基于片段生长技术的PD-1/PD-L1小分子抑制剂的设计

目的 基于片段生长技术开发小分子PD-L1抑制剂。方法 根据已知的苯甲酰苯胺活性片段结构,使用FDA碎片库进行片段生长,然后使用分子对接和分子动力学对其进行进一步筛选,最终通过体外实验获得活性化合物。结果 获得一系列包含苯甲酰苯胺片段的分子库,其中有8个打分较高的分子,分子动力学模拟表明776191具有最高的结合能,体外抑制实验证明776191具有一定的抑制PD-1/PD-L1结合活性。结论 776191是一种具有新型结构的PD-1/PD-L1抑制剂,这一研究丰富了PD-1/PD-L1抑制剂的多样性,为其开发提供了新的设计思路。

DPP-4抑制剂LGT-6在不同种属血浆中蛋白结合率的比较

目的:建立二肽基肽酶4抑制剂LGT-6在不同种属血浆中蛋白结合率的测定方法并比较差异。方法:采用平衡透析法,以磷酸盐缓冲液为透析外液,将3、30、300、3000 nmol/L的LGT-6分别在大鼠、猴、人血浆(即透析内液)中平衡48 h。以甲苯磺丁脲为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定透析内、外液中LGT-6的浓度,计算血浆蛋白结合率。以ACQUITY UPLCHSS T3为色谱柱,以水(含0.01%甲酸)-乙腈(含0.01%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.6 mL/min,柱温为40℃,进样量为2μL;离子源为电喷雾离子源,监测模式为多反应监测模式,采集模式为正离子模式,定量分析用离子对分别为m/z 487.0→434.3(LGT-6)、m/z 271.1→172.0(内标)。结果:在3、30、300、3000 nmol/L浓度下,LGT-6在大鼠血浆中的蛋白结合率分别为(96.25±0.97)%、(84.16±1.24)%、(78.25±0.61)%、(66.63±0.95)%,在猴血浆中的蛋白结合率分别为(98.54±0.58)%、(87.27±1.01)%、(79.35±0.86)%、(66.69±0.54)%,在人血浆中的蛋白结合率分别为(99.40±1.03)%、(84.48±1.15)%、(77.62±0.77)%、(66.93±0.48)%。在相同浓度下,LGT-6在大鼠、猴和人血浆中的蛋白结合率没有明显差异(P>0.05);在相同种属血浆中,不同浓度LGT-6的血浆蛋白结合率组间比较差异有统计学意义(P<0.05),且有随药物浓度的升高而降低的趋势。结论:成功建立了测定LGT-6血浆蛋白结合率的方法。在相同浓度下,LGT-6在大鼠、猴、人血浆中的蛋白结合率没有明显的种属差异,但有明显的浓度依赖趋势。

药物化学实验教学改革探讨

根据药物化学学科特点,对传统药物化学实验课程进行改革,以扑热息痛琥珀酸单酯的合成为例,设置设计性实验,提高实验课程的效果和质量,提升学生的综合技能,满足社会对全面药学知识人才的需求。

Foretinib衍生物LWK-126在不同种属肝微粒体中的代谢稳定性研究

目的:建立测定肝微粒体中Foretinib衍生物LWK-126质量浓度的方法,研究其在大鼠、比格犬、人肝微粒体中的代谢稳定性。方法:采用体外肝微粒体孵育体系,将LWK-126分别溶于由还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸溶液启动的大鼠、比格犬、人肝微粒体孵育体系中,于37℃水浴下分别孵育0、5、10、20、30、60 min时加入含内标(1μg/mL甲苯磺丁脲)的乙腈终止反应,并采用超高效液相色谱-串联质谱法检测各孵育体系中LWK-126的质量浓度。以Waters BEH C_(18)为色谱柱,以水(含0.01%甲酸)-乙腈(含0.01%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温为30℃,进样量为2μL;离子源为电喷雾电离源,采用正离子模式采集,扫描范围为m/z 50→1 200。以孵育0 min时LWK-126的质量浓度为参照,计算其在不同孵育体系中的剩余百分率与酶动力学参数。结果:LWK-126检测质量浓度的线性范围为0.05~15μg/mL(R^(2)=0.999 2),定量下限为0.05μg/mL,最低检测限为0.01μg/mL,精密度、准确度、提取回收率和基质效应均符合生物样品定量分析的要求。LWK-126在人、大鼠、比格犬肝微粒体中孵育60 min后的剩余百分率分别为(33.17±4.52)%、(3.14±6.73)%、(1.38±5.85)%,半衰期分别为33.15、11.76、5.62 min,清除率分别为38.45、118.81、245.76μL/(min·mg)。结论:成功建立了肝微粒体中LWK-126质量浓度的测定方法。LWK-126在不同种属肝微粒体中的代谢稳定性排序依次为人>大鼠>比格犬。

