经元数量明显少于对照组(P<0.01),中缝背核和尾壳核5-HT免疫反应强度明显减弱(P<0.01);流式细胞术(间接免疫荧光法)检测显示,鱼藤酮组大鼠5-HT的表达量比对照组明显降低(P<0.01)。2.SERT:免疫组织化学染色显示,鱼藤酮组大鼠中缝背核和尾壳核SERT免疫反应强度明显减弱(P<0.01);免疫印迹法检测发现,鱼藤酮组大鼠中缝背核及尾壳核的SERT与β-actin吸光度比值与对照组相比明显降低(P<0.05)。结论鱼藤酮对5-HT能神经元具有明显的神经毒性。

乙醇对大鼠脑内5-HT能神经体系的影响

目的观察乙醇处理大鼠脑内色氨酸羟化酶（TPH）、5-羟色胺（5-HT）和5-羟色胺转运体（SERT）的表达改变,判断乙醇对脑内5-HT能神经体系的影响。方法以20%乙醇代替饮水饲养30只Wistar大鼠6个月;利用免疫组织化学、免疫印迹及流式细胞术等方法,分析乙醇处理大鼠有关脑区5-HT能神经体系相关指标的改变。结果1.免疫组织化学法可见,乙醇处理组大鼠脑内中缝背核TPH、5-HT免疫反应阳性神经元数量少于对照组（P〈0.01）;TPH免疫阳性神经元直径小于对照组（P〈0.01）;相关脑区TPH、5-HT和SERT免疫反应灰度值比对照组增高（P〈0.05）。2.流式细胞术检测可见,乙醇处理组大鼠TPH、5-HT和SERT的表达量低于对照组（P〈0.05）。3.免疫印迹法检测可见,乙醇处理组大鼠SERT和TPH与-βactin相对吸光度比值均小于相应对照组（P〈0.05）。结论乙醇降低脑内TPH、5-HT和SERT的表达,可能改变脑内5-HT能神经体系的功能活动。

尼古丁处理对大鼠脑内多巴胺转运体和酪氨酸羟化酶的影响

目的观察尼古丁处理大鼠脑内多巴胺转运体(DAT)和酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化,探讨尼古丁处理对大鼠脑内多巴胺(DA)能神经体系的影响。方法选用雄性Wistar大鼠按每日0.4mg/kg腹腔注射尼古丁7d;利用免疫组织化学和免疫印迹法,检测尼古丁处理大鼠有关脑区DAT和TH的表达改变。结果与对照组相比:1.免疫组织化学显示,尼古丁处理组大鼠伏核(NACC)和腹则被盖区(VTA)的DAT灰度值降低了12.43%和12.85%;TH的灰度值则降低了11.87%和10.09%。2.免疫印迹法显示,尼古丁处理组大鼠尾壳核(CPu)-NACC、黑质(SN)-VTA的DAT与β-肌动蛋白(β-actin)条带相对吸光度比值增加了75.68%和117.14%;而TH的比值则分别增加了66.32%和60.31%。结论尼古丁处理增加大鼠脑内DAT和TH的表达,这可能与尼古丁的成瘾机制有关。

乙醇处理与大鼠脑内多巴胺能体系的关系

目的观察乙醇处理大鼠脑内酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)的表达变化,判断乙醇对脑内多巴胺(DA)能体系的影响。方法选取Wistar大鼠60只,随机分为对照组和乙醇处理组,每组30只,乙醇处理组大鼠以20%乙醇代替饮水饲养6个月;利用免疫组织化学、流式细胞术及免疫印迹等方法,分析乙醇处理大鼠有关脑区TH和DAT的表达改变。结果1.免疫细胞化学法研究发现,乙醇处理组大鼠脑内黑质(SN)-腹侧被盖区(VTA)、尾壳核(CPu)和伏核(NACC)TH的灰度值明显低于对照组(P<0.05);尾壳核和伏核DAT的灰度值明显低于对照组(P<0.05)。2.流式细胞术检测发现,乙醇处理组大鼠中脑TH的表达量明显高于对照组(P<0.05)。3.免疫印迹检测发现,乙醇处理组大鼠所观察脑区TH和DAT与β-actin条带相对吸光度比值明显高于对照组(P<0.05)。结论乙醇处理增加大鼠脑内TH和DAT的表达。

