腹腔镜二氧化碳气腹对老年人重要器官的影响

进入老年期后，人的生理结构、组织及器官都会随年龄的增长而出现相应的功能性下降。大部分老年患者合并多种内科疾病，这是造成术中麻醉高风险及术后并发症多发的原因。近年来，随着腹腔镜手术的广泛发展，操作技术日益娴熟及腹腔镜器械的改良和创新，愈来愈适应老年患者，有研究表明对伴有心肺疾患、轻度心功能异常的老年人，只要术前做好充分准备，建立有创监测，同样可耐受腹腔镜胆囊切除术，但二氧化碳（CO2）气腹对老年器官造成一定影响。

经尿道前列腺切除术后并发导尿管相关膀胱刺激征的风险预测列线图模型构建研究

目的探讨经尿道前列腺切除术(TURP)后并发导尿管相关膀胱刺激征(CRBD)的危险因素,并构建风险预测列线图模型。方法回顾性分析2020年1月至2022年2月海南省人民医院收治的246例行TURP治疗的患者的临床资料。根据术后是否并发CRBD将其分为并发组(n=148)和未并发组(n=98)。分析TURP后并发CRBD的影响因素,并建立风险预测列线图模型。结果TURP后并发CRBD的影响因素包括年龄>65岁、麻醉后留置导尿管、药物催醒、术后尿路感染、使用氯胺酮/艾司氯胺酮类药物、使用抗胆碱能药物(P<0.05);基于上述影响因素构建列线图模型,根据列线图低、中、高风险临界值分为TURP后并发CRBD低、中、高风险(<79.63分、79.63~160.23分、>160.23分);受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,列线图预测TURP后并发CRBD的曲线下面积(AUC)为0.810(95%CI:0.756~0.857);采用Bootstrap自抽样法内部验证的一致性指数为0.798,该列线图模型区分度良好;校准曲线与标准曲线贴合较好。结论年龄>65岁、麻醉后留置导尿管、药物催醒、术后尿路感染、使用氯胺酮/艾司氯胺酮类药物、使用抗胆碱能药物均是TURP后并发CRBD的影响因素,据此构建的风险列线图模型具有良好的准确度、区分度和预测效果。

右美托咪定通过p38通路改善发育期大鼠七氟醚麻醉后认知功能障碍

目的:探讨右美托咪定通过p38通路改善发育期大鼠七氟醚麻醉后认知功能障碍。方法:将90只发育期大鼠根据随机数字法分为对照组(C组)、七氟醚组(S组)、七氟醚+右美托咪定组(S+D组),每组30只。缺口末端标记法(TUNEL)染色测定大鼠海马CA1区凋亡细胞数,免疫荧光染色测定大鼠海马CA1区Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及相关的蛋白(Bax)表达,免疫组化染色测定大鼠海马CA1区p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达,采用Western blot测定海马CA1区p38MAPK、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白水平,Morris水迷宫实验测定认知功能。结果:与C组比较,S组和S+D组大鼠海马CA1区凋亡细胞数升高(P<0.05),海马Caspase-3、Bax阳性细胞数和荧光强度升高(P<0.05),Bcl-2阳性细胞数和荧光强度降低(P<0.05),海马CA1区p38MAPK免疫组化IHS评分升高(P<0.05),海马CA1区p-p38MAPK蛋白水平升高(P<0.05),逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越原平台次数减少(P<0.05);与S组比较,S+D组大鼠海马CA1区凋亡细胞数降低(P<0.05),海马CA1区Caspase-3、Bax阳性细胞数和荧光强度降低(P<0.05),Bcl-2阳性细胞数和荧光强度升高(P<0.05),海马CA1区p38MAPK免疫组化IHS评分降低(P<0.05),海马CA1区p-p38MAPK蛋白水平降低(P<0.05),逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越原平台次数增加(P<0.05)。结论:右美托咪定可能通过抑制p38通路抑制细胞凋亡改善发育期大鼠七氟醚麻醉后认知功能障碍。