茚草酮的合成工艺改进

本论文以价廉易得的间氯苯乙酮为起始原料,经与甲基氯化镁加成、对甲苯磺酸脱水、N-氯代丁二酰亚胺氯代3步反应制得1-氯-3-(3-氯丙基-1-烯-2-基)苯(5);以邻苯二甲酸二乙酯为原料,经与丁酸乙酯环合制得2-乙基-1H-茚-1,3(2H)-二酮(7),7再与中间体5发生取代反应后经间氯过氧苯甲酸氧化制得终产物茚草酮(1),总收率47%(以2计),纯度99.77%。该路线反应原料廉价易得,反应条件温和、操作简便,适合工业化生产。

PF-4989216的合成工艺优化

以价廉易得的丙二腈为起始原料,经二硫化碳/碘甲烷取代、巯基乙酸乙酯环合、桑德迈尔反应制得中间体(5),5再经钨酸钠/双氧水体系氧化进而得到中间体(6),6经吗啉取代后再与2-氟-4-氰基苯硼酸进行Suzuki偶联得到中间体(8),8与甲酰胺/甲醇钠反应进一步制得酰胺9,9与DMF-DMA发生缩合后再与水合肼环合制得PF-4989216,总收率19.6%(以2计),纯度99.73%。该路线反应条件温和、操作简单,具有较好的工业化前景。

新型DPP-4抑制剂LGT-6在Caco-2细胞单层模型中的转运特性研究

通过建立Caco-2细胞单层模型探究降糖化合物LGT-6的转运特性。采用MTS法测定LGT-6的安全浓度范围,通过测定跨膜电阻、碱性磷酸酶活力、高渗透性药物普莱洛尔与低渗透性药物荧光素钠通透性实验的表观渗透系数P_(app)(AP→BL)来验证Caco-2细胞单层模型的致密性。考察LGT-6在从Transwell顶端(AP)到底端(BL)及底端到顶端的转运特性,计算表观渗透系数和外排比。分析转运时间、给药浓度和P-糖蛋白(P-gp)抑制剂对LGT-6转运特性的影响。Caco-2细胞单层模型建立成功,可用于LGT-6的转运特性研究。LGT-6的转运量随时间的延长及浓度的增大而增加,不同浓度的LGT-6在双向转运随浓度变化而变化,从AP→BL的P_(app)值为3.55×10^(-6)~5.64×10^(-6)cm/s,BL→AP的P_(app)为4.28×10^(-6)~8.76×10^(-6)cm/s,外排比(ER)均≥1.2。降糖化合物LGT-6在体外Caco-2细胞模型上的口服吸收较好,其转运方式主要以被动扩散为主,可能有P-糖蛋白参与其转运。

c-Met抑制剂LWK-126在人工胃肠液中的稳定性研究

目的研究LWK-126在人工模拟胃肠液中的稳定性,为其代谢稳定性研究提供基础。方法采用RPHPLC法测定LWK-126在人工胃肠液放置0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0 h后的含量,计算其降解剩余百分含量。结果LWK-126质量浓度在0.25~12μg·mL^-1(r=0.9992,n=7)与峰面积成良好线性关系,在37℃空白人工胃肠液(不加酶)及人工胃肠液中的降解剩余百分率均大于93.51%。结论LWK-126在模拟人体胃肠道环境的溶液中较稳定,不会发生明显降解,不易受胃蛋白酶和胰蛋白酶的影响。

