复方普洱茶饮料对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块的干预作用及血清TXA2/PGI2比值和DNA甲基化水平的影响

目的探讨复方普洱茶饮料对高脂喂养的Apo E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(As)斑块的干预作用及血清血栓素(TX)A2/前列环素(PG)I2比值和DNA甲基化水平的影响。方法将30只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠高脂饲料喂养6 w后随机分为模型组、立普妥(阳性对照组)和茶饮料组(n=10),给予药物干预6 w,另设正常组同品系小鼠(C57BL/6J家系)6只。检测其血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素、TXA2、PGI2、DNA甲基化转移酶(DNMT)水平和DNA甲基化水平。HE染色和VG染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块面积、斑块内细胞外脂质成分和胶原成分。结果与模型组相比,茶饮料组和立普妥组小鼠血清TC和TG水平明显降低,HDL-C水平明显升高(均P<0.01),校正后主动脉As斑块面积、斑块内细胞外脂质成分显著降低(P<0.05);小鼠血清DNA甲基化、DNMT及胰岛素水平、小鼠血清TXA2水平显著降低而血清PGI2水平显著升高(均P<0.01)。结论复方普洱茶饮料可以降低血清TXA2/PGI2比值和DNA甲基化水平,从而达到抗ApoE^(-/-)小鼠主动脉As斑块的作用。

活血解毒中药对动脉粥样硬化小鼠血清PGI2/TXA2及DNA甲基化水平的干预作用

目的探讨活血（血府逐瘀胶囊）、解毒（四季三黄胶囊）以及活血解毒中药联合应用对高脂喂养的Apo E^-/-小鼠动脉粥样硬化（AS）模型前列环素/血栓素A2（PGI2/TXA2）及DNA甲基化水平的影响。方法 50只6-8周龄Apo E^-/-小鼠予高脂喂养7周后,随机分为模型组、立普妥（阿托伐他汀钙）组、血府逐瘀胶囊组、四季三黄胶囊组与活血＋解毒组,继续灌胃和高脂喂养6周后,测其血脂、PGI2/TXA2及血清DNA甲基化和DNMTs水平。结果与模型组比较,血府逐瘀胶囊组、四季三黄胶囊组与联合应用组总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平均有不同程度的降低,AS斑块相对面积、血清DNA甲基化水平与DNMTs水平均显著降低（P〈0.01）,PGI2/TXA2比值显著升高（P〈0.01）。结论活血解毒中药复方血府逐瘀胶囊、四季三黄胶囊及其联合应用可显著改善Apo E^-/-小鼠AS模型PGI2/TXA2比值、DNA甲基化与DNMTs水平,从而可能对AS起到一定防治作用。

清血消脂方调节脂肪酸结合蛋白4和过氧化物酶增殖物激活受体表达对动脉粥样硬化小鼠的干预作用

目的:探讨清血消脂方调节脂肪酸结合蛋白4(FABP4)和过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)表达对动脉粥样硬化小鼠的干预作用。方法:选取45只ApoE-/-小鼠经高脂喂养9周后,随机分为模型组(n=15)、立普妥(阿托伐他汀钙)组(n=15)、清血消脂方组(n=15);继续高脂喂养并药物干预9周后,测其血脂及血清同型半胱氨酸水平,主动脉斑块面积与斑块中胶原纤维含量;同时,测定FABP4、PPARα与PPARγ在肝脏及主动脉中mRNA及蛋白表达水平。结果:与模型组比较,清血消脂方可显著降低血清三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与血清同型半胱氨酸(Hcy)水平,差异有统计学意义(P<0.05),且明显缩小主动脉斑块相对面积,差异有统计学意义(P<0.05)。清血消脂方显著降低主动脉中FABP4的mRNA及蛋白表达(P<0.05),并促进PPARγmRNA及蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05);同时,清血消脂方可显著降低肝脏中FABP4的蛋白表达,并促进PPARγ的蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:清血消脂方对动脉粥样硬化具有一定的防治作用,其机制可能与显著降低主动脉与肝脏中FABP4的mRNA及蛋白表达,并促进PPARγ的表达有关。