七氟烷对大鼠脊髓缺血再灌注损伤及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探究七氟烷(sevoflurane,SEVO)在大鼠脊髓缺血再灌注(spinal cord ischemia-reperfusion,SCIR)中的作用及对其对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:实验大鼠分为SCIR组、SEVO组、SEVO+XAV939(XAV;β-catenin抑制剂)组和假手术组,每组10只。HE、Nissl和TUNEL染色观察脊髓组织损伤;免疫组化和免疫荧光法观察脊髓轴突再生情况;Western blot检测β-catenin、生长相关蛋白43(growth associated protein 43,GAP43)、神经丝H(neurofilament-H,NF-H)、微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)、硫酸软骨素蛋白聚糖NG2(chondroitin sulfate proteoglycan NG2,NG2)及髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)水平。结果:SCIR组脊髓组织有空洞,可见肿胀或核固缩的坏死或凋亡细胞,尼氏小体较少,SEVO可减轻上述损伤。SCIR组GAP43和NG2蛋白水平显著高于假手术组(P<0.01),吸入SEVO则进一步增加GAP43和NG2蛋白水平。SCIR组BBB评分,NF-H+、MBP+、β-catenin+GAP43+和β-catenin+MBP+细胞数量,NF-H、MAP2、MBP蛋白水平和胞质、核及总蛋白中β-catenin水平、核/胞质β-catenin比例显著低于假手术组(P<0.05);吸入SEVO后上述指标均被逆转,但XAV则可明显减弱SEVO的上述作用。结论:SEVO可促进轴突和髓鞘再生,减轻SCIR大鼠神经损伤,其机制可能与激活Wnt/β-catenin通路有关。

瑞马唑仑联合舒芬太尼对行胸腔镜手术患者炎症因子及疼痛介质和应激反应指标水平的影响

目的探讨瑞马唑仑联合舒芬太尼对行胸腔镜手术(VATS)患者炎症因子、疼痛介质和应激反应指标水平的影响。方法选取2019年5月至2020年10月于海南省人民医院择期行VATS的患者102例,按照抽签法分为对照组和观察组,各51例。对照组予舒芬太尼麻醉,观察组在对照组基础上联合甲苯磺酸瑞马唑仑麻醉。比较2组患者手术前后炎症因子、疼痛介质、应激反应指标水平,以及术后疼痛视觉模拟量表评分、Ramsay镇静评分、不良反应发生情况。结果术后2、12、24 h,2组血清白细胞介素10(IL⁃10)、IL⁃6、肿瘤坏死因子α(TNF⁃α)水平均高于术前,且观察组术后各时点IL⁃10水平均高于对照组[(10.6±2.2)ng/L比(7.5±1.7)ng/L、(16.2±2.4)ng/L比(9.2±1.8)ng/L、(17.2±2.2)ng/L比(10.6±2.1)ng/L],IL⁃6、TNF⁃α水平均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);术后各时点2组血清前列腺素E2、IL⁃17水平均高于术前,高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平均低于术前,且观察组各时点前列腺素E2、HMGB1、IL⁃17水平均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);术后各时点2组血浆肾上腺素、去甲肾上腺素、皮质醇、空腹血糖水平均高于术前,且术后各时点观察组均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后2、12 h,观察组VAS评分低于对照组,Ramsay镇静评分均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论行VATS患者使用瑞马唑仑联合舒芬太尼麻醉可抑制炎症因子及疼痛介质水平,减轻应激反应,且具有一定的安全性。

右美托咪定通过α2肾上腺能受体对LPS诱导的KCs炎性反应及HO-1表达的影响

目的:研究右美托咪定(Dex)通过α2肾上腺能受体对脂多糖(LPS)诱导的库普弗细胞(KCs)炎性反应及血红素氧合酶(HO-1)表达的影响。方法:将来源于SD小鼠的KCs细胞接种在30孔板上,采用随机数表法将其分为空白组、对照组、Dex-L组、Dex-M组和Dex-H组,空白组加入细胞培养液培养24h,对照组加入μg/ml的LPS培养24h,Dex-L组、Dex-M组和Dex-H组与对照组进行同样处理后,再分别加入浓度为5 ng/ml、10ng/ml及20ng/ml的右美托咪定培养1h。每组设置6个孔,在孵育6h和12h时收集细胞上清液,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定每组细胞的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及晚期炎症介质高迁移率族蛋白(HMGB-1)的浓度水平,采用Western blot法测量每组细胞的HO-1蛋白表达水平。培育24h时采用细胞计数试剂(CCK-8)法计算每组细胞的存活率。结果:培养6h和121h时,Dex-L组、Dex-M组和Dex-H组的TNF-α、IL-6及HMGB-1浓度比空白组明显升高,差异有统计学意义(t_(Dex-L组)=3.891,t=3.179,t=3.588;t_(Dex-M组)=3.663,t=3.765,t=3.501;t_(Dex-H组)-4.134,t=4.333,t=4.285;P<0.05);3组与对照组比较3种炎性因子明显降低(t_(Dex-L组)=3.451,t=3.682,t=3.509;t_(Dex-)M组=3.919,t=3.383,t=3.286;t_(Dex-H组)=4.455,t=4.136,t=4.481,P<0.05);细胞培养6h_后3组炎性因子TNF-α、IL-6和HMGB-1浓度水平与对照组比较,差异有统计学意义(F=6.346,F=12.973,F=8.325,P<0.05)。3组细胞培养6h和12h时HO-1水平比较,差异有统计学意义(F=4.827,F=6.124;P<0.05)。培养24h后,各组细胞存活率无显著性差异。结论:LPS能诱导KCs细胞释放炎性因子,而Dex可能通过调节α2肾上腺能受体上调HO-1水平抑制该过程从而发挥抗炎作用。

