肿瘤中C／EBPα基因的研究进展

C/EBPα是转录因子C/EBP家族的重要成员,具有促进细胞分化、抑制组织细胞增殖的功能。最近的研究表明,在一些类型的肿瘤中C/EBPα作为抑癌基因而导致细胞分化紊乱和细胞周期停滞。该文对C/EBPα基因在肿瘤组织中的作用及研究进展作一综述。

高表达内皮脂酶对平滑肌细胞生物学特性的影响及意义

目的内皮细胞(EC)与平滑肌细胞(SMC)相互作用是动脉粥样硬化的重要病理生理特征,而内皮脂肪酶(EL)是内皮细胞在受致动脉粥样硬化因素作用后高表达的一种酶。目前尚无关于内皮细胞表达EL后对平滑肌细胞的生物学特性影响报道。方法通过质粒转染法使脐静脉内皮细胞(HUVEC)高表达EL(简称HUVEC-EL),并与正常HUVEC对照,采用共培养技术观察HUVEC高表达EL后对内皮细胞的增殖、迁移、EL表达的影响。结果内皮细胞高表达EL后,可促进共培养的平滑肌细胞的增殖、迁移,但平滑肌细胞所表达EL量减弱。结论内皮细胞高表达EL后对共培养平滑肌细胞的生物学活性产生影响,这些影响可能参与动脉粥样硬化的病理生理过程。

脐静脉内皮细胞高表达内皮脂肪酶后其生物学特性的变化及意义

目的:探讨内皮脂肪酶(EL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生物学特性的影响。方法:通过质粒转染法使HUVEC高表达EL(HUVE-EL),并与正常HUVEC对照,观察高表达EL对HUVEC的增殖、迁移和凋亡的影响。结果:高表达EL后,HUVEC的增殖能力和速度均减弱(P<0.05),但向病损区的迁移能力增强,其凋亡率亦增加(P<0.05)。结论:内皮细胞高表达EL后对内皮细胞自身的生物学活性有影响,这可能与动脉粥样硬化的病理生理过程有关。

内皮脂肪酶对人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的影响及量效关系

目的研究内皮脂肪酶（endothelial lipase，EL）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）黏附分子ICAM-1表达的影响及量效关系。方法以TNF-α（10ng／ml）刺激HUVEC，用RT—PCR检测黏附分子ICAM-1 mRNA表达的变化；以50ng／ml EL抗体进行预处理，再检测黏附分子mRNA表达的变化；再用0～50ng／ml不同浓度EL抗体对HUVEC进行预处理，检测不同浓度EL抗体作用后ICAM-1 mRNA表达的变化。结果HUVEC受TNF-α作用后，ICAM-1表达显著增加（P〈0．01），该作用可为EL抗体所拮抗，这种拮抗作用呈现剂量依赖性增强（P〈0．01，P〈0．05）。结论EL可呈剂量依赖性的促进内皮细胞表达ICAM-1，提示TNF-α作用于HUVEC产生的EL可促进黏附分子ICAM-1的表达。

内皮脂酶对人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的影响

目的研究人脐静脉内皮细胞（HUVECs）表达黏附分子与内皮脂酶（EL）的关系，以及EL对内皮细胞黏附分子表达的影响。方法以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）10μg／L刺激HUVECs，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管内皮黏附分子-1（VCAM-1）和E-选择素的mRNA表达变化，以50μg／L的抗EL抗体进行预处理，再检测黏附分子mRNA表达的变化。利用凝胶成像系统拍照、分析、计算黏附分子产物相对含量。结果TNF-α作用于HUVECs后，黏附分子ICAM-1、VCAM-1和E-选择素的mRNA表达均增高，与正常对照组比较差异有统计学意义（P均〈0．01）；该作用可被50μg／L的抗EL抗体所拮抗（P〈0．05或P〈0．01）。结论EL参与了内皮细胞黏附分子表达的调控，推测它可能通过影响内皮细胞黏附分子表达而参与动脉粥样硬化的病理生理过程。

乳腺炎症性肌纤维母细胞瘤1例报道

乳腺炎症性肌纤维母细胞瘤是一种较少见的乳腺的肿瘤性病变，我们查阅文献，中文文献1994年迄今仅见一例报道，英文文献报道21例。本文报道乳腺炎症性肌纤维母细胞瘤，并结合文献复习讨论该病的临床病理特征，诊断、鉴别诊断及预后。