DPP-4抑制剂LGT-6在不同种属肝微粒体中的代谢特征

研究降糖化合物LGT-6在人、比格犬、大鼠肝微粒体中的代谢稳定性,探讨其在不同种属肝微粒体中的代谢特征,为后期LGT-6的体内代谢提供参考依据。分别将LGT-6溶于由NADPH启动Ⅰ相代谢、UDPGA启动的Ⅱ相代谢以及二者共同启动的两相代谢孵育体系中,孵育至相应时间点终止反应,测定LGT-6的质量浓度,用以计算LGT-6的剩余百分率与酶动力学参数。LGT-6在Ⅰ相代谢、Ⅱ相代谢及两相代谢中稳定性良好,不易受Ⅰ相代谢酶与Ⅱ相代谢酶的影响,预测LGT-6可能在人体内的驻留时间长、作用持久、生物利用度高,体内药动学与药效学性质俱佳,对Ⅱ型糖尿病的治疗作用更加显著。所创建的UPLC-MS/MS法适用于LGT-6的体外代谢研究,为后续体内代谢、毒理研究及动物模型的选择提供参考依据。但在Ⅰ相孵育体系中人肝微粒体的T1/2明显大于比格犬与大鼠,这可能与物种之间的种属差异相关。

《药事管理学》课程思政教学实践应用

目的:推进高校专业课程思政建设,发挥课程育人作用,在学习专业知识的同时提升学生思想政治素养。方法:开设《药事管理学》思政课程,对我校2018级药事管理专业及药物制剂专业学生进行教学实践,并通过问卷调查对教学效果进行反馈。结果:教学课程结束后发放调查问卷193份,有效回收191份,有效回收率为98.96%。问卷调查结果显示,绝大部分学生(163人,占85.34%)都认为思政内容融入专业课程很有必要,83.77%的学生(160人)认为在《药事管理学》课程中加入的思政元素对其思想有很大的启迪,84.82%的学生(162人)认为在思政融入《药事管理学》课程的学习中专业知识得到了很大的提升。结论:我校《药事管理学》课程思政建设已初步建立,教学效果较好,但在提升专业教师的思想政治素养和丰富结合思政点的教学资源等方面,仍需不断进行完善。

立体化教学模式在药事法规课程中的应用探究

目的:为培养药学相关专业学生的综合素质,探索立体化教学模式在药事法规教学中的运用。方法:以理论教学为基础,针对教学资源、教学方法、教学手段、考评方式进行立体化改革与实践,构建模拟教学、互动教学、案例教学、双语教学、实践教学、网络课程等为一体的多层次、多形态的立体化教学体系。结果:立体化教学应用于药事法规课程的教学中,可提高学生以"自主学习能力、语言表达能力、团队协作能力、信息处理能力、解决问题能力"为基本核心的综合能力培养。结论:立体化教学是提高学生主动获取知识能力的重要方法,在实践教学和实际应用中具有重要的教学价值,为高等院校在专业基础教育阶段培养复合创新型人才提供新的模式和经验。

贵阳市医保定点零售药店空间分布及其相关因素研究

目的为贵阳市科学引导药品零售业发展和执行国家卫生政策提供理论依据。方法通过统计年鉴、数据云及百度地图应用程序编程接口坐标获取器等获得数据资料,运用基于地理信息系统的空间分析方法分析贵阳市医保定点零售药店(简称“定点药店”)的空间分布特征及可达性,并运用统计学方法分析影响贵阳市定点药店分布的相关因素。结果贵阳市的定点药店数量、每千人定点药店数量、每10 km^(2)定点药店数量分别从2020年的2018、0.41、2.51家增加到2021年的2500、0.42、3.11家,增长率分别为23.89%、2.44%、23.90%。贵阳市居民步行在15 min内到达的定点药店,其服务面积仅占贵阳市定点药店服务总面积的10.27%。相关性分析结果表明,贵阳市地区生产总值、社会消费品零售总额、人口数量、城镇居民人均可支配收入与定点药店数量的相关系数分别为0.999、0.999、0.977、0.992(P均小于0.05)。结论贵阳市定点药店布局辐射范围不足,各行政区定点药店发展不平衡,药店布局明显受经济和人口因素的影响。建议当地可探索科学合理扩大城乡定点药店覆盖面的策略,以适宜的经济及人口政策促进药店合理布局,并注重提升定点药房服务能力,从而改善人民群众的生活品质、引导药品零售业的健康高质量发展。