七氟醚减轻蛛网膜下腔出血大鼠早期脑损伤

目的 探讨七氟醚(Sev)对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠早期脑损伤(EBI)的保护机制。方法 将大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(model组)(用血管内穿刺法建立SAH模型)、Sev低(Sev-L,1.5%)、高剂量组(Sev-H,3%)、Sev+Wnt/β-catenin信号通路的特异性抑制剂DKK1(Sev 3%+DKK1 5μg/kg)组(在模型制备前30 min,侧脑室注射DKK1),每组18只。24 h后使用改良的Garcia量表对大鼠神经功能进行评分;伊文思蓝(EB)检测血脑屏障通透性,并通过SAH分级系统评估SAH的严重程度;计算脑组织含水量(BWC);TUNEL免疫荧光染色检测神经元凋亡;Western blot检测脑组织Wnt3a、GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin、ZO-1、occludin、claudin-5、MMP-9、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 与sham组相比,model组大鼠神经功能评分、脑组织Bcl-2、occludin、ZO-1、claudin-5、Wnt3a、β-catenin表达显著降低(P<0.05);SAH评分、EB渗出量、细胞凋亡率、脑组织Bax、MMP-9表达、p-GSK-3β/GSK-3β比值显著升高(P<0.05);与Model组相比,Sev-L、Sev-H组大鼠神经功能评分、脑组织Bcl-2、occludin、ZO-1、claudin-5、Wnt3a、β-catenin表达明显升高(P<0.05);SAH评分、EB渗出量、细胞凋亡率、脑组织Bax、MMP-9表达、p-GSK-3β/GSK-3β比值明显降低(P<0.05);而DKK1可明显削弱Sev对SAH后EBI的保护作用。结论 Sev可能通过激活Wnt/β-catenin通路,改善BBB,抑制神经元凋亡,减轻SAH后的EBI。

右美托咪定通过miR-760/HDGF信号通路影响胶质瘤细胞的恶性生物学行为

目的:探讨右美托咪定对胶质瘤细胞的恶性生物学行为的影响及其机制。方法:体外培养人脑胶质瘤细胞A172,用不同浓度(50、100、200、400、800 mg/L)的右美托咪定处理。采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测右美托咪定对A172细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测右美托咪定对A172细胞凋亡能力的影响;Transwell小室实验检测右美托咪定对A172细胞迁移及侵袭能力的影响。实时定量PCR(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测右美托咪定对微小RNA-760(miR-760)、肝癌衍生生长因子(HDGF)表达的影响;双荧光素酶报告实验检测miR-760过表达对野生型和突变型HDGF荧光素酶活性的影响;A172细胞中转染miR-760 mimics及miR-con,检测细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的变化。Western blot检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、细胞凋亡的标志蛋白PARP降解产物(Cleaved PARP)蛋白表达。结果:右美托咪定可明显降低胶质瘤细胞存活率(P<0.05),减少迁移细胞数与侵袭细胞数(P<0.05),抑制HDGF、MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05),而提高细胞凋亡率(P<0.05),促进miR-760、Cleaved caspase-3、Cleaved PARP的表达(P<0.05),浓度达到800 mg/L时作用明显;荧光素酶报告基因结果证实miR-760能够抑制HDGF的3′-UTR区荧光素酶活性(P<0.05);转染miR-760 mimics后,与miR-con组比较,细胞存活率明显降低(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数明显减少(P<0.05),MMP-2、MMP-9的表达水平明显降低(P<0.05),而细胞凋亡率明显升高(P<0.05),Cleaved caspase-3、Cleaved PARP的表达水平明显升高(P<0.05);干扰miR-760的表达可逆转右美托咪定对胶质瘤细胞生物学行为的影响。结论:右美托咪定通过miR-760/HDGF信号通路减弱胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡。

