联合表达BMP2和Sox9促进体外培养间充质干细胞成软骨分化

目的探讨联合表达骨形态发生蛋白2(BMP2)和Sox9对间充质干细胞(MSCs)成软骨分化的影响,为构建组织工程软骨提供实验依据。方法以小鼠胚胎骨髓MSCs(C3H10T1/2)为种子细胞,重组腺病毒BMP2诱导其分化,联用重组腺病毒Sox9过表达Sox9信号,重组腺病毒GFP作为对照。Real-Time PCR检测成软骨标志物Ⅱ型胶原(Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)、X型胶原(Col10a1)表达变化;Alcian blue染色了解细胞基质糖胺聚糖合成情况;免疫组化和Western blotting检测Col2a1合成情况。结果 BMP2能诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化,当与Sox9联合作用时,Sox9可促进BMP2诱导的(Col2a1、Aggrecan、Col10a1)基因表达上调;促进细胞基质糖胺聚糖、Col2a1蛋白合成。结论 BMP2与Sox9联合作用可以促进体外培养MSCs成软骨分化,可能为组织工程软骨提供新的方法。

低氧诱导因子-1α对骨形态发生蛋白2诱导的干细胞成软骨、成骨分化的影响

目的探讨低氧通路中关键转录调控因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨形态发生蛋白2(bone morpho-genetic protein 2,BMP2)诱导干细胞骨、软骨分化的影响,阐明HIF-1α在干细胞成骨、软骨分化中的作用。方法构建相应腺病毒AdBMP2、AdHIF-1α、AdGFP,单独或共同感染干细胞,Western blot法检测成软骨、成骨分化关键转录调控因子Sox9、Runx2的表达,Real-time PCR法检测成软骨、成骨分化标志物COL2A1、aggrecan、COL1A1和ALP mRNA表达,Alcian blue、ALP及Alizarin red S染色检测软骨细胞外基质及骨基质钙盐沉积情况。进行干细胞裸鼠皮下移植,观察不同处理组形成骨块的组织结构情况,探讨HIF-1α对BMP2诱导干细胞成骨、软骨分化的影响。结果诱导分化后第1、3天,BMP2+HIF-1α组Sox9蛋白表达明显高于BMP2单独处理组,而BMP2+HIF-1α组Runx2蛋白表达明显低于BMP2单独处理组。诱导分化后第7、9天,BMP2+HIF-1α组COL2A1、aggrecan mRNA相对表达明显高于BMP2单独处理组(P<0.05),而BMP2+HIF-1α组COL1A1、ALP mRNA相对表达明显低于BMP2单独处理组(P<0.05)。Alcian blue染色发现BMP2+HIF-1α组软骨细胞外基质分泌多于BMP2单独处理组,染色更深;ALP染色发现BMP2+HIF-1α组ALP的活性弱于BMP2单独处理组;茜素红染色发现BMP2+HIF-1α组较BMP2单独处理组骨基质钙盐沉积更少;体内试验组织学观察见BMP2+HIF-1α组软骨成分更多,骨化不明显,BMP2单独处理组软骨成分少,软骨内骨化更明显。结论HIF-1α明显增强了BMP2诱导的干细胞成软骨分化,抑制了成骨分化及软骨内骨化,维持了软骨分化表型。

国家自然科学基金联合基金成果应用贯通的实践与思考

国家自然科学基金联合基金旨在发挥科学基金的导向作用,引导与整合社会资源投入基础研究,提升我国相关领域、行业、区域自主创新能力,推动区域和行业高质量发展。根据四个"面向"的战略部署,探索建立并不断完善科学基金成果应用贯通机制是引领科学研究不断向广度和深度进军的方法之一。本文分析了近年来联合基金的资助概况,介绍了国家自然科学基金委员会对科学基金成果贯通机制已进行的探索,分析了联合基金成果取得情况和联合基金成果贯通的特点,并进一步提出推动联合基金成果贯通的思考和建议,以期促进联合基金的成果应用贯通,解决我国相关领域、行业、区域的重大科学需求。

