一次采样测定人体咖啡因清除率

应用药动学研究显示志愿者的血浆和唾液咖啡因清除相为一级动力学；半减期分别为３６７．３和２９１．０ｍｉｎ；唾液和血浆的药动学参数有良好的相关性；含体重因素的清除率的变异系数比半减期小；用一次采样测定咖啡因清除率以８ｈ时点为宜。

模型药物作为探针检测肝P450活性及在毒理学中的应用

本文综述了近１０年来对细胞色素Ｐ４５０亚型的命名以及应用模型药物作为探针检测肝Ｐ４５０活性的理论和实践的研究进展，比较了模型药物试验的几种采样方式的特点，列举了几种常用于毒理学研究中的模型药物及其特点。

恒河猴三硝基甲苯染毒后咖啡因清除率的变化

应用恒河猴做成亚慢性三硝基甲苯染毒（ＴＮＴ）模型，在染毒前，染毒中期和试验表明咖啡因在动物体内的清除呈一级动力学，半衰期为８。８８小时，这一结果说明咖啡因符合肝脏代谢模型药物的要求。ＴＮＴ染毒后咖啡因清除率（ＣＬｃａ）下降，而同期血清甘胆醚（ＣＡ）浓度无变化。这一结果说明ＣＬＣａ可能比ＣＡ能更早地反映接触ＴＮＴ后的机体反应，染毒三个月后处死动物直接测定肝混合功能氧化酶（ＭＦＯ）活性（Ｐ４５０及氨基比林脱甲基酶），发现咖啡因清除率和ＭＦＯ有很好的相半性。由于ＭＦＯ的变化往往是ＴＮＴ接触后机体的早期的反映，因此这一结果为使用ＣＬｃａ作为ＴＮＴ接触者的早期健康监护指标展示了一定的前景。

三硝基甲苯、铅、黄磷接触者唾液咖啡因清除率的改变

分别暴露三硝基甲苯（ＴＮＴ）、铅、黄磷的工人，空腹口服１７０ｍｇ咖啡因，约８ｈ后收集唾液，用ＨＰＬＣ法测定咖啡因含量，根据药动学公式求出唾液咖啡因清除率（ＳＣＬｃａ），同时测定其它肝功能指标。结果表明，对照组（２７例）ＳＣＬｃａ为１３４．３±５９．７ｍｇ／ｍｉｎ，ＴＮＴ接触者（３７例）为６６．５±３３．８ｍｌ／ｍｉｎ，铅接触者（３４例）为６４．１±３０．３ｍｌ／ｍｉｎ，黄磷接触者（３８例）为１４９．９±６８．７ｍｌ／ｍｉｎ。ＴＮＴ和铅接触者ＳＣＬｃａ下降（Ｐ＜０．０１），说明接触者肝代谢功能下降。黄磷接触者ＳＣＬｃａ与对照组相比差别无显著性。以对照组ＳＣＬｃａ９５％可信限作正常范围，３种接触者ＳＣＬｃａ的异常检出率均比血清谷雨转氨酶（ＳＧＰＴ）和ｒ－谷氨酸转肽酶（ｒ—ＧＴ）异常检出率为高（Ｐ＜０．０１），凡ＳＧＰＴ和（ｒ—ＧＴ）异常者ＳＣＬｃａ大多有改变。

黄磷中毒性肾上腺皮质损害的研究

实验结果表明,黄磷急性中毒血浆皮质酮波动在正常水平,亚急性中毒早期下降,以后恢复正常,肾上腺抗坏血酸含量无异常;组织学检查可见肾上腺皮质束状带细胞肿胀透亮,部分细胞边界不清,核消失,脂质减少;电镜下可见束状带细胞浆电子密度降低,出现大量髓鞘样体,线粒体后期消失,与此同时,肝脏已呈明显损害。认为黄磷在引起肝损害同时,可能直接影响皮质激素的生物合成;肝损害影响皮质激素在肝的代谢,故血浆皮质激素水平波动在正常水平或下降。