黔产五种卷柏黄酮含量测定及其对α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

建立中药卷柏特征成分总黄酮及穗花杉双黄酮的快速含量分析方法,比较不同卷柏药材中的含量及活性差异。采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定卷柏总黄酮和穗花杉双黄酮含量;通过建立体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,对卷柏活性部位进行活性测试。不同卷柏中总黄酮含量在1.48%~2.67%之间,穗花杉双黄酮含量在0.49%~0.93%之间,活性部位的总黄酮含量在9.14%~16.46%之间,穗花杉双黄酮含量在2.26%~4.74%之间。卷柏活性部位的α-葡萄糖苷酶活性为:垫状卷柏IC_(50)6.56μg/mL;疏叶卷柏IC_(50)4.47μg/mL;兖州卷柏IC_(50)4.41μg/mL;剑叶卷柏IC_(50)4.23μg/mL;块茎卷柏IC_(50)3.12μg/mL,均明显强于阳性对照阿卡波糖(IC_(50)76.82μg/mL)。总黄酮和穗花杉双黄酮含量在不同品种间存在差异,其中对α-葡萄糖苷酶抑制作用和黄酮含量呈量效关系,且具有显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性。

L-a17在体外血浆和人工胃肠液中的稳定性研究

考察L-a17在体外血浆和人工胃/肠液中的稳定性,有助于针对性的进行药物结构优化,提高药物的吸收率,更有效的指导药物制剂的开发。采用高效液相色谱法,检测L-a17在大鼠血浆和空白人工胃/肠液、人工胃/肠液中孵育不同时间的含量变化,计算剩余百分含量。结果表明L-a17在大鼠血浆及空白人工胃/肠液、人工胃/肠液中孵育不同时间的剩余百分比均在(84.01±0.51)%~(105.57±0.84)%范围内。L-a17在大鼠体外血浆及模拟人工胃/肠液中稳定性良好。

Golvatinib的合成工艺研究

本论文以价廉易得的2,4-二氟硝基苯和2-氨基-4-羟基吡啶为起始原料,经取代、酰化、取代、还原、酰化共5步反应制得Golvatinib,总收率31.4%。该方法原料易得、反应条件温和、操作简单,具有较好的工业化前景。

我校药事管理本科生对该专业认同感的调查研究

目的调查贵州医科大学2016~2019级药事管理专业本科在校生的专业认同情况,收集药事管理专业在校本科生对专业培养过程中的评价与建议。方法采用问卷调查法收集了2016~2019级药事管理专业本科生的基本情况、专业认同情况、专业就业期待情况及专业建议。结果学生对专业的总体认同情况为(0.5146±0.1420)分,其中在专业教学认同维度评分最高为(0.6059±0.1760)分,在专业就业信心维度的评分最低为(0.4501±0.1945)分。受访者的年级、性别、读本专业是否是自己选择、性格是否外向会影响学生的专业认同感(P<0.05)。结论药事管理专业本科生专业教学认同较强,建议通过改善课程结构、加强专业宣传、改善学生对药事管理专业就业信心,促进药事管理专业的发展。