Smad7在Sox9增强BMP2成软骨效应中的作用

目的探讨Smad7在Sox9增强BMP2成软骨效应中的作用和机制。方法将小鼠骨髓间充质干细胞(C3H10T1/2)作为种子细胞,重组腺病毒Ad-BMP2和/或Ad-Sox9感染细胞,Ad-GFP感染细胞为对照。采用Real-time PCR、免疫细胞化学和Western blot分别检测感染后各组Smad7 mRNA表达水平和蛋白表达水平。采用Real-time PCR检测与Smad7相关因子MMP13与OPN mRNA的表达。结果 BMP2+Sox9组感染细胞7、11 d时,Smad7 mRNA和蛋白表达水平均明显低于BMP2组(P<0.05);免疫细胞化学染色结果显示,BMP2+Sox9组Smad7染色明显弱于BMP2组;同时BMP2+Sox9组中与软骨最终成熟因子OPN与MMP13的表达均低于BMP2组(P<0.05)。结论在BMP2诱导间充质干细胞成软骨分化中,高表达的Smad7可被Sox9抑制,并抑制Smad7相关因子MMP13与OPN表达,从而解除了Smad7对BMP2成软骨的抑制作用,阻止了软骨细胞最终成熟骨化,有利于保持软骨发育与正常状态。

CT图像和重组技术在骶椎临床影像解剖学研究中的应用

目的观察骶椎的解剖形态及其与耻骨联合的位置关系,为骶椎正位X线摄影体位的优化设计提供解剖学依据。方法回顾性随机收集1000例患者骨盆腔CT影像,借助CT图像重组技术观测骶椎的解剖形态及其与耻骨联合的相对位置关系。结果骶椎均为前面凹陷、底朝上、尖向下后方走行,骶椎上下端中点连线M与人躯体长轴之间的夹角A均为锐角,耻骨联合位于骶椎的前正中偏下位置,其与骶椎下缘的连线N和躯体长轴垂线间夹角B>0°(即耻骨联合上缘低于骶椎下缘的位置)占89.7%(897/1000);青少年组(14~45岁)角A为(35.86±6.88)°,明显低于中年组(46~69岁)(37.82±6.34)°和老年组(>69岁)(37.60±6.65)°(P<0.05),青少年组角B为(10.27±7.02)°,明显高于中年组(8.88±7.23)°和老年组(7.83±6.93)°(P<0.05),而中年组和老年组间差异均无统计学意义;男性角A(36.12±0.27)°和角B(6.27±0.25)°,均明显低于女性(38.03±0.33)°和(12.79±0.33)°(P<0.05)。结论CT图像重组技术可用于观察和分析骶椎的解剖形态及其与耻骨联合的位置关系,不同年龄段和不同性别者骶椎与耻骨联合的相对位置情况差异显著,可为骶椎正位X线摄影检查体位的优化设计提供可靠的解剖学依据。

重组腺病毒过表达Notch1受体胞内结合域(NICD1)外源性激活Notch信号通路

目的:构建Notch1受体胞内结合域(Notch1 intracellular domain,NICD1)的重组腺病毒AdNICD1,探讨外源性过表达AdNICD1对Notch信号通路激活的影响。方法:利用高保真PCR(high fidelity PCR,Hi-Fi PCR)扩增NICD1编码区,并通过Gibson Assembly方法将其克隆至腺病毒载体中,经过菌落PCR、测序鉴定后,在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,再次通过质粒PCR鉴定,然后运用PacⅠ酶切线性化后用重组腺病毒载体转染过表达pTP基因的人胚肾293细胞(human embryo kidney 293 cell line,HEK293)中进行包装,收取病毒后使用过表达pTP基因的HEK293细胞扩增重组腺病毒AdNICD1。运用AdNICD1感染脂肪来源的间充质干细胞(immortalized multipotent adipose-derived mesenchymal stem cells,iMAD),检测病毒感染效率;通过Q-PCR检测NICD1和Notch下游基因表达情况;利用Westernblot检测NICD1在蛋白水平的表达情况。结果:成功构建过表达NICD1的重组腺病毒并有效感染iMAD;利用AdNICD1可明显增加NICD1在基因和蛋白水平的表达,并激活Notch信号下游基因的表达。结论:成功构建过表达NICD1的重组腺病毒,并有效激活Notch信号通路。

