KL－天然活性剂对提高绿僵菌白僵菌毒力的研究ⅡKL对白僵菌绿僵菌防治害虫的增效作用

用金龟子绿僵菌（Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）３３０５－６、球孢白僵菌（Ｂｅａｕｖｅｒｉａｂａｓｓｉａｎａ）９１３９布氏白僵菌（Ｂｅａｕｖｅｒｉａｂｒｏｎｇｎｉａｒｔｉｉ）７２０１的分生孢子混以天然活性剂后与试管鲜土拌匀引入两星牧场金龟的室内生测，用球孢白僵菌９１３９菌剂混以天然活性剂防治玉米暝的小区试验结果表明，在玉米喇叭口期加有ＫＬ－天然活性剂的比对照有明显缩短害虫病程、提高真菌病原毒力的效果。

蛹虫草液体种制备及发酵生产菌丝体和虫草菌素工艺优化

为获得蛹虫草液体种制备和液体发酵生产菌丝体和虫草菌素的最佳工艺,以蛹草拟青霉Peacilomyces militarisBCEC07菌株为菌种,通过对接种量(孢子浓度)的考察,探索不同孢子浓度对蛹虫草液体母种制作效果的影响;通过单因素和正交试验,优化生产虫草菌素各营养因子的最佳种类和配比。结果表明:在1.5×1010孢子数的接种量时制作的母种最适合用于蛹虫草液体发酵产菌丝体和虫草菌素;蔗糖、蛋白胨、MgSO4.7H2O、K2HPO4和NAA是最适合的碳源、氮源、无机盐及生长因子;工艺优化后得出蛹虫草液体发酵产菌丝体的最佳配方为30g/L蔗糖、25g/L蛋白胨、1.5g/L KH2PO4、0.5g/L MgSO4.7H2O和4.0mg/L NAA;产虫草菌素的最佳配方为:30g/L蔗糖、25g/L蛋白胨、1.5g/L KH2PO4、0.5g/L MgSO4.7H2O和3.0mg/L NAA。优化后生物量和虫草菌素总产量分别提高了43.00%(达31.60g/L)和31.60%(达645.12mg/L)。为进一步提高蛹虫草菌丝体及虫草菌素的单位产量提供参考。

前体及营养物提高蛹虫草虫草菌素产量的研究

研究不同前体及营养物对蛹虫草液体深层发酵产胞外虫草菌素的影响,并优化其促进虫草菌素生产的最佳添加条件。结果表明:添加腺嘌呤、甘氨酸、腺苷、L-谷氨酰胺4种前体或营养物能大幅提高蛹虫草液体发酵胞外虫草菌素的产量。两种前体和营养物能够通过协同互补作用提高胞外虫草菌素的产量,而且腺嘌呤的组合添加效果明显高于腺苷组合,特别是1g/L的腺嘌呤与8g/L的甘氨酸组合添加胞外虫草菌素产量达到1644.21mg/L,是基础培养基的4.66倍。不同前体及营养物添加发酵后其核苷类物质的含量表明:80%的虫草菌素被分泌到发酵液中,蛹虫草整个核苷酸代谢系统是紧密相连的,很多核苷类物质都能直接或间接转化成虫草菌素。

添加前体促进蛹虫草发酵生产菌丝体和虫草菌素的研究

研究了不同前体及营养物对蛹虫草液体发酵产菌丝体和虫草菌素的影响,并优化了其添加条件。结果表明添加前体及营养物能大幅提高蛹虫草液体发酵菌丝体及其中虫草菌素的含量,通过对9种供试前体及营养物进行筛选,确定能有效提高菌丝体及其中虫草菌素含量的物质是腺嘌呤、甘氨酸、腺苷、L-谷氨酰胺4种。2种前体及营养物能够通过协同互补作用提高虫草菌素产量,腺苷的组合添加效果明显高于腺嘌呤组,特别是2g/L腺苷和16g/LL-谷氨酰胺组合添加胞内虫草菌素含量达到了25.92mg/g(是原来的282.97%),菌丝体产量也达到28.5g/L(是原来的157.89%)。

