白腐菌产漆酶的纯化及部分酶学性质

对白腐菌W 1产生的漆酶粗酶液通过超滤浓缩、分子筛和离子交换层析进行纯化 .用SDS PAGE证明该酶的分子量大约为 6 2 4kD .等电聚焦电泳显示该酶的等电点为 3 5 .酶反应的最适温度为 5 0℃ ,最适pH值为 4 5 .此酶氧化DMP的Km 值为 3 84× 10 -5mol L .金属离子对酶活的影响很大 ,其中K+ 、Mn2 + 、Ag+ 对酶活有促进作用 ,Fe2 + 、Fe3 + 、Hg2 + 、Co2 + 、Ba2 + 等对酶活有明显的抑制作用 .

一株白腐菌产生的漆酶对RB亮蓝的脱色作用

W 1是一株能在液体条件下产漆酶的白腐菌 ,纯化的漆酶对RB亮蓝有很好的脱色作用 .漆酶的最适脱色温度为 4 5℃ ,最适脱色pH值为 6 .0 ,脱色pH范围在 4～ 7之间 .当溶液中漆酶活力为 2 .0× 10 3 U/L时 ,在最适脱色条件下、16h内 ,RB亮蓝 (30 0mg/L)的脱色率可以达到 90 % .经酶作用后 ,RB亮蓝在 4 30～ 70 0nm范围内的特征颜色吸收峰基本消失 .实验证明 ,在相同的条件下 ,漆酶粗酶对RB亮蓝有更好的脱色效果 .图 7表 1参

层孔菌产漆酶的摇瓶最适培养条件研究

筛选到一株高产漆酶的层孔菌W 1 ,对其液体产漆酶的培养条件进行了优化 ,确定了最适的碳源、氮源 ,并用正交试验确定了培养基中碳源和氮源的浓度。在最优化的培养条件下 ,培养 7d后 ,W 1产生的漆酶活力可以达到 7 1U/mL。采用补料的方法 ,可以得到大量的漆酶粗酶液。

高效选育产氢光合细菌的研究

降解有机废水转化太阳能为氢能是一条理想制氢途径 .为使选育的菌株实用性更强 ,本文选用有机废水主要降解产物—乙酸为唯一氢供体 ,在自然生态环境条件下 ,利用紫色非硫细菌培养基 ,紫色硫细菌培养基和绿硫细菌培养基 ,从不同的水域环境中进行了产氢光合细菌的筛选 .从影响太阳能转化效率主要因素出发 ,本文对分离纯化的 1 5株光合细菌进行形态学特征研究基础上 ,着重进行了最适生长温度、光合色素成分、利用硫化物能力和耐盐能力的测定 ,并将其分为 4个类群 .在对每组细菌初筛基础上 ,本文对选育出的 8个菌株进行了生长动力学测定 ,其中Z ,SP2 ,R3,Y7菌株能利用乙酸快速生长 .对其产氢动力学研究表明 ,这些菌株均具有光合放氢活性 ,其中Z菌株产氢得率最高 .在含有 2 0mmol·L-1 乙酸钠和 5mmol·L-1 谷氨酸钠的培养基中 ,其产氢得率为 3 0 8.9ml·g-1 .这 4个菌株生理生态特性完全不同 ,且能利用乙酸光合放氢 ,在有机废水光合制氢技术中具有重要的潜在应用价值 .

桉木RDH硫酸盐法制浆性能的研究

研究了桉木RDH(快速置换加热 )硫酸盐浆的制浆性能。对桉木RDH硫酸盐法制浆时 ,用碱量、H 因子、白液的硫化度以及在温黑液预处理段温黑液的活性碱浓度和硫化度等蒸煮条件 ,对最终制浆结果的影响进行了研究。结果表明 :与常规硫酸盐法制浆相比 ,RDH硫酸盐法制浆时的用碱量相对较高 (常规KP法和RDH法的用碱量分别为 1 4 %和 1 5 % ,Na2 O计 ) ,但RDH纸浆的硬度较低 (分别为1 7 0和 1 1 7) ;在纸浆达到相似或较低硬度的情况下 ,RDH法制浆可以缩短蒸煮时间 ,或在相同的H 因子下 ,降低纸浆的卡伯值 ;在一定的范围内提高白液蒸煮段白液的硫化度 ,可以降低RDH纸浆的卡伯值或提高纸浆的得率 ;在温黑液预处理段 ,温黑液的活性碱浓度和硫化度会对RDH纸浆的最终结果产生较大的影响。对纸浆物理性能的分析结果表明 ,RDH纸浆在低卡伯值条件下也具有较高的强度性能 ,但与常规硫酸盐浆相比 ,RDH纸浆的撕裂强度相对较高而抗张强度相对较低。