Dkk1对骨形态发生蛋白9诱导间充质干细胞成骨分化的影响

目的:探讨经典Wnt信号通路胞外拮抗因子Dkk1对骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的影响。方法:以C3H10T1/2为目的细胞,通过重组腺病毒介导BMP9过表达,联用重组腺病毒Dkk1抑制经典Wnt信号通路。检测各处理组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性变化、钙盐沉积、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥素(osteopontin,OPN)变化;体内异位成骨实验分析Dkk1对BMP9诱导MSCs成骨分化的影响。结果:BMP9可诱导C3H10T1/2细胞成骨分化;Dkk1显著降低BMP9诱导的C3H10T1/2细胞ALP活性(F=1 467.21,P=0.000)、钙盐沉积、OC(F=32.95,P=0.000)和OPN(F=127.23,P=0.000)蛋白表达;异位成骨模型中Dkk1抑制BMP9诱导的C3H10T1/2成骨分化和骨块成熟。结论:Wnt信号通路胞外拮抗因子Dkk1可降低BMP9诱导的C3H10T1/2成骨分化,BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化可能需要经典的Wnt信号通路参与。

人工全髋关节置换术中髋臼骨缺损的研究进展

人工全髋关节置换术(Total hip arthroplasty, THA)被誉为20世纪最成功的手术之一,也是目前治疗髋关节疾病最有效方法之一。全美目前每年行初次THA约20~30万例,翻修4~5万例,估计到2030年,全美每年初次THA将达到57万例,翻修9.6万例[1]。 在THA术中,髋臼骨缺损的处理是临床骨科医师需要面临的一大挑战,也是能否获得良好的初始稳定性以及影响假体寿命的重要因素。术前对髋臼侧骨缺损进行精确评估及正确翻修假体足髋臼翻修重建成功的关键。本文就THA术中髋臼骨缺损的原因,分型和治疗方法做一综述,以期为临床治疗髋臼缺损提供一定的指导。

血栓弹力图评价关节置换术围手术期凝血功能改变

目的：利用血栓弹力图（thromboelastography,TEG）评价行髋膝关节置换术患者使用利伐沙班抗凝后的凝血功能改变,并分析与血小板计数的关系。方法：对2014年在我科行髋膝关节置换术的86例患者进行前瞻性研究。所有患者术后12 h开始使用10 mg利伐沙班抗凝治疗,并分别于术前、术后第1、3、5、7天行TEG及血小板计数检查。比较不同时间高凝患者比例及血小板计数的差异,并对二者进行相关性分析。结果：髋膝关节置换术后1~3 d及3~7 d高凝状态患者比例存在统计学差异,术后第7天高凝状态患者占86%,其中血小板高凝及混合性高凝患者占90.5%（maximal amplitude,MA〉70 mm）。术后第3天患者血小板计数平均值较术前降低（P=0.063）;而第3~7天血小板计数平均值逐渐增加,至第7天明显高于术前水平（P=0.000）。血小板计数与MA值呈正相关（r=0.508,P=0.000）。结论：TEG检测结果提示髋膝关节置换术后短时间使用利伐沙班不能有效降低高凝状态患者比例,且血小板数量的增加可能对高凝状态的形成发挥了重要作用。

初次人工膝关节表面置换术后留置引流与否的系统评价

目的:系统评价初次人工膝关节表面置换术(total knee arthroplasty,TKA)后放置与不放置引流的临床疗效及并发症情况,为临床实践提供参考。方法:按照系统评价的要求全面检索MEDLINE、EMBASE、Cochrane Library以及CNKI,收集筛选初次TKA术后留置与不留置引流的前瞻性随机对照研究(randomized controlled trils,RCTs),采用CONSORT的22条标准对文献质量进行评分,并应用RevMan Version 5.0软件对数据进行Meta分析。分析结果显示有异质性存在时,依据手术侧别及止血带放气时机进行亚组分析。结果:共纳入16项随机对照研究,共计1 417例膝(引流组713例,无引流组704例)。在软组织瘀斑发生率方面,引流组明显优于无引流组且亚组分析显示一期双膝关节置换时,此差异更加明显;在失血情况方面,无引流组的总失血量及输血率则明显低于引流组;最后,2组的感染、深静脉血栓(deep venous thrombosis,DVT)发生率及关节活动度的差异均无统计学意义。结论:现有的RCTs结果显示,初次TKA术后留置引流并不能显著降低感染及DVT的发生率和增加关节活动度,反而会增加患者总失血量和输血率,其唯一的优势在于可减少术后软组织瘀斑发生率。