朱宗元从颈椎论治心脑血管疾病经验撷菁

介绍朱宗元教授从颈椎治疗心脑血管疾病的临床经验。认为颈椎与心脑血管关系密切,颈椎病的治疗可对心脑血管疾病起到明显的防治作用。并举验案1则。

基于代谢组学探究清血消脂方对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型的干预作用

目的采用基于氢谱的核磁共振代谢组学( 1 H-nuclear magnetic resonance, 1 H-NMR)技术,从整体代谢网络调控角度阐释化痰活血复方清血消脂方干预ApoE -/-小鼠动脉粥样硬化模型的作用机制。方法高脂饮食9周建立ApoE -/-小鼠动脉粥样硬化模型,将造模成功的小鼠随机分为3组:模型组、清血消脂方组(4.541 g/kg)、阿托伐他汀钙组(0.003 g/kg),每组15只,另取正常饮食同周龄小鼠15只作为空白对照组。于第9~18周连续给药,给药组每日2次灌胃给药,空白对照组及模型组分别给予等体积的蒸馏水。给药9周后,观察各组小鼠主动脉组织结构及病理改变;采用酶直接法微量测定血脂水平、化学发光微粒子免疫检测法测定血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)含量;采用 1 H-NMR代谢组学技术对小鼠血浆样本中的内源性物质进行了相对含量测定。结果清血消脂方对高脂饮食诱导的ApoE -/-小鼠动脉粥样硬化模型糖脂、氨基酸等代谢紊乱有明确的治疗作用,通过代谢组学及主成分分析可得出,空白对照组与模型组显著分离,清血消脂方组与阿托伐他汀组处于模型组与空白对照组之间,并且向空白对照组靠近。数据分析处理发现其改善ApoE -/-小鼠动脉粥样硬化模型的糖脂代谢紊乱以及氨基酸代谢异常与同型半胱氨酸、胆碱/磷脂酰胆碱、氧化三甲胺(trimethylamine-n-oxide,TMAO)、胆汁酸、短链脂肪酸等28个代谢物有关。结论化痰活血复方清血消脂方通过改善ApoE -/-小鼠动脉粥样硬化模型体内的糖脂代谢、TMAO、同型半胱氨酸及胆碱/磷脂酰胆碱、胆汁酸、丁酸等代谢产物水平延缓动脉粥样硬化的进展。

参元丹优化方对动脉粥样硬化小鼠胰岛素抵抗及血清血栓素A2/前列环素比值和DNA甲基化水平的影响

目的观察参元丹优化方对高脂喂养Apo E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)胰岛素抵抗及血清血栓素A2(TXA2)/前列环素(PGI2)比值和DNA甲基化(5-m C)水平的影响,探讨其相关作用机制。方法 40只8周龄雄性Apo E-/-小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、立普妥组、参元丹原方组和参元丹优化方组,各给药组给予相应药物干预6周。检测小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素、TXA2、PGI2、DNA甲基化转移酶(DNMT1)和5-m C水平。HE染色,图像分析测量小鼠主动脉AS斑块面积。结果与模型组比较,参元丹原方组和参元丹优化方组小鼠血清TC和TG水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P<0.01),AS指数明显降低,校正后主动脉AS斑块面积显著降低(P<0.05),参元丹优化方组小鼠血清5-m C、DNMT1、胰岛素水平及TXA2/PGI2比值显著降低(P<0.05),参元丹优化方组优于参元丹原方组(P<0.01)。结论参元丹优化方降低血清胰岛素、5-m C水平和TXA2/PGI2比值均优于原方,改善血脂和AS效果与原方相当。