假单孢菌碱性木聚糖酶分子活性部位的研究

应用多种化学修饰剂对假单孢菌G6 2产生的碱性木聚糖酶A(XynA)进行了修饰 .结果表明 ,作用于色氨酸和谷氨酸 (和 /或天冬氨酸 )的试剂NBS(N Bromosuccinimide)和WRK(N Ethyl 5 phenylisoxazolium 3 sulfonate)可分别使酶活明显降低 ,而作用与丝氨酸、精氨酸、酪氨酸的试剂对酶活无明显影响 .XynA的化学修饰动力学分析表明 ,每个酶分子中有 1个色氨酸残基和 1个谷氨酸 (或天冬氨酸 )残基对酶的活性特别重要 .NBS的滴定结果表明 ,木聚糖的加入可使 1个色氨酸残基被保护 ,木聚糖对NBS的荧光猝灭有 2 2 %的保护作用 .0 .2 %的燕麦木聚糖可完全阻止NBS对XynA的修饰作用 ;而即使 2 %的木聚糖也不能阻止WRK的灭活作用 .NBS可使XynA的Km 增大 4倍 ,而WRK可使其Vmax降低三分之二 .这些结果表明 ,色氨酸和谷氨酸 (或天冬氨酸 )残基位于XynA的活性部位 ,且前者位于XynA的底物结合中心 ,后者位于酶的催化中心 .图 6表 1参

降解原油微生物的筛选及其部分特性的研究

筛选得到 4株可利用原油为碳源生长的菌株 ,初步鉴定为假单胞菌。这 4株菌对原油有很好的降黏作用 ,它们能利用长链烷烃生长 ,并且能耐受一定的温度、压力和矿化度。其中的M 3菌除降黏外还能产生酸和生物表面活性剂 ,在以原油为碳源的培养基中进行培养时 ,可以使培养液的表面张力从 72mN/m降至 3 6mN/m ,pH值从 7.0降至约 5 .5。实验证明M 3菌液在室内条件下能提高原油采收率 8.8%左右 ,在微生物采油中有很好的应用潜力。

芽孢杆菌L-32发酵条件优化及提高原油采收率实验研究

经筛选得到了一株能以原油为碳源进行生长繁殖的菌株 ,初步鉴定为芽孢杆菌 (L 32 ) ,对其发酵条件进行了优化 ,确定出最佳的发酵条件 ,并确定了厌氧条件下以原油为碳源时的培养基成分。通过补加葡萄糖使其浓度保持在8g/L的方法可以提高菌体的浓度。实验结果表明 ,L 2 3可以以原油为碳源生长 ,并能在降低原油粘度的同时使原油培养基内水相的pH值下降。L 2 3能提高实验岩心的原油采收率 ,即在关井 96h后 ,L 2 3可使原油采收率提高 9.6 %左右。

可用于造纸废水处理的抗性菌株选育及处理效果研究

用逐步提高底物浓度的方法 ,定向选育出抗造纸废水毒性并能有效降低废水CODCr含量的几株高效白腐菌株 ,对其中Z - 1、Z -2和Z - 3等 3株菌株处理造纸中段废水的效果进行了研究。结果表明 ,3种菌株均可以有效地降低废水的CODCr含量 ,但其各自的处理效果有所不同。菌株Z - 1可以有效地降低废水的CODCr及使废水脱色 ,同时还可以降低废水的pH值 ,处理 4天后 ,色度降低 82 61 % ,处理 6天 ,CODCr含量降低 63 44% ,废水pH值从中性下降到pH值 2左右的水平 ;而菌株Z - 2和Z - 3在降低废水CODCr含量的同时 (其中用Z - 2处理 2天 ,CODCr含量下降 69 1 5% ) ,废水的色度有所增加 ,但pH值在处理过程中基本保持稳定。就处理效果而言 ,其顺序为Z -1 >Z - 2 >Z - 3。此外 ,用驯化后的菌株Z - 1直接处理蒸煮浓黑液也表现出了良好的效果 ,显示出菌株Z - 1具有良好的工业应用前景。