非小细胞肺癌组织中THRSP、ACACA的表达及其与临床预后的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中甲状腺激素应答蛋白Spot 14(THRSP)、乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)的表达及与临床特征、预后的关系。方法选取112例NSCLC患者作为研究对象,收集NSCLC患者的癌组织标本(NSCLC组)及对应的癌旁组织标本(癌旁组)。采用免疫组化法检测组织中THRSP、ACACA表达水平。采用χ2检验分析THRSP、ACACA表达与NSCLC患者临床病理特征的关系,采用多因素Cox回归分析影响NSCLC患者预后的危险因素。结果NSCLC组THRSP阳性表达率高于癌旁组(55.35%vs 36.61%)(χ^(2)=7.926,P=0.005);NSCLC组ACACA阳性表达率高于癌旁组(64.29%vs 43.75%)(χ^(2)=9.508,P=0.002)。低分化、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移的NSCLC患者THRSP、ACACA阳性表达率高于中/高分化、TNM分期为Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P<0.05)。低分化、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移、THRSP阳性表达、ACACA阳性表达NSCLC患者的3年生存率低于中/高分化、临床分期为Ⅱ期、无淋巴结转移、THRSP阴性表达、ACACA阴性表达患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,低分化(HR=2.277,95%CI:1.655~3.135)、TNM分期为Ⅲ期(HR=2.545,95%CI:1.816~3.565)、THRSP阳性表达(HR=3.575,95%CI:1.978~6.462)、ACACA阳性表达(HR=2.951,95%CI:1.701~5.118)是NSCLC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论THRSP、ACACA在NSCLC组织中均呈高表达,且与临床病理特征及预后有关,有望作为NSCLC预后评估的生物学标志物。

血小板计数在肺部感染所致ALI/ARDS中的变化及与炎性因子、氧化应激等指标的相关性分析

目的:探讨肺部感染所致急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung iniury,ALI)/(acute respiratory distress svndrome,ARDS)患者炎性因子、氧化应激指标水平,并分析其相关性。方法:选取2020年1月至2022年4月本院收治的116例肺部感染患者为研究对象,依据其是否合并ALI/ARDS分为对照组即单纯肺部感染52例、研究组即合并ALI/ARDS 64例。入组时采用ELISA法检测炎性因子水平。采用试剂盒检测氧化应激指标水平。分析炎性因子、氧化应激及肺部感染评分、急性生理与慢性健康状况Ⅱ、Murray肺损伤评分相关性。分析炎性因子、氧化应激指标对肺部感染所致ALI/ARDS的诊断价值。结果:与对照组比较,研究组血小板计数(Platelet count,PLT)降低,超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-px)水平降低,白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-18(Interleukin-8,IL-18)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、过氧化脂质(Lipid peroxide,LPO)水平升高(P<0.05);PLT与IL-18、LPO及CPIS、APACHEⅡ、Murray评分呈负相关(P<0.05),而与SOD呈正相关(P<0.05);联合诊断肺部感染所致ALI/ARDS的AUC大于单项诊断(P<0.05)。结论:肺部感染所致ALI/ARDS患者中PLT降低,且与IL-18、LPO、SOD密切相关,联合检测PLT、IL-18、LPO、SOD对肺部感染所致ALI/ARDS具有一定诊断价值。