两株石斛内生炭角菌的鉴定及活性成分初步研究

对石斛内生炭角菌进行鉴定及活性成分初步研究。从流苏石斛的茎和长苏石斛的叶片中分离出两株炭角菌,将其编号为lsjz和csyz。运用形态学和分子生物学相结合的方法对这两株菌进行鉴定,结果表明:lsjz和csyz为Xylaria venosula。并测定了这两株菌的发酵终点、胞内及胞外多糖含量、胞内及胞外水溶性蛋白含量、抑菌活性等。

石斛抗真菌内生细菌的筛选及其抗菌特性的初步研究

从药用植物石斛组织中分离到4株具有抗真菌活性的细菌菌株,其中DEB-2菌株具有比较稳定的抗真菌作用,能强烈抑制多株植物病原菌、人体病原菌、植物内生菌和食品腐败菌,显示该菌在植物真菌病害的防治、抗真菌药物的筛选、食品防霉变和植物组织培养污染真菌的防治上有一定的应用前景;抗菌机理观察,发现被拮抗菌丝尖端均有不同程度变粗、膨大、崩解或者菌丝分枝增多的现象,表明被拮抗菌丝的细胞壁可能被破坏,使细胞内原生质流出而抑制其菌丝的尖端生长.

贵州野生春兰遗传多样性的RAPD分析

采用RAPD标记对贵州及周边分布的野生春兰遗传多样性进行分析。结果表明：筛选的48个引物共扩增了324条600～2000bp带,其中201条（62.0%）显示多态性,RAPD标记可以有效地用于春兰野生资源遗传多样性评价;原产于贵州不同居群间样品的遗传差异性较大,多态性百分率为36.8%（荔波样品）～69.8%（黎平样品）,高于60%的样品占全部贵州样品的1/3,分布于全省5个地州市;聚类分析显示,样品的聚类具有很强的地域性,特别是贵州样品表现更为明显,来自川西的样品和黔北、黔东北的样品具有很高的同源性。

银杏产黄酮内生真菌的分离与鉴定

为实现真菌发酵生产黄酮,用HPLC和氯化铝比色法,从四川、贵州、山东等地采集的银杏根、茎、叶中分离到7株产黄酮真菌。分子和形态学鉴定结果表明:这些菌株分别属于Colletotrichum和Fusarium,菌株QC102经鉴定为Colletotrichumacutatum Simmonds,其总黄酮产量为8.2μg/mL。

古尼拟青霉的毒理及药用价值研究概况

对古尼拟青霉的毒性、致畸、致突变和药用价值的研究进行了概述。研究表明,古尼拟青霉无致畸、致突变作用,属无毒性类物质,并具有多种药用功能:镇静、镇痛、调节机体免疫力、抗衰老、抗癌、增强记忆、预防和治疗高脂血症、抗心律失常、降低心肌耗氧、耐急性缺氧等。古尼拟青霉的药用价值及开发前景值得关注,有待深入研究。

植物内生真菌及其活性代谢产物研究进展

植物内生真菌是一大类未被充分研究过的真菌,其物种及代谢产物均具有生物多样性,现今从植物内生真菌中得到的活性物质种类远比从土壤微生物中得到的多。对植物内生真菌的研究具有重要的生态学意义和经济学意义,在各个领域中应用前景广泛。作者主要综述了植物内生真菌及其活性物质研究的最新进展。