新型SHP2衍生物NC-55-122在大鼠体内的药动学研究及其体内代谢产物分析

考察新型含Src同源2结构域蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP2)蛋白抑制剂三唑并喹啉酮衍生物NC-55-122在大鼠体内的药代动力学特征,并在此基础上对化合物NC-55-122在大鼠体内的代谢产物进行分析。首先将大鼠随机分组,分别灌胃和静脉给予化合物NC-55-122,采集不同时间点的血样,以卡马西平为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠体内NC-55-122的浓度,并进行方法学的验证,用DAS 2.0软件计算主要的药代动力学参数,采用Graph Pad Prism 8.0.1软件绘制血药浓度-时间曲线;并同时建立超高液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF/MS)对血浆样品进行分析,并运用UNIFI代谢产物预测软件分析经大鼠灌胃和静脉给药后的代谢产物。结果表明,化合物NC-55-122检测质量浓度的线性范围为1~1600 ng·m L^(-1),线性关系良好,在此线性范围内进行基质效应和提取回收率、精密度和准确度以及稳定性的考察,均符合生物分析要求;其次,药动学参数分析表明该化合物的口服生物利用度相对较低,仅为3.09%,但该化合物在体内吸收的速度较慢;最后通过分析离子流图以及结合UNIFI软件共推测出5个可能的代谢产物。本实验建立的检测方法灵敏度高,专属性强、快速、高效,适用于化合物NC-55-122在大鼠体内血药浓度的测定以及代谢产物的分析,为后期抗肿瘤药物NC-55-122的结构修饰以及成药性评价奠定基础。所有动物实验均经贵州医科大学实验动物伦理委员会批准(批准号:2200823)。

伯舒替尼(Bosutinib)

由美国惠氏制药公司（Wyeth Pharmaceuticals）研发的伯舒替尼（bosutinib）于2010年9月经欧盟批准作为“孤儿药”用于治疗慢性髓性白血病（CML）。2012年9月4日，该药又经美国食品药品监督管理局（FDA）批准上市，商品名为Bosulif。

基于虚拟筛选和分子动力学模拟的PD-1/PD-L1小分子抑制剂的发现

目的 发现具有新型结构的PD-1/PD-L1小分子抑制剂,并测试其对PD-1/PD-L1蛋白的阻断活性,为后续相关研究提供参考。方法 利用AutoDock Vina对TCM和TargetMol两种天然产物分子库进行虚拟筛选,获得打分较高的分子,采用HTRF方法测试所得化合物的体外抑制活性,并通过分子动力学模拟对其稳定性和结合模式进行分析。结果与结论最终确定了一种能够与PD-L1相互作用的新型化合物754792,并证明其可以有效阻断PD-1/PD-L1与配体的结合。该研究为开发免疫检查点抑制剂提供了重要的理论依据,为进一步开发高效的PD-1/PD-L1小分子抑制剂奠定了基础。

超滤法结合液质联用技术测定抗肿瘤化合物CJ-6在不同种属中的血浆蛋白结合率

目的:通过建立测定血浆中抗肿瘤化合物N-(4-((2-(环丙烷甲酰胺)吡啶-4-基)氧基)-3-氟苯基)-4-甲基-3,5-二氧基-2-苯基-2,3,4,5-四氢-1,2,4-三嗪-6-甲酰胺(CJ-6)的分析方法,测定CJ-6在不同种属(大鼠、猴、人)中的血浆蛋白结合率。方法:采取超滤法测定CJ-6在大鼠、猴、人血浆中的血浆蛋白结合率,以超滤法结合液质联用技术(LC-MS/MS)检测孵育液及超滤液中CJ-6的含量,计算CJ-6的血浆蛋白结合率。结果:CJ-6在低、中、高浓度(0.1,1,10μmol·L^(-1))下的大鼠血浆中的血浆蛋白结合率分别为(89.61±2.07)%,(92.94±1.15)%,(97.64±1.59)%;在猴血浆中的血浆蛋白结合率分别为(98.11±2.21)%,(98.46±1.58)%,(98.87±1.40)%;在人血浆中的血浆蛋白结合率分别为(98.42±2.54)%,(98.81±1.73)%,(99.30±1.26)%。其中,在低、中浓度(0.1,1μmol·L^(-1))下,CJ-6在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率明显低于猴及人血浆中的血浆蛋白结合率;在高浓度(10μmol·L^(-1))下,在3个种属血浆中的血浆蛋白结合率没有明显的差异。结论:建立的LC-MS/MS法简便、稳定、可靠,可用于CJ-6的含量测定,CJ-6在人、猴种属中血浆蛋白结合率与药物浓度无明显浓度依赖性,仅在大鼠血浆中,表现出一定的浓度依赖性。