Toll样受体3基因单核苷酸多态性与湿性年龄相关性黄斑变性的关联研究

目的分析中国平原地区汉族人群Toll样受体3(toll-like receptor3,TLR3)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)的基因型分布,探讨该基因SNP与湿性年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的相关关系。方法本研究是以医院病例资料为基础的对照研究。收集南通大学附属医院确诊的湿性AMD患者109例(病例组)及同一地区正常对照150例(对照组),采用TaqMan-MGB荧光探针法检测TLR3外显子4片段上SNP位点Leu412Phe(rs3775291),比较两组等位基因及基因型的频率分布。结果在平原地区汉族人群中TLR3基因Leu412Phe存在三种基因型(CC、CT、TT),其分布频率分别为48.7%、44.0%、7.3%。病例组与对照组年龄、性别、吸烟情况差异均无统计学意义(均为P>0.05),两组具有可比性。病例组的基因型频率分别为CC57.8%、CT34.9%、TT7.3%,同对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。病例组等位基因T的频率低于对照组(分别为25%和29%),但2组差异无统计学意义(P=0.25)。结论中国平原地区汉族人群中TLR3基因的SNP位点rs3775291与湿性AMD的发生无明显相关性。

苯暴露者尿中反，反－粘康酸高效液相色谱检测法的建立及应用

本研究应用特异、敏感的高效液相色谱法，在紫外吸收波长２６５ｎｍ时，检测苯的代谢物，尿中的反，反－粘康酸（ｔｔＭＡ）。１ｍｌ尿液与２ｍｌ含香草酸作内标的Ｔｒｉｓ缓冲液混合，通过经预处理的阴离子交换柱。经磷酸、醋酸钠及去离子水洗涤，ｔｔＭＡ最后用１．５ｍｏｌ／Ｌ氯化钠－甲溶液洗脱。流动相为５ｍｏｌ／Ｌ醋酸钠含１％（Ｖ／Ｖ）醋酸和１２％甲醇（Ｖ／Ｖ）。流速为ｌｍｌ／ｍｉｎ，至第６ｍｉｎ时流速为１．５ｍｌ／ｍｉｎ。ｔｔＭＡ和内标ＶＡ分别在６．８和１２．８ｍｉｎ检出。本实验ｔｔＭＡ最低检出量为０．０５ｍｇ，回收率在９０％以上。现场应用结果提示，尿液ｔｔＭＡ可作为苯暴露者的生物监测指标。

铅对肾上腺皮质激素生物合成毒作用的初步研究

多次给予豚鼠醋酸铅（３０ｍｇ／ｋｇ）后，肾上腺皮质细胞脂质减少．部分细胞变性；血胆固醇降低而组织胆固醇在前几周降低，后期回升并有增加趋势；微粒体１７ａ羟化酶在第２周升高．后期减少；血浆及肾上腺皮质醇水平在前３周升高．提示多次染毒早期．铅毒作用引起应激反应．导致一系列诸如胆固醇耗用过多、合成酶轻度诱导及激素水平增高，尿中代谢产物排出增加等改变。后期出现的改变，可能与肝脏损伤导致ＣＢＧ减少、某些合成酶损伤有关。

化学性肝损害与肾上腺皮质激素的关系

近半世纪来学者们发现很多趋肝毒物如氯仿、乙醇、四氯化碳、黄曲霉素等在引起肝损害的同时可见肾上腺皮质的功能及组织发生不同程度的改变,急性暴发性肝炎发生后12hr血浆皮质醇降低,慢性活动性肝炎患者血浆皮质醇浓度增加,肝炎患者死亡率与血浆皮质醇水平明显相关。另方面。

化学性肾上腺皮质损害机理的研究

研究国内外生产上广泛应用的七种工业原料(黄磷、铅、锰、三硝基甲苯、四氯化碳、氯乙醇、半乳糖胺盐)对肾上腺皮质损害规律及中毒机理。为工业毒理学和职业医学的研究填补空白,为职业中毒防治提供理论依据。 1.毒物对肾上腺皮质损害的病理学改变通过电镜和光镜检查,揭示各种毒物均可引起肾上腺皮质束状带细胞或网状带细胞不同程度的变性和坏死,电镜显示黄磷可引起束状带细胞线粒体结构改变,胞浆内胆固醇析出。