铁死亡相关基因TFRC在胃癌组织中的表达及其与化疗药物敏感性的关系

目的:探讨转铁蛋白受体(TFRC)在胃癌组织中的表达及其与化疗药物敏感性的关系。方法:选取2018年4月至2020年4月医院胃肠外科收治接受胃癌切除术治疗的胃癌患者112例,并收集手术切除的新鲜胃癌组织及距肿瘤边缘>5 cm的癌旁组织。制备组织石蜡切片,分别采用免疫组织化学SP染色和原位杂交染色检测组织中TFRC蛋白及mRNA表达。制备胃癌组织单细胞悬液,采用MTT比色法分析TFRC表达与化疗药物敏感性的关系。术后随访3年,绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析TFRC表达与胃癌患者预后的关系。结果:胃癌组织中TFRC蛋白阳性表达率为67.86%,高于癌旁组织中的21.43%,差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中TFRC mRNA阳性表达率为60.71%,高于癌旁组织中的15.18%,差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中TFRC蛋白与mRNA表达呈显著正相关(P<0.05)。肿瘤最大直径≥5 cm、临床分期Ⅲ-Ⅳ期、低分化、浸润深度T_(3)+T_(4)期、有淋巴结转移的胃癌患者TFRC蛋白和mRNA阳性表达率更高,差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中TFRC蛋白和mRNA阴性表达患者顺铂(DDP)、环磷酰胺(CTX)、氟尿嘧啶(5-FU)、氨甲蝶呤(MTX)敏感性高于阳性表达者,差异具有统计学意义(P<0.05)。化疗敏感组患者胃癌组织中TFRC蛋白和mRNA阳性率低于化疗耐药组,差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中TFRC表达是胃癌患者化疗敏感性的独立危险因素(P<0.05)。胃癌组织中TFRC蛋白和mRNA阳性表达的患者无病生存期(DFS)率及总生存期(OS)率均低于阴性表达者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:TFRC在胃癌组织中呈阳性表达,可能参与胃癌发生及发展,并与患者预后密切相关,且TFRC细胞表达增高时,对化疗药物敏感性亦增加,可作为胃癌术后辅助化疗效果的预测指标,为治疗提供参考。

C/EBPβ蛋白影响维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织细胞增殖的研究

为了探讨C/EBPβ蛋白影响维吾尔族妇女子宫颈组织细胞增殖的作用。采用免疫组织化学方法对100例新疆维吾尔族妇女子宫颈组织标本石蜡切片检测C/EBPβ和Ki-67的表达情况,并对其表达及意义进行分析。结果发现C/EBPβ蛋白在子宫颈鳞癌组织中低表达,在慢性子宫颈炎组织中高表达;Ki-67蛋白在子宫颈鳞癌组织中高表达,在慢性子宫颈炎组织中低表达。C/EBPβ蛋白质与Ki-67蛋白质的表达呈现负相关性。由此可知,C/EBPβ蛋白可以抑制子宫颈鳞癌组织细胞的增殖。

小学语文高效阅读教学方法初探

小学语文阅读教学是整个小学语文教学的基础,在进行阅读教学的过程中我们要注重使用更加行之有效的方法,使语文课堂鲜活起来,使学生能够通过学习获得更多的知识,增添对语文学习的兴趣。

液基细胞学制片联合传统涂片在超声引导下细针穿刺诊断甲状腺结节良恶性中的效能分析

目的:探讨液基细胞学制片联合传统涂片在超声引导下细针穿刺(US-FNA)诊断甲状腺结节良恶性中的应用价值。方法:回顾性分析2019年5月至2021年2月该院收治的142例甲状腺结节患者的临床资料。所有患者均行US-FNA取样,并进行传统涂片、液基细胞学制片,以术后病理诊断结果为“金标准”,比较传统涂片、液基细胞学制片及联合检测对甲状腺结节性质的诊断效能,并比较涂片质量。结果:术后病理结果显示,142例患者中良性结节97例(68.31%),恶性结节45例(31.69%);联合检测诊断甲状腺结节性质的灵敏度、准确度分别为95.56%、97.18%,均高于传统涂片、液基细胞学制片,且漏诊率(4.44%)低于传统涂片、液基细胞学制片,差异有统计学意义(P<0.05);联合检测诊断甲状腺结节性质的特异度、误诊率与传统涂片、液基细胞学制片比较,差异均无统计学意义(P>0.05);液基细胞学制片在背景、细胞数量、细胞核结构、血液成分、胶质含量、细胞层次和排列方面的质量均高于传统涂片。结论:液基细胞学制片联合传统涂片在US-FNA诊断甲状腺结节良恶性中的价值较高,且液基细胞学制片质量较高,对协助早期临床诊断、指导治疗方案具有重要意义。