老年人脑内多巴胺转运体的表达

目的观察老年人脑内多巴胺转运体的表达。方法以免疫放射自显影技术显示人脑标本神经核团多巴胺转运体免疫反应强度的变化。结果老年组多巴胺转运体免疫反应强度较青年组明显降低;壳、尾状核、中脑黑质腹侧区和背侧区多巴胺转运体免疫反应强度较青年组分别降低了28.22%(P<0.01)、35.55%(P<0.01)、19.25%(P<0.05)和15.41%(P<0.05)。结论老年人黑质纹状体多巴胺转运体的低表达暗示其脑内多巴胺能神经体系的功能减退。

地塞米松对大鼠两种不同功能运动神经元群树突的影响

目的：探讨地塞米松对大鼠趾长伸肌（EDL，快肌）、比目鱼肌（SOL，慢肌）两种不同功能运动神经元（Mn）群树突的影响。方法：大鼠分为注射生理盐水的对照组和注射地塞米松的实验组以霍乱毒素B亚单位结合辣根过氧化物酶（CB-HRP）逆行标记两Mn群，TMB法显示两运动神经元群被标记的树突；以免疫印迹法显示EDL及SOL糖皮质激素受体含量的高低。结果：与对照组比，实验组EDL-Mn群脊髓外侧索白质树突明显增多，其表面积密度比对照组增加了29．89％，平均树突长度比对照组增加了92．54％；SOL-Mn群脊髓外侧索白质树突表面积密度与对照组相比差异无统计学意义，平均树突长度比对照组增加32．26％；EDL糖皮质激素受体与pactin免疫印迹条带相对吸光度比值明显高于SOL，为SOL的2．5倍。结论：地塞米松明显改变大鼠EDL-Mn群的树突构筑，这很可能与EDL含较高的糖皮质激素受体有关。

α-synuclein表达与相关神经系统疾病的关系

Synuclein最初是作为一种突触前蛋白于1988年由Maroteaux等从太平洋电鲟鱼的带电器官中分离得到的，由于它同时分布于神经元的突触前终末和细胞核，因此被称为共核蛋白；免疫组织化学结果显示其分布于突触和核膜，故又命名为突触核蛋白。

鱼藤酮处理大鼠脑内VMAT2及TPH、5-HT的表达改变

目的观察鱼藤酮处理大鼠脑内单胺囊泡转运体2(VMAT2)。色氨酸羟化酶(TPH)及5—羟色胺(5—HT)的表达变化;探讨其对5—HT能神经元的影响及可能机制。方法选用健康、成年雄性Wistar大鼠,背部皮下注射鱼藤酮3d或28d制作大鼠动物模型;利用免疫细胞化学分析VMAT2在大鼠黑质、中缝背核和尾壳核以及TPH、5—HT在中缝背核的表达变化;以透射电镜观察轴突超微结构的改变,探讨鱼藤酮毒性作用的可能机制。结果鱼藤酮3d组:(1)鱼藤酮组大鼠黑质、中缝背核VMAT2的表达增加,免疫反应强度吸光度值显著高于对照组;尾壳核VMAT2的表达减弱,免疫反应强度吸光度值明显低于对照组(P<0.01);(2)鱼藤酮组大鼠中缝背核TPH、5—HT的表达减少,免疫反应强度吸光度值显著低于对照组(P<0.01);(3)透射电镜观察显示鱼藤酮处理大鼠中缝背核轴突变性、其内微管解聚。鱼藤酮28d组:(1)鱼藤酮组大鼠黑质、中缝背核及尾壳核VMAT2的表达均减弱,免疫反应强度吸光度值显著低于对照组(P<0.01或P<0.05);(2)与对照组相比,鱼藤酮组大鼠中缝背核TPH、5—HT的表达降低,免疫反应强度吸光度值显著低于对照组(P<0.01)。结论鱼藤酮降低5—HT能神经元TPH、5—HT的表达,其毒性作用可能与轴突微管解聚导致突触囊泡VMAT2轴浆顺行转运障碍有关。