半乳糖胺盐致肝损害与肾上腺皮质激素水平的关系

半乳糖胺盐(GaiN)一次和多次染毒后引起大鼠肝损害和肾上腺抗坏血酸含量下降,而血浆皮质酮、尿17-羟类固醇和17-羟类固酮无明显改变;肝△~4还原酶活性受抑制,而未见血浆肾上腺皮质激素水平增加和尿皮质类固醇排出减少。组织学上可见肾上腺皮质束状带细胞部分肿胀和脂质脱失。肾上腺中抗坏血酸含量下降可能是GalN直接引起的,而不是肝损害的后果。机体在皮质激素高水平的情况下可增加GalN肝毒作用。

渗出型年龄相关性黄斑变性治疗进展

年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)是老年人致盲和严重视力丧失的主要原因之一。AMD有萎缩型和渗出型2种,渗出型AMD的主要特征为脉络膜新生血管形成。目前,针对脉络膜新生血管的有效治疗措施主要包括激光治疗、放射疗法、糖皮质激素和抗新生血管因子玻璃体腔内注射、外科手术等。临床试验和病例报道广泛证实了这些方法的有效性。本文综述了治疗渗出型AMD的主要药物和方法的进展。

荧光抗体标记法在小鼠脉络膜新生血管中的应用

背景脉络膜新生血管（CNV）是导致多种眼底疾病视力损害的主要原因，准确建立CNV模型对于其实验和临床研究具有重要的意义，但目前尚无一种可重复且可靠的评估CNV模型及其有效治疗的方法。目的探讨荧光抗体标记法在定性和定量评价氪激光诱导的小鼠CNV中的应用价值。方法选取15只雄性SPF级C57BL／6J小鼠，用氪激光（波长为647．1am）视网膜光凝的方式建立CNV模型。分别于光凝后5rain，4、7、14及28d随机选取3只模型小鼠行眼底照相和荧光素眼底血管造影（FFA）检查。摘除眼球行脉络膜铺片，用荧光抗体（DAPI、isolectin-B4及phalloidin）分别标记光凝区域的细胞核、内皮细胞和肌动蛋白。用Imageproplus6．0软件测量CNV面积。结果FFA和脉络膜铺片检查结果显示激光光凝后5min及4d无CNV形成，光凝后7d开始出现CNV。光凝后7、14、28d有荧光素渗漏的光凝斑的百分率分别为76．47％（26／34）、81．81％（18／22）和50．00％（5／10）。脉络膜铺片后荧光显微镜检测结果显示，在正常的未光凝区域，视网膜色素上皮（RPE）细胞呈均匀一致的六边形排列；光凝后5min，在光凝部位可检测到一个环形荧光素缺损区，表明脉络膜-Bruch膜-RPE复合体已被破坏；光凝后4d出现一些细胞碎片以及核碎片，Bruch膜破损处可见自发荧光环。光凝后7d时，激光损伤区出现界限清楚的CNV网，并持续到28d。7、14及28d时根据脉络膜铺片所测得的CNV面积分别为（7．99±0．42）×10^3、（16．89±8．77）×10^3、（14．37±4．02）×10^3μm^2，差异有统计学意义（F=17．340，P=0．000）。光凝后14d和28d脉络膜铺片上CNV面积相差不大，但与7d时相比面积均明显增加（q=16．46、q=15．54，P〈0．01）。结论荧光抗体标记法不仅能很好地显示氪激光诱导的小鼠实验性CNV及其形态，而且能测定CNV的面积，为抗新生血管药物应用的疗效研究提供依据。

环境苯暴露者尿中反,反—粘康酸检测方法的建立及在生物监测中的应用研究

苯属Ⅰ类化学致癌物。可引起多种血液系统疾病,诸如再生障碍性贫血、白血病、多发性骨髓瘤等。随着工业的发展,苯作为一种有机溶剂应用相当广泛。据估计,我国目前仅职业接触苯或苯混合物的工人就达50余万之多,非职业接触低浓度苯环境人员更难以统计。故对苯暴露者进行生物监测是职业病预防的重要内容,具有重要意义。苯被人吸收后。

应用眼底病小鼠模型须考虑的因素

随着眼科基础研究的发展,眼科疾病动物模型的应用越来越广泛,正确选择和使用合适的动物模型是合理解释眼科研究结果的保证.在眼底疾病的小鼠模型应用过程中,由于自发性和基因改造性眼底病小鼠模型来源于不同的种系,其中可能带有对所研究表型能产生干扰的基因突变.本文简单介绍最常见的4个基因的突变（变异）,以提出研究者在进行相关研究和选择动物模型时必须考虑的因素.Crb1基因、磷酸乙酰化酶6β（Pde6b）、Gnat2和RPE65基因的突变（变异）在实验小鼠中分布广泛,分别可产生rd8样视网膜变性、rd1样视网膜变性、视锥细胞功能不全和差别性光损伤敏感的表型.研究者在实验设计阶段要认真了解实验动物的遗传背景,排除有可能影响自己所研究的表型的种系.因各种条件所限确实无法避免时,也可通过设立合适的对照加以解决.

