环氧化酶-2与骨形态发生蛋白9诱导血管平滑肌钙化的关系研究

目的研究高磷对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)的影响,BMP9对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的影响与环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的关系。方法利用免疫荧光、茜素红染色和Western blot检测高磷水平对血管平滑肌钙化的诱导作用;利用茜素红染色、硝酸银染色、real-time PCR和Western blot检测BMP9诱导血管平滑肌钙化的作用;采用免疫荧光、茜素红染色、real-time PCR、Western blot检测COX-2与BMP9诱导血管平滑肌钙化的关系。结果与对照组相比,高磷明显促进骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和骨钙素(osteocalin,OCN)表达,并诱导VSMCs出现明显钙盐沉积;高磷呈浓度依赖性方式诱导BMP9表达,增加Runx2、Dlx-5、ALP等骨向调节因子的mRNA表达水平,但降低SM22α的mRNA。BMP9过表达明显增加VSMCs中OPN和OCN的表达水平,同时降低α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平;BMP9过表达明显诱导钙盐沉积,但ALK2突变后则减弱BMP9的这种作用;BMP9过表达能诱导血管平滑肌钙化,14 d时作用最明显。高磷和BMP9过表达都能在VMSCs中明显诱导COX-2表达,过表达COX-2增强BMP9在VSMCs中对OPN和OCN表达的促进作用,但加强BMP9对α-SMA表达的抑制作用;COX-2抑制剂减弱BMP9对OPN和OCN表达的促进作用,以及BMP9对α-SMA表达的抑制作用;COX-2抑制剂同时还降低BMP9在VSMCs中促进钙盐沉积的作用。结论高磷诱导VSMCs钙化可能与促进BMP9和COX-2表达有关,并且COX-2参与介导BMP9诱导的VMSCs钙化。

IGFBP-5及p53与汉防己甲素抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的关系研究

目的研究汉防己甲素(tetrandrine,Tet)抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用及可能的分子机制。方法采用CCK-8、流式及Western blot分析不同浓度Tet对MCF-7细胞增殖与凋亡的影响;通过real-time PCR、Western blot检测Tet对MCF-7细胞IGFBP-5表达的影响;应用CCK-8分析Tet及IGFBP-5过表达或沉默表达对Tet抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响;利用Western blot检测Tet对MCF-7细胞p53表达的影响,以及过表达IGFBP-5和(或)Tet对乳腺癌MCF-7细胞p53表达的影响。结果 Tet呈浓度和时间依赖性抑制MCF-7细胞增殖,诱导G1期阻滞,并降低PCNA表达水平;同时,Tet明显增加MCF-7细胞凋亡比例,升高Bad的蛋白水平,降低Bcl-2的蛋白水平。Tet上调MCF-7细胞IGFBP-5的表达水平,过表达IGFBP-5增加Tet对MCF-7细胞的增殖抑制作用,而沉默IGFBP-5则减弱Tet的这种作用。Tet升高MCF-7细胞的p53蛋白水平,降低MDM2的蛋白水平;过表达IGFBP-5增强Tet对p53表达的促进和对MDM2表达的抑制作用。结论 Tet对MCF-7细胞增殖具有抑制作用,机制可能与其上调IGFBP-5而增强p53信号的功能有关。

汉防已甲素抑制人结肠癌细胞增殖与TGF-β1的关联机制研究

目的研究汉防已甲素(tetrandrine,Tet)抑制人结肠癌细胞增殖与TGF-β1的关系。方法利用细胞增殖抑制实验、定量PCR、流式细胞术、Annexin V-EGFP染色以及Western blot实验,分析Tet对HCT116细胞增殖和凋亡的影响;利用定量PCR、Western blot、细胞增殖抑制和免疫荧光实验,分析在结肠癌细胞中Tet抗结肠癌作用与TGF-β1的关系,以及TGF-β1介导Tet抗结肠癌作用可能的分子机制。结果与对照组相比,Tet抑制HCT116细胞增殖、诱导G1阻滞和细胞凋亡;Tet增加TGF-β1在HCT116细胞中的m RNA和蛋白表达水平,TGF-β1增强Tet抑制HCT116细胞增殖和促进其凋亡,抑制TGF-β1明显减弱Tet的这种作用;Tet降低Akt1/2/3的磷酸化水平,抑制PI3K增强Tet对结肠癌细胞增殖的抑制作用;TGF-β1增强Tet对Akt1/2/3磷酸化的抑制作用,而Tet降低Akt1/2/3磷酸化水平的作用可被TGF-β1抑制剂部分逆转;沉默PTEN促进Akt1/2/3磷酸化,但TGF-β1能翻转沉默PTEN对Akt1/2/3磷酸化的促进作用。结论 Tet能抑制结肠癌细胞增殖和促进凋亡,机制可能与其通过促进TGF-β1表达,抑制Akt1/2/3磷酸化有关。

