川楝素通过下调c-kit表达抑制GIST-T1细胞增殖并促进其凋亡

目的研究川楝素(toosendanin,TSN)对胃肠间质瘤细胞增殖及凋亡的影响,并对其相关机制进行初步探索。方法不同浓度TSN体外干预GIST-T1细胞,采用CCK-8检测TSN对GIST-T1细胞增殖的影响;根据结果进一步选择实验浓度,分为0、15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L伊马替尼(imatinib,IM)作为阳性对照;流式细胞仪及Hoechst 33342/PI荧光双染检测细胞凋亡及细胞周期;qRT-PCR及Western blot检测c-KIT/PI3K/AKT/mTOR mRNA及相关蛋白表达。结果 TSN可抑制GIST-T1细胞增殖(P<0.01),其48 h IC_(50)为18.75 nmol/L,72 h IC_(50)为17.93 nmol/L。与对照组相比,15、30 nmol/L TSN组,50 nmol/L IM均可引起不同程度细胞凋亡(P<0.01),但各药物组间凋亡率差异无统计学意义。30 nmol/L TSN可使细胞周期发生S期阻滞(P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示:15 nmol/L TSN即可下调GIST-T1细胞c-KIT、PI3K、AKT、mTOR mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果也证实:15 nmol/L TSN同样抑制了c-KIT、PI3K、AKT、mTOR及其磷酸化蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 TSN通过下调c-KIT表达,抑制GIST-T1细胞增殖并促进凋亡,可能是通过PI3K/AKT/mTOR通路发挥作用。

肛周软纤维瘤1例报告并文献复习

软纤维瘤,也称皮赘、软瘊、软垂疣、纤维脂肪瘤等,是常见的结缔组织良性肿瘤。常见于中老年人和肥胖者,尤以更年期的女性多发[1]。软纤维瘤好发于面颈部、胸背部、腋窝、腹股沟、女性外阴等部位。发生于肛周的软纤维瘤极为罕见,现对我科诊治的一例肛周软纤维瘤进行报道。

纳米炭吸附碘克沙醇术前、术中双重示踪直肠癌侧方淋巴结的实验研究

目的:初步探讨碘克沙醇-纳米炭混悬液通过术前CT淋巴造影(CT lymphography,CT-LG)联合术中染色法双重示踪淋巴结的可行性及诊断价值。方法:采用人结直肠癌细胞悬液注射于裸鼠直肠黏膜下建立直肠癌原位移植淋巴转移模型。将30只模型鼠随机分为2组,碘克沙醇组9只,双重示踪组21只。碘克沙醇组在直肠黏膜下注射碘克沙醇溶液,双重示踪组则注射碘克沙醇-纳米炭混悬液,分别进行间质淋巴造影,然后进行组织学检查。结果:碘克沙醇组在5 min、30 min观察到强化淋巴结。双重示踪组在2 h、3 h、5 h观察到强化淋巴结,3 h可获得最佳造影效果。间接CT-LG检测到41枚强化淋巴结,其中碘克沙醇组18枚,双重示踪组23枚,与淋巴结活检的位置一致。用密度不均匀、形态不规则、有充盈缺损作为淋巴结转移诊断标准时,2组肠系膜根部淋巴结(caudal mesenteric lymph node,CLN)转移的灵敏度和阳性预测值均为100%;双重示踪组和碘克沙醇组淋巴结转移的敏感性为78.6%vs. 81.8%,特异性为77.8%vs. 85.7%,准确性为78.3%vs. 83.3%。结论:碘克沙醇-纳米炭混悬液间接CT-LG既可用于术前定位淋巴结和评估转移情况,又可黑染淋巴结协助术中活检或清扫淋巴结。

电离辐射对胃肠道间质瘤细胞增殖以及Ano1蛋白表达的影响

目的探究电离辐射后胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromaltumor,GIST)细胞增殖活性和凋亡以及电离辐射后GIST中Ano1分子的mRNA和蛋白表达。方法实验细胞为人胃肠道间质瘤细胞株(GIST-T1),实验分组为未照射组、2 Gy照射组、5 Gy照射组、7 Gy照射组,观察时间点分别为照射后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d。通过CCK8法和流式细胞仪检测电离辐射后GIST细胞增殖活性和凋亡,以RT-PCR和Western Blot方法检测电离辐射后GIST中Ano1分子的mRNA和蛋白表达。结果GIST细胞在接受不同剂量的电离辐射急性照射后,生长受到抑制,且有凋亡表现,Ano1蛋白的表达出现了先下降、后回升的变化。随着照射剂量增加,Ano1表达下降的程度越大、到达谷值时间越短,且Ano1的表达恢复速度越慢。结论GIST细胞增殖活性的抑制程度和细胞凋亡率与照射剂量和照射后时间呈依赖关系,Ano1蛋白的表达出现了先下降、后回升的变化。提示Ano1可能是GIST的放疗靶点。