蛹虫草高产胞外虫草素和虫草多糖的诱变育种

通过诱变获得高产胞外虫草素和虫草多糖的蛹虫草菌株。采用紫外线诱变(UV)、化学诱变(LiCl)、复合诱变(UV-LiCl)3种方式对蛹虫草孢子进行诱变;发酵检测存活菌株的胞外虫草素和虫草多糖的含量。结果:以胞外虫草素为指标,3种诱变方式的最大正突变率分别为化学突变(29.2%)>紫外突变(28.6%)>复合诱变(26.5%);以胞外多糖为指标,最大正突变率分别为紫外诱变(35.7%)>复合诱变(33.3%)>化学诱变(27.0%)。紫外诱变突变株Z-5-1胞外虫草素产量达0.842g/L,比出发菌株高311%;紫外诱变突变株Z-4-7胞外虫草多糖产量达5.250g/L,比出发菌株高148%。在连续培养5代后,仍具有较好的遗传稳定性。紫外诱变能获得较高的蛹虫草正突变率,同时能获得高产虫草素、虫草多糖的突变株。

固体培养条件对蛹虫草产子实体和虫草菌素的影响

研究了营养液不同pH值和米粒大小两个培养条件对蛹虫草固体发酵产子实体和虫草菌素的影响。当营养液pH值为5．5～6．0时子实体的产量最大，营养液pH值为6．5时，虫草菌素总的产量最大，达48．44g／瓶。较大的米粒有利于蛹虫草子实体的生长，较小的米粒有利于蛹虫草虫草菌素的积累。子实体的产量随着米粒的变小而减少；子实体中虫草菌素的含量随着米粒的变小而增加。当采用整米作为培养基基质时，蛹虫草子实体产量最大，达1．67g／瓶，当采用40目米＋10目米（1：1，M／M）作为培养基基质时，蛹虫草子实体中虫草菌素含量最大，达1．87％，虫草菌素总的产量也最大，达52．46mg／瓶。

经络气血理论的生物物理论证

目的:用现代生物物理原理论证中医经络气血理论。方法:应用多电极电生理技术记录生物电传导。结果:针刺引起生物电循古典经脉线路传导。结论:中医数千年最神秘的"气"即是现代的生物电;红细胞在血液循环中不断消耗氧气、营养物质和二氧化碳来产生生物电,红细胞是类似燃料电池功能的集群流动发电机;毛细动脉管、毛细静脉管、毛细淋巴管、细胞间隙组织液电解质网络和细胞群的复式微循环构成了古典中医经络三维解剖结构的最小单位,是所有组织和器官解剖结构的共性;十二正经和奇经八脉是由复式微循环最小单位形成的有着特殊结构的生物电主干天然通道;在特定的穴位,多条毛细动脉管生物电路、毛细静脉管生物电路、毛细淋巴管生物电路、细胞间隙组织液生物电路以及细胞群分别携带独立生物电流,经捻转提插行针刺激放大后多条电路并联,受刺者就会因电流的加强而感到酸麻胀痛的电刺激作用,这就是古典针灸"得气"术语的实质意义,也是针灸通过调动、激发人体自身能量治疗病痛的原理。

猕猴桃灰霉病拮抗解淀粉芽孢杆菌X17可湿性粉剂的研制

以植物内生解淀粉芽孢杆菌X17为研究对象,通过对载体、分散剂、润湿剂、稳定剂、保护剂的筛选,确定了内生解淀粉芽孢杆菌X17可湿性粉剂最佳配方:硅藻土10%,羧甲基纤维素钠4%,十二烷基硫酸钠6%,甲基纤维素2%,糊精0.1%。结果显示,制备的解淀粉芽孢杆菌X17可湿性粉剂在25℃室温下芽孢含量为2.0×10^(10) cfu/g,pH 7.0,悬浮率78%,润湿时间35 s,细度通过率99%,制剂贮藏6个月存活率达78%。盆栽试验结果表明,内生解淀粉芽孢杆菌X17可湿性粉剂和母粉500倍液对猕猴桃灰霉病的保护效果分别为80.59%和68.82%,菌株X17可湿性粉剂的防治效果优于其母粉。