C/EBPβ在氧化低密度脂蛋白诱导的白介素1β成熟过程中的作用

目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的小鼠巨噬细胞白介素1β(IL-1β)成熟过程中的作用。方法分别用0、25、50、100μg/ml ox-LDL对小鼠巨噬细胞株RAW264.7处理12、24、48h,以不同时间点的0μg/ml ox-LDL为对照组,筛选出50μg/ml ox-LDL处理24h进行后续实验。定量PCR观察C/EBPβ基因表达变化,Western blotting检测C/EBPβ、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase-1)、IL-1β前体及成熟体表达的变化。采用小干扰RNA敲减C/EBPβ及caspase-1,采用ELISA法检测IL-1β分泌的变化,Western blottin检测相关蛋白表达的变化。结果 Ox-LDL呈时间剂量依赖性增加C/EBPβ的表达。其中50μg/ml ox-LDL处理24h后,C/EBPβ蛋白表达开始明显上调,平均上调幅度为57%(P<0.01)。同时ox-LDL可明显增加caspase-1、IL-1β前体、IL-1β成熟体的表达(P<0.05)。敲减C/EBPβ能抑制ox-LDL诱导的caspase-1、IL-1β前体、IL-1β成熟体的表达及IL-1β的分泌,平均抑制幅度分别为34%、36%、54%及53%(P<0.05);而敲减caspase-1仅可抑制IL-1β成熟体的表达及IL-1β的分泌(P<0.05)。结论C/EBPβ是ox-LDL诱导巨噬细胞产生IL-1β的关键性蛋白,并通过调控caspase-1促进IL-1β前体成熟。

NSCLC患者病灶及癌旁组织中Gli-1、FOXC2表达水平与病理学参数的关联性

目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者病灶及癌旁组织胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1(Gli-1)、叉头框蛋白C2(FOXC2)表达水平与病理学参数的关联性。方法:选取2019-03~2020-03郑州大学附属郑州中心医院NSCLC患者116例,均检测NSCLC及癌旁组织中Gli-1、FOXC2表达情况并统计相关病理学参数。比较病灶组织、癌旁组织中Gli-1、FOXC2表达水平,并对比不同病理学参数病灶组织中Gli-1、FOXC2的阳性表达率,分析病灶组织中Gli-1、FOXC2表达与相关病理学参数相关性。结果:病灶组织FOXC2表达阳性率71.55%、Gli-1表达阳性率90.52%高于癌旁组织17.24%、12.93%(P<0.05);病灶组织中Gli-1、FOXC2表达与性别、年龄、组织学类型无关,FOXC2表达与分化程度无关(P>0.05);临床分期Ⅱ~Ⅲ期、有淋巴结转移患者病灶组织中Gli-1、FOXC2阳性表达率较高,且中低分化程度Gli-1阳性表达率较高(P<0.05);经Spearman相关性分析,Gli-1表达与分化程度呈负相关,Gli-1、FOXC2表达与临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)结论:NSCLC患者病灶组织中Gli-1、FOXC2表达水平明显上调,且与淋巴结转移、临床分期等病理学参数具有关联性,有助于病情判断及预后评估。

C/EBP_α基因对维吾尔族宫颈鳞癌组织细胞增殖的影响

目的探讨CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)在宫颈癌组织中的表达水平及其对子宫颈鳞癌组织细胞增殖的影响。方法 7例宫颈鳞癌患者的新鲜标本(宫颈鳞癌1组)与5例正常妇女的新鲜标本(对照组),采用RT-PCR检测C/EBPαmRNA与Ki-67mRNA表达情况;35例宫颈鳞癌患者的石蜡标本(宫颈鳞癌2组)与35例慢性宫颈炎患者石蜡标本(宫颈炎组),采用免疫组织化学方法检测C/EBPα与Ki-67蛋白表达情况。结果对照组C/EBPαmRNA表达水平高于宫颈鳞癌1组;Ki-67mRNA低于宫颈鳞癌1组;宫颈炎组C/EBPα蛋白表达水平高于宫颈鳞癌2组(P<0.01),Ki-67蛋白表达水平低于宫颈鳞癌2组(P<0.05);宫颈鳞癌2组C/EBPα蛋白与Ki-67蛋白表达呈负相关(r=-0.259,P<0.05)。结论宫颈鳞癌组织中C/EBPα基因mRNA和蛋白表达均降低;C/EBPα基因对子宫颈鳞癌组织细胞的增殖起抑制作用。