利用石油微生物处理石油污水的初步实验

从油井的油层水中筛选到一株利用原油为碳源生长的芽孢杆菌M-1,当将其应用于石油污水处理时,在接种量为10%的条件下,能将污水的CODCr降低70%左右.当在污水中加入质量浓度为1 g/L的(NH4)2SO4时,能使M-1对污水CODCr的去除率达到80%以上.M-1在室内条件下最适处理污水的温度为45℃.利用固定化的M-1也可以使加入(NH4)2SO4污水的CODcr降低70%.经M-1处理后的污水在210～300nm范围内的光吸收明显降低.因此,M-1在石油污水处理中有很好的应用潜力.

假单胞菌L-11产生生物表面活性剂发酵条件的优化

确定了假单胞菌L-11用葡萄糖为底物产生生物表面活性剂的最适发酵培养基组成和发酵条件。在1L的发酵罐中,L-11的发酵液（10％）与原油的界面张力可以达到5.3×10-3mN/m。该产品可以用于微生物提高原油采收率的实验研究。对其放大工艺也进行了初步的研究。

应用假单胞菌进行防蜡作用的研究

假单胞菌L 11菌体与其胞外产物可以作为一种很好的防蜡剂 .对L 11的发酵条件进行了优化 ,确定了最适发酵培养基的配方 ,发酵培养基以葡萄糖、蛋白胨为其最适碳、氮源 .防蜡剂生产的发酵条件为 :前 16h的发酵温度为35℃ ,后期将温度降至 2 0℃ .发酵液的pH =4 .5时为发酵终点 ,此时发酵液在室内条件下的防蜡率为 78% .将上述所得菌液在大庆油田做了防蜡实验 ,结果表明 ,注入L 11的油井洗井周期有所延长 .实验证明了L 11的发酵液可以作为一种经济、有效的防蜡剂 .图 2表 3参

用假单胞菌进行三次采油的研究

从大庆油田油层水中分离得到的 1株假单胞菌P - 2 1,对其发酵液进行研究。室内实验证明 ,8%的P - 2 1发酵液与原油混合 ,在 4 5℃的条件下作用 2 4h ,对原油的降粘率达到 57 8% ,防蜡率达到80 %。而 10 %的P - 2 1发酵液可以使人工岩芯中的原油采收率提高 11 2 % ,同时使注入压力下降38 4 %。因此 ,P - 2 1在微生物提高原油采收率中有很大的应用潜力。

芽孢杆菌发酵条件的优化及其在室内条件下提高原油采收率的初步研究

筛选到一株可以在厌氧条件下以原油为唯一碳源生长的芽孢杆菌L - 2 3。对其中试发酵条件进行了优化 ,确定了L - 2 3的最适发酵条件 ,用补料的方法控制葡萄糖浓度在 0 .6% ,在 16h内 ,发酵液的菌体浓度可以达到 5 .2× 10 9cell mL。把 5 %的L - 2 3发酵液加入到原油中 ,在 4 5℃条件下培养 2 4h ,能够使原油粘度降低 2 8%。在室内条件下 ,L - 2 3可以使原油的采收率提高 11%以上。实验证明 ,用L - 2 3进行微生物采油有很好的应用前景。

酶处理改善麦草化学制浆效率研究

研究了在麦草化学制浆前对麦草进行酶处理时酶用量、反应时间及洗涤方式等因素对化学制浆效果的影响,并对酶处理后麦草浆物理性能的变化进行了研究。

芽孢杆菌DY-32对原油的降粘作用

筛选得到了一株能利用原油为碳源生长的菌株DY - 32 ,实验中发现此菌对不同的原油都有降粘效果。环境因素如培养时间、接种量及培养温度对降粘率影响很大 ,确定其最适降粘温度为 55℃ ,而培养基的pH值和NaCl浓度对降粘率的影响不显著 ,但辅助营养物质的加入能够提高DY - 32的降粘率。气相色谱的结果表明原油经DY - 32作用后 ,其中的一些组分被降解 ,因此 ,此菌能降粘的主要机理是通过其在原油培养基中生长利用了原油中的组分达到了降粘目的。

几种简单的分离生物表面活性剂产生菌的方法

简单地介绍了几种比较常用的生物表面活性剂的筛选方法,列出了每种方法的主要步骤并作了讨论。在实验中可根据不同的实验目的选择不同的筛选方法。