代谢型谷氨酸受体5在老年小鼠及Fmr1敲除小鼠海马CA1区轴棘突触的配布

目的观察代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)在老年小鼠及Fmr1基因敲除(FMR1-KO)小鼠海马CA1区轴棘突触的配布变化。方法选用3月龄(对照组)、22月龄(老年组)雄性C57BL/6小鼠以及3月龄雄性C57BL/6种系的Fm r1敲-除小鼠各3只。经心灌注固定、震动切片,以银加强纳金包埋前免疫电镜技术对mGluR5在海马CA1区腔隙分子层轴棘突触的突触后分布进行分析。结果 mGluR5标记颗粒主要分布于轴棘突触突触后树突棘质膜内面,突触后致密斑上未见mGluR5标记物的存在。对照组小鼠海马CA1区腔隙分子层轴棘突触mGluR5有29.87%的标记颗粒位于距突触后致密斑边缘60nm的区域内;老年组小鼠有27.02%的标记颗粒位于距突触后致密斑边缘60nm的区域内,与正常组小鼠比较无显著差异;而FMR1-KO小鼠有20.01%的标记颗粒位于距突触后致密斑边缘60nm的区域内,与正常组小鼠比较具有显著差异(P<0.01)。结论衰老未改变海马CA1区轴棘突触mGluR5的配布,Fmr1基因敲除则引起海马CA1区轴棘突触mGluR5配布的改变。

经鼻给予丙酸睾丸酮增加大鼠中脑5羟色胺能神经元的表达

目的：观察经鼻给予丙酸睾丸酮（TP）后大鼠中缝背核色氨酸羟化酶（TPH）及中缝背核、尾壳核与伏核5羟色胺（5-HT）和5羟色胺转运体（SERT）表达的改变。方法：对正常成年雄性及去势大鼠经鼻给予TP21d，利用免疫组织化学观察给药后大鼠中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的免疫反应强度变化。结果：大鼠去势处理降低中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达；去势大鼠经鼻给予TP则可提高中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达，但未达到假手术水平；正常大鼠鼻腔给予TP后，中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达也显著增加。结论：经鼻给予TP增加大鼠中缝背核TPH及中缝背核、尾壳核与伏核5-HT和SERT的表达，为经鼻给予TP辅助治疗衰老过程中出现的运动相关行为障碍及抑郁症状提供实验依据。

多巴胺D1受体在帕金森脑黑质纹状体的表达

目的观察帕金森(PD)病人脑黑质纹状体多巴胺D1受体的表达变化。方法采用免疫放射自显影法观察PD标本(PD组)中黑质纹状体多巴胺D1受体的含量改变,并与非神经系统疾病脑标本(对照组)进行对照研究。结果 PD组多巴胺D1受体标记信号在壳及尾状核比对照组减弱,黑质多巴胺D1受体的标记信号比对照组增强;灰度值分析显示,壳及尾状核的灰度值比对照组分别增加了11.35%和10.52%,而黑质比对照组减了48.89%(P<0.01)。结论多巴胺D1受体在PD人脑标本壳及尾状核的表达降低、黑质表达增加。

衰老对大鼠腰骶髓排尿相关核团5-羟色胺转运体表达的影响

目的观察衰老对大鼠腰骶髓排尿相关核团5-羟色胺转运体表达的影响。方法选取雄性3月龄和24月龄Wistar大鼠各6只,采用免疫组化法观察腰骶髓排尿相关核团5-羟色胺转运体的免疫反应强度及其分布。切片以HPIAS-1000彩色病理图文分析系统测量各月龄组大鼠灰质后连合(DGC)、中间外侧核(IML)、前角运动核(VH)、背外侧核(DLN)、球海绵体肌脊髓核(SNB)和骶副交感核(SPN)SERT免疫反应强度的灰度值。结果 3月龄及24月龄大鼠腰骶髓排尿相关核团均存在SERT免疫阳性纤维及膨体,两组所观察核团未见SERT免疫反应分布方式的改变,但表现SERT免疫反应强度的不同,24月龄组SERT免疫阳性纤维及膨体少于3月龄组大鼠。24月龄组大鼠在脊髓DGC、IML、VH、DLN及SNB的SERT免疫反应强度灰度值明显高于3月龄组(P<0.05)。结论老年大鼠腰骶髓排尿相关核团SERT免疫反应强度的减弱提示5羟色胺能神经纤维对这些核团支配随衰老而减少。