罗格列酮与全反式维甲酸诱导小鼠胚胎成纤维细胞定向骨分化研究

目的探讨罗格列酮(RSG)与全反式维甲酸(ATRA)对干细胞定向骨分化的影响,并初步解析这一作用的可能分子机制。方法通过定量PCR、组织化学染色及Western blot等方法,检测相关成骨与成脂分化标志物的变化情况;利用荧光素酶报告质粒,检测Runx2的转录水平以及BMP/Smad信号的激活情况。结果在C2C12、C3H10T1/2和MEFs中,PPARγ以及RAR和RXR各亚型受体均有表达。单独使用RSG或ATRA均能增加MEFs细胞中碱性磷酸酶(ALP)的活性,且RSG能明显增加ATRA所诱导的ALP活性。RSG或ATRA单独应用不能诱导钙盐沉积,两者合用不但增加OPN和OCN的表达,而且还诱导钙盐沉积。RSG可诱导脂滴生成,ATRA不能诱导脂滴生成,且抑制RSG促进脂滴生成的作用。RSG在MEFs中促进C/EBPα表达,但ATRA能抑制RSG的这种作用。ATRA与RSG合用可促进MEFs中Runx2的蛋白表达。同时,ATRA与RSG合用增加了MEFs中BMP/Smad的转录和Smad1/5/8的磷酸化水平,同时也增加了Smad6的mRNA表达,但对Samd7的mRNA表达有抑制作用。结论RSG与ATRA合用能诱导MEFs定向骨分化,该作用可能与ATRA抑制RSG诱导的成脂分化,并增加BMP/Smad信号转导活性有关。

基于最小圆覆盖的海上突发事件空间聚类研究

从事件分布的地理学视角出发,尝试将平面几何中的最小圆覆盖思想与空间聚类分析技术中的K-均值聚类法相融合,提出了基于最小圆覆盖的K-均值聚类法,利用海上突发事件的位置信息,划分出海上突发事件空间聚类区,并通过实例验证了该方法的可行性和有效性,为海上突发事件重点区域的划分提供了一种新的研究思路。

第三代篦冷机篦板梁的制造工艺及质量控制

第三代篦冷机四排充气篦床由箱式篦板梁（包括活动梁和固定梁）和充气篦板组成，箱式篦板梁与充气篦板组成左右独立的防漏的“小冷风室”。这样可根据料层的情况调节每个“小冷风室”的风量、风压，使熟料分布得更加均匀，最大限度回收熟料中的热量。

基于客流场的客运空间联系及空间效应研究

基于物理场和运输通道场理论,综合经济、政策、运输成本等因素,分析区域内各节点的客运空间联系以及整个区域的客运空间效应。构建客运空间联系模型和客运空间效应模型,并进行案例分析。研究表明,利用客运空间联系模型能够分析各节点客运空间联系的规模与影响,识别具有客运中转潜力的地区;客运空间效应模型能够较好地反映区域客运集聚与扩散效应,分析得到具有客流集聚潜力的地区。通过两个模型的叠加对比分析,可得出区域最具发展潜力地区,为区域规划发展提供技术支持。

Wnt10b与骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的关系

目的研究Wnt10b与骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导间充质干细胞(MSCs)骨向分化的关系,以及相关的分子机制。方法利用PCR、Westernblot、组织化学染色等方法,检测BMP9对Wnt10b表达的影响,以及Wnt10b对BMP9诱导的成骨分化的影响。同时,通过定量PCR、Westernblot、油红O染色、流式细胞术等,分析Wnt10b影响BMP9成骨分化诱导作用的可能机制。结果Wnt10b在C3H10T1/2、C2C12、MEFs和MC3T3-E1细胞中均有表达,BMP9在C3H10T1/2细胞中上调Wnt10b的表达水平。Wnt10b增强BMP9在C3H10T1/2细胞中增加OCN蛋白水平和促进钙盐沉积的能力,沉默Wnt10b减弱BMP9的作用。Wnt10b并不改变BMP9对细胞周期的影响,但能增强BMP9诱导的Smad1/5/8磷酸化,沉默Wnt10b减弱BMP9对Smad1/5/8磷酸化的促进作用。此外,Wnt10b抑制BMP9在C3H10T1/2细胞中诱导的成脂分化,沉默Wnt10b则促进BMP9的成脂分化诱导作用。结论Wnt10b可以促进BMP9诱导的MSCs骨向分化,这种作用可能与增强BMP/Smad信号转导有关。