过表达血小板衍生生长因子受体β的小鼠内皮祖细胞有助于损伤后血管的再内皮化

目的 观察高表达血小板衍生生长因子受体β（PDGFR-β）的内皮祖细胞（EPC）修复损伤血管的功能.方法 采用密度梯度离心法获取小鼠脾脏单个核细胞,使用含血管内皮细胞的专用培养基诱导脾源性EPC,使用基因转染的方法获取高表达PDGFR-β的EPC,并将其回输至脾切除后的颈动脉损伤模型中,以伊文思蓝染色评估血管再内皮化程度.结果 荧光双染鉴定显示培养的EPC阳性率在90％以上,荧光显微镜观察表明质粒转染效率为50％～ 60％,转染后EPC高表达PDGFR-β,伊文思蓝染色结果显示EPC尾静脉移植,有助于损伤后血管的再内皮化,PDGFR-β过表达EPC移植效果优于单纯EPC移植（P＜0.01）.结论 体外培养脾源性EPC切实可行,使用基因转染的方法可以有效上调PDGFR-β表达,而过表达PDGFR-β的EPC显著促进小鼠颈动脉损伤早期血管再内皮化.

新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织C/EBPβ基因单核苷酸多态性分析

目的:探讨新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织C/EBPβ基因启动子500 bp和外显子区序列的单核苷酸多态性位点。方法:C/EBPβ基因启动子500 bp和外显子区域设计6对引物,使用聚合酶链反应结合DNA测序方法分析15例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织和2例子宫颈正常组织C/EBPβ基因序列。结果:C/EBPβ基因上检测出6个已知SNP位点和3个新发现的或低频的多态性位点,有1例标本检测发现在2091-2092处插入GGCGGCAGC 9个碱基,而在维吾尔族正常子宫颈组织未发现新多态性位点。结论:C/EBPβ基因上新的多态性位点可能与维吾尔族子宫颈鳞癌发生相关。

维吾尔族妇女子宫颈鳞癌FHIT基因启动子甲基化检测

目的:分析FHIT基因启动子区甲基化与维吾尔族妇女子宫颈鳞癌发病之间的相关性。方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)对45例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织及34例正常维吾尔族妇女子宫颈组织进行甲基化检测。结果:34例正常子宫颈组织有2例甲基化,甲基化率为5.88%;45例子宫颈鳞癌组织中共有15例发生FHIT基因启动子区甲基化,甲基化率为33.33%。结论:FHIT基因启动子区甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌发病具有相关性。

维吾尔族妇女子宫颈癌CCNA1基因甲基化检测

目的:探讨CCNA1基因启动子区域甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌的相关性。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法,对40例子宫颈癌患者手术切除肿瘤组织及其40例正常子宫颈组织CCNA1基因启动子区域甲基化进行检测。结果:CCNA1基因在40例子宫颈癌中甲基化率为87.5%,正常子宫颈组织中甲基化率为2.5%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CCNA1基因启动子甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌发生相关。

C/EBPα基因对子宫颈癌HeLa细胞增殖和迁移能力的作用分析

目的:探索CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)基因对HeLa细胞增殖和定向迁移的影响。方法:用MTT方法检测C/EBPα基因重组质粒转染组、空质粒转染组和未转染组对HeLa细胞增殖的影响。用Transwell侵袭转移模型评价He-La细胞的迁移情况。其中,不同上室中分别加入C/EBPα基因重组质粒转染组、空质粒转染组和未转染组的HeLa细胞,下室中加入含20%FBS的培养基。结果:C/EBPα基因重组质粒转染组、转染空质粒组和未转染HeLa细胞组的吸光度值分别为0.21±0.01、0.24±0.01和0.24±0.02,重组质粒转染组与空质粒转染组和未转染HeLa细胞组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验发现重组质粒转染组与空质粒转染组和未转染HeLa细胞组相比,细胞迁移能力减弱,细胞穿膜数分别为12.0±2.2、39.0±3.2和39.6±2.6,重组质粒转染组与空质粒转染组和未转染HeLa细胞组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:C/EBPα基因能抑制子宫颈癌HeLa细胞的增殖和迁移能力。