经鼻及皮下给予睾丸酮／丙酸睾丸酮对大鼠相关脑区c-Fos表达效能的影响

目的：探讨经鼻和皮下给予睾丸酮（T）或丙酸睾丸酮（TP）对大鼠中枢神经系统相关脑区激活的效能。方法：利用放射免疫分析法检测大鼠经鼻滴注给予TP后脑脊液和血清睾丸酮浓度的变化；以免疫组织化学观察大鼠各脑区c-Fos的表达。结果：放射免疫结果显示去势组大鼠脑脊液和血清中睾丸酮含量比正常组降低；去势大鼠皮下注射TP后只增加了血清中睾丸酮的含量，去势大鼠和正常大鼠经鼻给予TP后脑脊液和血清中睾丸酮的含量均明显增加；去势大鼠经鼻给予TP脑脊液中睾丸酮的含量高于去势皮下注射TP组，而血清中睾丸酮的含量低于去势皮下注射TP组。免疫组织化学结果显示正常大鼠鼻腔给予TP或睾丸酮增加大鼠多数脑区的c-Fos免疫反应阳性神经元数目和c-Fos免疫反应强度，而皮下注射TP只增加了少数脑区c-Fos免疫反应阳性神经元数目以及c-Fos免疫反应强度。结论：经鼻给予睾丸酮或TP后能够激活多数脑区c-Fos蛋白的表达，经鼻给予睾丸酮或TP的给药方式有可能成为治疗因雄激素低下导致的中枢神经系统疾病的一种有效手段。

鼻腔给予丙酸睾丸酮对大鼠行为及中脑多巴胺能神经元的影响

目的：观察鼻腔给予丙酸睾丸酮（TP）后大鼠行为以及黑质纹状体酪氨酸羟化酶（TH）和多巴胺转运体（DAT）表达的改变。方法：对正常成年雄性及去势大鼠鼻腔给予TP21d，分别利用开放广场实验和免疫组织化学技术观察给药后大鼠的行为及黑质和尾壳核TH及DAT的免疫反应强度变化。结果：开放广场实验结果显示正常大鼠鼻腔给予TP后水平运动得分、垂直运动得分、运动总径长比正常对照组增加；去势大鼠鼻腔给予TP后上述行为比去势组增加，但仍低于正常对照组。免疫组织化学结果显示正常大鼠鼻腔给予TP后黑质和尾壳核的TH及DAT免疫反应强度高于正常对照组；去势大鼠鼻腔给予TP后黑质和尾壳核的TH及DAT免疫反应强度高于去势组，但未达到正常对照组。结论：鼻腔给予TP增加大鼠的运动行为以及黑质和尾壳核TH和DAT的表达。

左旋多巴对大鼠中脑5羟色胺能神经元的影响

目的：观察左旋多巴对大鼠脑内5羟色胺（5-HT）能神经元的影响。方法：左旋多巴大鼠灌胃，以免疫细胞化学和流式细胞术显示5-HT及色氨酸羟化酶（TPH）免疫反应物质或含量的变化。结果：免疫细胞化学显示左旋多巴组大鼠中缝背核5-HT能神经元细胞直径明显小于对照组；中缝背核5-HT和TPH免疫反应物质灰度值比对照组分别增高了7．72％和16．57％。流式细胞术显示左旋多巴组5-HT的表达量比对照组减少了18．45％，TPH表达量比对照组减少了19．90％。结论：左旋多巴降低脑内5-HT能神经元5-HT和TPH的表达。

丙酸睾丸酮早期处理对大鼠脑内5-羟色胺及其转运体的影响

目的：观察丙酸睾丸酮（TP）早期处理对大鼠脑内5-羟色胺（5-HT）及其转运体（SERT）的影响。方法：对生后第7天（PND7）的雄性Wistar乳鼠皮下注射TP至生后第21天（PND21），利用免疫组织化学和免疫印迹法观察生后第49天（PND49）实验大鼠中缝背核和尾壳核5-HT及SERT表达的变化。结果：免疫组织化学结果显示TP早期处理增加大鼠中缝背核和尾壳核处5-HT和SERT的免疫反应强度，中缝背核和尾壳核5-HT的灰度值比对照组分别降低了11．38％和7．90％，SERT的灰度值比对照组分别降低了6．79％和8．81％；免疫印迹结果显示TP早期处理增加大鼠脑内中缝背核和尾壳核处SERT的表达，中缝背核和尾壳核处SERT与β-actin相对吸光度比值比对照组分别升高了86．06％和26．29％。结论：TP早期处理影响大鼠脑内5-HT能神经，导致中缝背核和尾壳核5-HT和SERT增加。