当归芍药散对动脉粥样硬化小鼠的干预作用及DNA甲基转移酶1和PPAR-γ表达的影响

目的研究当归芍药散对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠主动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)斑块的干预作用及DNA甲基转移酶1(DNMT1)和PPAR-γ表达的影响。方法将30只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠西方类型膳食喂养9周,随机分为模型组、立普妥组(阳性对照组)和当归芍药散组(n=10),药物干预9周后,检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、血清DNA甲基化水平及DNMTs水平。行苏木素-伊红染色(hematoxylin and eosin staining,HE),采用IPP图像分析软件测量小鼠主动脉As斑块面积。免疫组化法检测各组小鼠主动脉As斑块内DNA甲基化转移酶1(DNMT1)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的表达。结果与模型组相比,当归芍药散组和立普妥组小鼠血清TC、TG水平明显降低(P<0.05),当归芍药散组小鼠血清HDL-C水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,当归芍药散组小鼠主动脉As斑块面积显著降低(P<0.01),当归芍药散组小鼠主动脉斑块内DNMT1表达显著降低(P<0.05),PPARγ表达显著升高(P<0.05)。结论当归芍药散可改善As小鼠的血脂水平,减少As斑块面积,具有明确的抗As作用,其机制可能与抑制As小鼠血清甲基化水平和DNMTs水平,促进As小鼠主动脉斑块内PPARγ表达和抑制斑块内DNMT1表达有关。

当归芍药散含药血清对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症因子及信号通路的影响

目的探讨当归芍药散含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW 264.7细胞炎症因子及炎症信号通路的影响。方法在体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞脂多糖刺激,以建立炎症细胞模型。将细胞分为正常对照组、LPS诱导组、空白血清组、LPS+空白血清组、当归芍药散含药血清组和LPS+当归芍药散含药血清组。采用CCK-8法测定细胞生长活力,流式细胞术检测细胞因子白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)水平,Western Blot检测过氧化物酶体增殖剂激活受体(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)、核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)蛋白的表达,RT-PCR法检测PPARγ、NF-κB mRNA的表达。结果(1)RAW 264.7细胞在1μg/mL的LPS和10%、20%的空白血清、10%、20%的当归芍药散含药血清干预24小时后,各组细胞之间生长活力未见明显统计学差异(P>0.05)。(2)炎症因子水平,与正常对照组相比,LPS诱导组炎症因子IL-6和MCP-1水平均明显升高(P<0.05);与LPS+空白血清组相比,LPS+当归芍药散含药血清组炎症因子IL-6和MCP-1水平明显降低(P<0.05)。(3)与正常对照组相比,LPS诱导组NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),PPARγmRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与LPS+空白血清组相比,LPS+当归芍药散含药血清组NF-κB mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),PPARγmRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论当归芍药散含药血清对NF-κB、PPARγ信号通路有显著的调控作用,并可降低其下游促炎因子IL-6、MCP-1的分泌水平,对代谢性炎症有明确的治疗作用,减缓了动脉粥样硬化的病理进程。

心衰合剂对慢性心力衰竭患者认知功能及焦虑抑郁状态的影响

目的 观察心衰合剂对慢性心力衰竭患者认知功能及焦虑抑郁状态的影响。方法 选择2018年12月—2021年12月北京中医医院顺义医院心血管内科住院的慢性心力衰竭患者62例,分为治疗组31例、对照组31例。对照组给予西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗基础上给予心衰合剂,疗程2个月。比较2组治疗前、治疗1个月、治疗2个月健康问卷-9项(PHQ-9)量表评分、广泛焦虑问卷-7项(GAD-7)量表评分、简易智力状态检查量表(MMSE)评分、明尼苏达心力衰竭生活质量表(MLHFQ)评分及血浆N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)。结果 治疗后,2组MMSE评分较治疗前差异无统计学意义(P>0.05),但治疗2个月后治疗组MMSE评分高于对照组(P<0.05);治疗1个月后,治疗组GAD-7评分较治疗前明显改善(P<0.05),治疗2个月后,治疗组PHQ-9评分、GAD-7评分较治疗前明显改善(P<0.05);治疗1、2个月,2组患者MLHFQ评分、NT-proBNP均较治疗前明显改善(P<0.05)。结论 心衰合剂可有效改善气虚血瘀、阳虚水泛证慢性心力衰竭患者的焦虑抑郁状态,且有改善其认知功能的趋势。