白藜芦醇抑制人结肠癌细胞增殖与骨形态发生蛋白7的关系研究

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对人结肠癌细胞生长的抑制作用与骨形态发生蛋白7(BMP7)的关系,及其可能的分子机制。方法利用CCK-8、流式细胞术、Western blot和Annexin V-EGFP染色等方法,分析Res对HCT116细胞增殖和凋亡的影响。利用细胞增殖抑制实验、PCR和Western blot等实验,分析Res对HCT116细胞中BMP7表达的影响,以及BMP7对Res抑制结肠癌细胞增殖的影响及可能分子机制。结果 Res能抑制HCT116细胞增殖,诱导S期阻滞并促进其凋亡;Res增加BMP7在HCT116细胞中的mRNA和蛋白表达。过表达BMP7增强Res对HCT116细胞的增殖抑制作用,并促进凋亡,而BMP7特异性抗体则明显减弱此作用;在HCT116细胞中,Res对BMPs/Smads信号无明显影响,但能降低Akt1/2/3的磷酸化水平;过表达BMP7增强Res抑制Akt1/2/3磷酸化的作用,而BMP7特异性抗体明显减弱Res的这种作用;同时,过表达BMP7能增强Res抑制PTEN磷酸化的作用,而BMP7特异性抗体明显减弱Res对PTEN磷酸化的抑制。结论 Res对结肠癌HCT116细胞有增殖抑制作用,机制可能与Res通过上调BMP7表达而抑制PTEN磷酸化,最终使PI3K/Akt信号转导下降有关。

骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞骨向分化与Wnt11的关系

目的 探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导干细胞骨向分化与Wnt11的关系及可能的分子机制。方法通过qPCR、组织化学染色及Western blot等方法,检测成骨分化相关标志物,以及BMP/Smad和p38 MAPK信号的变化;利用荧光素酶报告质粒,检测BMP/Smad信号的活性改变。结果 BMP9增加C3H10T1/2细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性、钙盐沉积、骨桥素(OPN)和Wnt11表达。Wnt11在C3H10T1/2、MEFs、MC3T3-E1和C2C12细胞中均有表达。在C3H10T1/2细胞中,Wnt11增强BMP9促进ALP活性、钙盐沉积、Runx-2和OPN表达的作用,以及BMP9对BMP/Smad报告质粒转录活性和Smad1/5/8磷酸化的促进作用;Wnt11还增强BMP9诱导p38 MAPK磷酸化的作用;抑制p38 MAPK则减弱BMP9诱导ALP活性、钙盐沉积及OPN表达的作用,但该效应能被Wnt11部分逆转。结论 BMP9在MSCs中能上调Wnt11表达。Wnt11能促进BMP9的骨向分化诱导作用,该作用可能与其增加BMP/Smad和p38 MAPK信号的活性有关。

影响汽车消费金融满意度的因素研究——基于武汉市汽车消费者的213份问卷调查

汽车消费金融的产生和发展影响了人们消费汽车的行为和方式,更对整个汽车行业的发展和变革有着深远的意义,是未来一个新的经济增长点。然而在我国,汽车消费金融起步较晚、渗透率低,离发达国家还有一定的差距,消费者对汽车消费金融的满意度也不高。本文基于汽车消费者的视角,运用因子分析法和Logistic模型,探究影响汽车消费者对汽车消费金融满意度的因素,并对影响因子进行分类研究。通过本次调查分析发现了武汉市汽车消费金融市场存在的问题,并提出针对性的意见和建议,助力武汉市未来汽车消费金融市场的发展。

一种厚膜片式电阻器抗硫化性能的快速评价方法

为快速评价厚膜片式电阻器的抗硫化性能,提出了一种新方法。该方法以硫脲为硫源,将样品浸入一定温度的硫脲水溶液中,测试浸入前后的电阻变化率并进行评价。与目前以硫化氢、硫磺等为硫源的方法相比较,该方法在评价速度、环保性、安全性、操作便利性等方面具有明显优势。以银电极样品和抗硫化厚膜片式电阻器为对象,硫脲和硫化氢为硫源,做了两组对照实验,结果表明,硫脲溶液法的评价速度至少是传统硫化氢法的8倍。

心电信号采集记录系统的设计

为了更好地解决心电信号的采集和处理问题,设计了以高性能DSP芯片TMS320C32x为核心心电信号的采集记录系统,对心电信号的放大、滤波部分的硬件设计进行了重点研究并针对实际应用设计了检测电路,以C语言为基础设计了系统软件和针对于心电信号处理的自适应滤波器,实践证明该系统能很好地完成对心电信号的采集、滤波和记录。