DEB-2菌株对贵州苹果早期落叶病病原的毒力效应

为苹果早期落叶病的生物防治提供依据,采用组织分离法分离病原、形态与分子鉴定方法鉴定贵州苹果落叶病病原,用生物测定法研究DEB-2菌株对贵州苹果早期落叶病病原的毒力效应。结果表明:贵州苹果早期落叶病主要为苹果轮斑病和苹果斑点落叶病,其病原分别为轮斑病病原(Alternaria mali)和苹果斑点落叶病病原(Altemaria alternata);DEB-2菌株发酵液对A.mali和A.alternata抑制菌丝生长的EC50值分别为1.34%和0.12%;对抑制孢子萌发的EC50值分别为2.32%和5.32%。DEB-2菌株发酵液有效地抑制了贵州苹果早期落叶病原菌的菌丝生长和孢子萌发。

青蒿内生真菌Alternaria sp.(PQH12)提取物体外细胞毒活性及抗氧化活性的研究

本文分别采用环己烷、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、甲醇5种极性不同的溶剂分别提取青蒿内生真菌Alternaria sp.(PQH12)的菌丝体。采用MTT法分别测定不同极性溶剂提取物对3种肿瘤细胞株(HL-60、MCF-7和COLO205)的生长抑制率,采用DPPH自由基清除法和超氧阴离子O-·2清除法评价了青蒿内生真菌Alternaria sp.(PQH12)不同极性溶剂提取物的抗氧化活性。结果显示,正丁醇和乙酸乙酯提取物均表现出对肿瘤细胞生长的抑制作用;浓度为20μg/mL时,正丁醇提取物对HL-60细胞的生长抑制率为80.56%,乙酸乙酯提物对MCF-7和COLO205细胞的生长抑制率分别为54.47%和83.09%;在两种抗氧化活性评价体系中,甲醇提取物的抗氧化活性均明显优于其他溶剂的提取物,其IC50值分别为0.20 mg/mL(DPPH)和0.19 mg/mL(O-·2)。该结果表明,青蒿内生真菌Alternaria sp.(PQH12)具有较好的细胞毒和抗氧化潜力,具有一定的开发利用价值,可以作为进一步实验研究的对象。

植物内生菌及其在农业和医学上的用途

植物内生菌是一种新的微生物资源,具有潜在的药用价值。近年来,从植物内生菌中寻找新的生物活性物质的研究方兴未艾。现就植物内生菌的界定、种类及近年来从植物内生菌中发现的抗肿瘤、抗微生物、抗病毒、杀虫、植物生长调节剂等活性化合物及其相应的产生菌的研究作一简要综述。

银杏黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数的测定

目的测定银杏黄酮苷元中3种黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数。方法采用饱和溶液法和摇瓶法,分别测定银杏黄酮苷元的平衡溶解度和表观油水分配系数,采用高效液相色谱法测定样品溶液的浓度。结果 25℃时,3种黄酮苷元的平衡溶解度均较小,其中槲皮素和山柰素在水中的平衡溶解度均为最大值,三者平衡溶解度分别为17.16,32.48和1.13μg.ml-1,槲皮素和山柰素的平衡溶解度受溶剂pH影响较大,而异鼠李素的平衡溶解度受溶剂pH影响较小;3种黄酮苷元在不同的pH溶剂中各自的Log P差别不大,pH对3种黄酮苷元的油水分配系数影响不显著,其中槲皮素和山柰素的油水分配系数均较大。结论银杏黄酮苷元为典型的疏水性药物。

大豆苷元药剂学研究进展

大豆苷元是广泛分布于豆科植物中的一种异黄酮类化合物,有较强的心血管系统作用,具有多种保健和药理作用,近年来受到国内外医药和食品界的广泛重视。综述了大豆苷元的理化性质、生物药剂学(吸收、分布、代谢和排泄)、药物动力学和制剂学4个方面的最新研究进展,为进一步认识、开发、利用大豆苷元类物质提供参考。