101例胃肠道间质瘤术前外周血NLR、PLR和SII与其临床病理特征及预后的相关性研究

目的探究胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)患者术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophils to lymphocytes ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet to lymphocyte ratio,PLR)和系统免疫炎症指数(systemic immune inflammation index,SII)与其临床病理特征及预后的相关性。方法回顾性收集中国人民解放军西部战区总医院2014年12月至2018年12月期间经手术治疗的101例GIST患者的临床病理资料及血常规结果,计算NLR、PLR和SII,并通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线计算NLR、PLR和SII最佳截断值。采用卡方检验或t检验分析NLR、PLR和SII与GIST临床病理特征之间的关系。应用Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验进行单因素分析,明确GIST患者无复发生存时间(recurrence-free survival,RFS)的影响因素。应用Cox回归模型进行多因素分析,以明确GIST患者RFS的独立影响因素。结果GIST患者术前的NLR、PLR和SII与肿瘤部位、肿瘤直径及NIH危险程度分级具有相关性(P<0.05),但与肿瘤细胞的核分裂象无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验单因素分析结果表明:NLR、PLR、SII、手术方式、肿瘤部位、肿瘤直径、肿瘤细胞核分裂象和NIH危险程度分级是GIST患者RFS的影响因素。Cox回归多因素分析结果表明:术后是否接受规律的伊马替尼辅助治疗(HR=32.876,P<0.001)、NIH危险程度分级(HR=129.182,P<0.001)和PLR(HR=5.719,P=0.028)是GIST患者RFS的独立影响因素。结论GIST患者术前的NLR、PLR和SII与GIST患者的肿瘤部位、肿瘤直径和NIH危险程度分级相关,是患者术后RFS的影响因素。PLR是GIST患者RFS的独立影响因素。

3孔法与5孔法腹腔镜辅助中高位直肠癌根治术的近期疗效比较

目的比较3孔法和5孔法腹腔镜手术在中高位直肠癌中的近期疗效。方法回顾性分析2018年1月至2018年12月期间于中国人民解放军西部战区总医院全军普外中心胃肠病区行手术治疗的67例直肠癌患者的临床资料,按照手术方式分为3孔组(33例)和5孔组(34例)。对比分析2组患者的手术、病理、术后近期相关指标以及随访情况。结果3孔组的手术切口总长度和术后第3天视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)疼痛评分均优于5孔组(P<0.05)。2组的环周切缘均为阴性,且2组的手术时间、术中出血量、手术中转率、住院费用、肿瘤远切缘距离、淋巴结阳性数量、淋巴结清扫数量、术后通气时间、下床活动时间、尿管拔除时间、引流管拔除时间、进食时间、术后住院时间及术后并发症发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。3孔组获访30例,随访时间12~24个月,中位时间为19个月;5孔组获访29例,随访时间12~24个月,中位时间为19.5个月。2组患者的肠梗阻发生率、局部复发率、远处转移率和死亡率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与常规5孔法腹腔镜手术相比,3孔法腹腔镜手术能够缩短切口总长度,减少手术创伤,安全有效。

可视化人结直肠癌细胞裸鼠直肠原位移植淋巴转移模型的建立

目的建立可以动态观察直肠癌生长及淋巴转移的原位移植模型,初步探讨活体成像系统观察直肠癌生长和转移的可行性。方法采用裸鼠直肠黏膜下注射红色荧光蛋白标记的人结直肠腺癌细胞HCT 116建立原位移植模型,借助活体成像系统在不同时间点采集荧光信号图像,实时观察癌细胞在裸鼠直肠的生长和转移情况,应用病理学方法对原位移植淋巴转移模型进行验证。结果50只可视化裸鼠直肠原位移植淋巴结转移均成功构建。在原位移植后2~7周,所有裸鼠在活体成像系统中观察到了肿瘤荧光蛋白表达。原位移植后随着时间的延长,移植瘤体积的增大,积分光密度值逐渐增大。裸鼠直肠系膜根部淋巴结转移、主动脉旁淋巴结转移、肝转移和肺转移成时间依赖性增长。组织学检查与依靠淋巴结表达荧光蛋白来判断转移情况的结果一致。结论可视化裸鼠直肠原位移植及淋巴转移模型技术可靠可行。活体成像系统对可视化裸鼠直肠原位移植瘤生长进行实时、无创及动态观测和淋巴转移的观察简便有效。