三硝基甲苯、铅、黄磷接触者唾液咖啡因清除率对肝毒作用的早期评价

毒物对肝脏的早期作用常表现为肝混合功能氧化酶（ＭＦＯ）的变化，咖啡因主要经肝ＭＦＯ代谢，因此测定其唾液清除率（ＳＣＬｃａ）可用于早期评价某些毒物的肝毒作用。三硝基甲笨（ＴＮＴ）、铅、黄磷接触者口服１７０ｍｇ咖啡因，８小时后收集唾液测定咖啡因含量及求出ＳＣＬｃａ，对照组（１７例）为１３４．３±５９．７ｍｌ／ｍｉｎ，ＴＮＴ接触者（３７例）为６６．５±３３．８ｍｌ／ｍｉｎ（Ｐ＜０．０１），铅接触者（３４例）为６４．１±３０．３ｍｌ／ｍｉｎ（Ｐ＜０．０１），黄磷接触者（３８例）为１４９．９±６８．７ｍｌ／ｍｉｎ。以对照组ＳＣＬｃａ９５％可信限作正常范围，三种接触者ＳＣＬｃａ的异常检出率均比ＳＧＰＴ和γ－ＧＴ的异常检出率高（Ｐ＜０．０１），凡ＳＧＰＴ和γ－ＧＴ异常者ＳＣＬｃａ大多有改变。结果表明ＳＣＬｃａ作为一种无损伤性的肝代谢功能检测方法，对ＴＮＴ、铅接触者早期肝代谢功能改变的评价有一定的意义。

一次采样测定人体咖啡因清除率的研究

咖啡因主要经肝细胞色素Ｐ４５０ＩＡ２代谢，测定其药代动国学参数可反映该Ｐ４５０亚型的活性。本研究显示咖啡因清除相为一级动力学；唾液和血浆的药代动力学参数有良好的相关性；含体重因素的清除率的变异系数比半减期小；用一次采样测定其清除率以８ｈ时点为宜。

苯作业危害程度分级探索

本研究调查了１９９１年顺德市４１家苯作业厂家的危害状况，并对其作业危害程度进行了分级。分级方法采用我国ＧＢ５０４４－８５标准以及美国ＨＲ方法。本文从苯作业角度对两种分级的实质，合理性和预测性进行了探索分析。研究表明对苯作业的危害程度分级有利于分级管理，有重点地保护高危人群，对苯作业人群进行ＳＧＰＴ检测对评价苯作业危害程度起一定作用。作者认为，我国ＧＢ５０４４－８５标准对现阶段我国苯作业特别是乡镇企业苯作业的分级管理有一定的实用价值。

氯化锰对肾上腺皮质激素生物合成及代谢的影响初步探讨

锰中毒是一古老职业病,过去国内外学者只着重研究锰对神经系统、肝和肺部的损害,对内分泌系统的损害尚未引起重视。近年来有学者报道,慢性锰中毒的工人,经促肾上腺皮质激素(ACTH)兴奋试验,显示肾上腺皮质机能不全,尿17酮类固醇和脱氢表雄酮(DHA)排出减少。

工业毒物与肝脏混合功能氧化酶的相互影响

为探讨工业毒物与肝脏混合功能氧化酶（ＭＦＯ）的相互影响规律，从中寻找对人体影响的监测依据，进行了实验研究与现场研究。结果发现：在各种实验染毒条件下，不同毒物可导致ＭＦＯ活力的多样化改变：诱导或抑制、单相或双相反应等，毒物毒性可随之改变；ＭＦＯ还参与多种毒物代谢，与多种肝毒机制有关，如脂质过氧化作用、肾上腺皮质功能改变及肝细胞大分子共价结合作用等，其中人体ＭＦＯ对毒物的反应规律，有望提供肝脏毒物对人体影响的监测指标。