共识法在中医临床实践指南制定中的应用

目的评价近5年内制定的中医临床实践指南中共识法的应用情况,为今后指南的制定提供参考。方法检索2010至2014年收录于中国知网、万方数据库、维普数据库的中医临床实践指南,对指南基本特征、共识法类型、专家信息、论证轮次等进行分析。结果纳入的125个中医指南里46个未描述指南制定的方法,其他79个指南采用共识会议法,其中41个同时采用德尔菲法,11个采用投票法形成最终共识意见。共识会议法的专家数量为9-128个,中位数为39个,平均论证（1.6±0.9）轮次,德尔菲法的专家数量中位数为40个,平均论证（2.8±0.4）轮次。纳入指南中有9个专家小组由多学科人员组成。结论目前在中医临床指南制定的过程中共识法的应用仍欠规范与充分。今后中医指南在制定时应采用共识会议法等正式共识法,同时指南制定应重视多学科成员参与。

动脉粥样硬化脂代谢紊乱与DNA甲基化的关系

心血管疾病是导致人类死亡的主要原因之一,动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)是心血管疾病的重要病理基础,炎症反应是动脉粥样硬化的重要病理机制。脂代谢紊乱是动脉粥样硬化的独立危险因素,贯穿动脉粥样硬化的始终,并且是导致炎症反应发生的重要原因。DNA甲基化是一种不改变基因核苷酸序列而能调控基因表达的一种重要的表观遗传学方式。有研究证明,脂代谢紊乱的发生、发展与DNA甲基化存在密切关系。本文将围绕与脂代谢紊乱相关基因对动脉粥样硬化过程中脂代谢紊乱与DNA甲基化的关系做一综述。

DNA甲基化调控炎症反应干预As斑块稳定性的研究进展

动脉粥样硬化(As)斑块破裂是导致急性心脑血管事件发生的首要原因。既往对斑块破裂的基础研究多集中于细胞和分子水平,从表观遗传学角度阐述的研究较少。DNA甲基化作为表观遗传学修饰的主要方式之一,可在不改变基因核苷酸序列的情况下影响基因的表达。综合目前研究来看,炎症反应在斑块破裂过程中起关键性作用,而DNA甲基化对炎症反应又起重要的调控作用。因此,改变DNA甲基化状态来调控炎症反应干预As斑块稳定性,有望成为防治As等心脑血管疾病的有效途径之一。本文主要围绕与As炎症反应密切相关的几种炎症免疫细胞及炎症因子等方面,对近年来DNA甲基化调控炎症反应干预As斑块稳定性的研究进展作一综述。

基于生物芯片探讨高脂饮食对动脉粥样硬化小鼠基因组DNA甲基化的影响

目的:采用DNA甲基化芯片技术探讨高脂饮食对Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化模型全基因组DNA甲基化的影响。方法:30只雄性Apo E-/-小鼠随机分为正常组与高脂组,每组15只,正常组给予正常饲料喂养,高脂组给予高脂饲料喂养。16周后,测其血脂、血清同型半胱氨酸水平(Hcy)水平、血清DNA甲基化与血清DNA甲基化转移酶(DNMTs)水平;采用DNA甲基化芯片检测两组小鼠主动脉组织全基因组甲基化情况。结果:与正常组相比,高脂组小鼠血清CHOL、TG、LDL-C均显著升高,HDL-C显著下降;血清DNA甲基化水平与血清DNA甲基化转移酶(DNMTs)水平均显著升高。甲基化芯片结果显示:与正常组相比,高脂组主动脉全基因组中共有875个基因甲基化发生改变,差异具有统计学意义(P<0.05),其中高甲基化基因数目496,占总数56.69%;低甲基化基因数目379,占总数的43.31%。结论:高脂饲料可升高主动脉基因组甲基化水平,降低基因组的表达,可能是Apo E-/-小鼠容易形成动脉粥样硬化的机制之一。