立式辊磨机磨辊安装工艺及过程质量控制

本文从安装实际操作入手,对立式辊磨机磨辊安装的具体工艺规程,如安装前的准备工作,安装时应注意的事项,安装的步骤、流程及过程质量控制等方面进行了具体探讨。

双向抗基线漂移滤波器技术的研究对比

讨论了矫正心电信号基线漂移的几种数字滤波器方法,引入了一种抗基线漂移的双向滤波器,并且对各种滤波器性能和实现方法进行了比较。

“大党建”引领“大群团”的探索和实践

近年来,成都市深入学习贯彻习近平总书记关于群团工作系列重要指示精神,认真贯彻落实中央、省委关于推进群团组织改革的各项要求,聚焦强化政治职责、优化组织体系、彰显功能价值、转换服务模式主动作为,构建起开放多元、整体联动的“大群团”工作格局,在高质量建设践行新发展理念的公园城市示范区、高水平创造新时代幸福美好生活中释放出群团活力、贡献出群团力量。

生育意愿对湖北省某妇幼保健院女性不孕症患者就医延迟情况的影响

目的:分析生育意愿对于湖北省某妇幼保健院女性不孕症患者就医延迟情况的影响,为减少女性不孕症患者就医延迟情况提供参考。方法:采用问卷调查的方法对在湖北省某妇幼保健院生殖科进行不孕症就诊的553名女性患者进行调查,利用logistic回归等方法分析生育意愿对不孕症患者就医延迟情况的影响。结果:女性不孕症患者就医延迟情况受到年龄(P=0.010)和既往生育史(P=0.004)的影响。弱生育意愿(OR=0.46)和低不孕症认知水平(OR=0.66)的患者发生就医延迟的风险较高,生育意愿与不孕症认知水平的交互项对患者就医延迟情况产生影响(OR=0.73)。结论:生育意愿对于女性不孕症患者就医延迟情况有显著的影响,不孕症认知水平在生育意愿和不孕症患者就医延迟情况之间存在调节效应。应进一步提高女性的生育意愿,同时注重生育知识的健康教育,进而促进女性不孕症患者的及时就医。

饶应祺新疆治理研究

1884年新疆建省后,作为第三任巡抚的饶应祺大力发展屯垦,推广学堂教育,升级新疆行政建置改革,充实和完善南疆基层治理力量,妥善处置民变,机敏处理涉外事件,保证了新疆社会的稳定和发展。饶应祺履职西北40年、主政新疆8年,能够于内忧外患之际维护国家统一,使新疆与中原一体化程度不断加深,他的施政理念和实践对于当代新疆治理具有一定的借鉴意义。

冬凌草甲素抑制HCT116细胞增殖与p38 MAPK信号通路相关性研究

目的研究冬凌草甲素(ORI)对人源结肠癌细胞HCT116的增殖抑制作用,并探讨其可能的分子机制。方法采用结晶紫染色研究ORI(5、10、15、20、25μmol/L)对HCT116细胞的增殖抑制作用;采用Western blotting技术研究ORI(10、15、20μmol/L)对HCT116细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡相关指标(Caspase-3和Cleaved-caspase-3)、p38 MAPK信号通路相关指标(Smad1/5/8、p-Smad1/5/8、p38、p-p38)蛋白表达的影响;采用Western blotting、凝胶电泳技术分析ORI对BMP7蛋白、mRNA表达的影响;转染重组BMP7腺病毒(Ad BMP7)实现BMP7的外源性过表达,应用BMP7抗体(anti-BMP7)降低BMP7水平,检测ORI是否通过调节BMP7表达影响HCT116细胞增殖凋亡、p38 MAPK信号通路。结果与对照组比较,ORI明显抑制HCT116细胞增殖,下调PCNA蛋白水平;明显上调Caspase-3、Cleaved caspase-3、p-p38蛋白表达,且呈浓度与时间相关性,对Smad1/5/8、P-Smad1/5/8蛋白表达无明显影响;明显上调BMP7蛋白及RNA表达;外源性过表达BMP7加强了ORI对上述蛋白表达的调控,anti-BMP7则部分抑制了ORI的作用。结论 ORI抑制HCT116细胞的增殖,其机制可能与上调BMP7蛋白表达进而激活p38 MAPK信号通路相关。

盐酸维拉唑酮的合成方法改进

目的:改进盐酸维拉唑酮的合成工艺。方法:以5-溴水杨醛和溴代丙二酸二乙酯为原料,经醚化、环合、酰胺化、取代、水解制得中间体5-(1-哌嗪基)苯并呋喃-2-甲酰胺(7)。7再与3-(4-氯丁基)-1H-5-氰基吲哚(11)经取代和与盐酸成盐制得盐酸维拉唑酮。其中,11是用5-氰基吲哚和4-氯丁酰氯经酰化、还原得到的。结果:工艺的总收率为39.1%;盐酸维拉唑酮的结构经质谱、核磁共振谱确证。结论:该方法工艺简单,收率高,适合工业化生产。