右美托咪定通过抑制TLR4/NF-κB信号通路促进佐剂性膝骨关节炎大鼠成纤维细胞样滑膜细胞凋亡

目的:观察右美托咪定(DEX)对佐剂性膝骨关节炎(KOA)大鼠成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)凋亡的影响,并探讨Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路在其中的作用。方法:SD大鼠右侧前、后膝关节处注射弗氏完全佐剂(FCA)建立KOA模型,建模成功大鼠随机分为模型组、DEX组和DEX+TLR4激活剂组,每组10只,另取10只大鼠设为对照组(将FCA注射液换为生理盐水)。DEX组鞘内注射100μL/kgDEX,DEX+TLR4激活剂组在DEX组基础上鞘内注射500μg/kg脂多糖(LPS),对照组和模型组相同部位注射等体积生理盐水,每天1次,连续28 d。以KOA评估值和膝关节直径评价KOA情况;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠膝关节滑膜组织形态;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记(TUNEL)染色检测膝关节滑膜组织细胞凋亡情况。各组大鼠FLS分离培养后,CCK-8法检测FLS活力;annexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测FLS凋亡情况;Westernblot法检测FLS中TLR4、NF-κB p65、caspase-3和cleavedcaspase-3蛋白水平。结果:建模后,与对照组相比,模型组、DEX组和DEX+TLR4激活剂组KOA评估值和膝关节直径显著升高(P<0.05)。给药后,模型组出现大量炎症细胞浸润现象,纤维组织和滑膜细胞增生明显,呈重度滑膜炎现象;DEX组呈轻度滑膜炎现象;DEX+TLR4激活剂组呈中度滑膜炎现象。与对照组相比,模型组KOA评估值和膝关节直径显著增大(P<0.05);与模型组相比,DEX组KOA评估值和膝关节直径显著减小(P<0.05),膝关节滑膜组织细胞凋亡指数显著升高(P<0.05);与DEX组相比,DEX+TLR4激活剂组KOA评估值和膝关节直径显著增大(P<0.05),膝关节滑膜组织细胞凋亡指数显著降低(P<0.05)。分离培养的细胞均呈纺锤形,血管细胞黏附分子1(VCAM-1)呈阳性表达,即培养细胞为FLS。与对照组相比,模型组FLS活力、FLS中TLR4蛋白水平及核内NF-κB p65蛋白水平显著升高(P<0.05),核外NF-κB p65蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,DEX组FLS活力、FLS中TLR4蛋白水平及核内NF-κB p65蛋白水平显著降低(P<0.05),FLS凋亡率、cleavedcaspase-3/caspase-3及核外NF-κB p65蛋白水平显著升高(P<0.05);与DEX组相比,DEX+TLR4激活剂组FLS活力、FLS中TLR4蛋白水平及核内NF-κB p65蛋白水平显著升高(P<0.05),凋亡率、cleavedcaspase-3/caspase-3及核外NF-κB p65蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:DEX能够抑制TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达,促进KOA大鼠FLS凋亡,实现对KOA大鼠的保护。

七氟醚复合小剂量右美托咪定麻醉对扁桃体摘除患儿术中血流动力学及术后拔管时间的影响

目的分析小儿扁桃体摘除应用七氟醚复合小剂量右美托咪定麻醉对患儿术中血流动力学及术后拔管时间的影响。方法选66例拟行扁桃体摘除术患儿,随机分组,观察组(33例)予以七氟醚复合小剂量右美托咪定麻醉,对照组(33例)予以七氟醚配伍等量生理盐水麻醉,比较两组麻醉诱导前(T0)、麻醉诱导后(T1)、手术开始后(T2)、术毕时刻(T3)心率(HR)、平均动脉压(MAP)、Ramsay镇静评分、血氧饱和度(SPO2)、拔管时间、苏醒时间、不良反应发生情况。结果 T1、T2、T3时刻观察组HR高于对照组,MAP低于对照组(P<0.05);T0、T1、T2、T3时刻对照组HR、MAP比较差异显著(P<0.05),观察组比较无显著差异(P>0.05);观察组T2、T3时刻Ramsay评分与SPO2高于对照组(P<0.05);拔管时间、苏醒时间与对照组相比无显著差异(P>0.05);观察组不良反应发生率与对照组相比无显著差异(P>0.05)。结论小儿扁桃体摘除术应用七氟醚复合小剂量右美托咪定麻醉,具有良好麻醉镇静效果,能有效稳定患儿术中血流动力学。