加速康复下机器人辅助全髋关节置换术与传统全髋关节置换术的早期临床效果比较

目的:比较机器人辅助全髋关节置换术(rTHA)与传统全髋关节置换术(mTHA)的早期临床疗效,评估在加速康复原则下rTHA对患者术后康复的影响。方法:前瞻性分析2020年5月至2020年9月共计46例因继发性/原发性髋骨关节炎、股骨头缺血坏死或者发育性髋关节发育不良(CroweⅠ型和CroweⅡ型)、行初次全髋关节置换术患者的临床资料,其中24例接受rTHA,22例接受mTHA。所有患者都按照本中心加速康复外科(ERAS)方案进行管理。观察并记录患者手术前后的Harris髋关节评分、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)和疼痛模拟评分(VAS)用于评估围手术期和短期随访(12周)中的预后情况。同时记录患者的手术时间、住院时间、失血量(包括隐性失血量和显性失血量)、炎症因子、营养标志物、术前和术后影像学资料。结果:mTHA组1例患者在术后48 h内发生一次脱位,其余患者在术后12周内均未发生脱位。r THA组的手术时间明显长于mTHA组(P<0.01),rTHA组术后第6周Harris髋关节评分明显高于mTHA组(P<0.01),r THA组的髋臼杯前倾角与mTHA相比差异有统计学意义(P<0.01),rTHA组和m THA组的髋臼杯位置位于“Lewinnek安全区”内的概率分别为95.8%和50.0%(P<0.01)。两组患者VAS评分、髋臼杯外展角、炎症指标、营养指标、失血量、住院时间比较,差异均无统计学意义。结论:机器人辅助全髋关节置换术使髋臼假体位置更加精准。尽管rTHA较mTHA手术时间更长,但并不会影响患者的早期快速康复,仍需要对患者进行长期的术后随访以进一步讨论髋关节的功能情况及并发症发生率。

骨质疏松性髋臼骨折的治疗现状及进展

骨质疏松性髋臼骨折的治疗因为较高的失败率和较差的预后已成为骨科医生困扰已久的话题。骨质疏松性髋臼骨折的临床特点是骨折的类型复杂,粉碎严重。其治疗主要包括非手术治疗、微创和标准切开复位内固定、髋关节置换。成功的预后取决于经验丰富的团队根据患者的骨折特点和功能性需求采取高度个体化的治疗。本文就骨质疏松性髋臼骨折的治疗现状及进展进行综述,旨在为更好地治疗本病提供参考。

骨科3D打印技术临床应用指南

3D打印技术是一种以数字模型文件为基础,以数字技术材料打印机为载体,采用金属、塑料、细胞、组织等特殊材料通过逐层打印的方式构造实体的技术。在医学领域中具有广阔的应用前景。随着3D打印技术、材料学和医工交互的不断融合,3D打印技术在骨科领域的应用逐渐向个性化、精准化和微创化发展,已涵盖骨科疾病诊断和治疗的各个方面。然而,3D打印技术在骨科临床中的应用尚缺乏指南。经中华医学会骨科学分会、中国医师协会骨科医师分会和中国中西医结合医师协会骨伤科医师分会组织专家共同讨论,基于Delphi法问卷调查的形式制订了《骨科3D打印技术临床应用指南》。指南详细阐述了骨科3D打印的医工交互、骨科3D打印技术实施以及3D打印技术在创伤、关节、脊柱和骨肿瘤领域的临床应用,最终形成17条推荐意见。指南旨在提高3D打印技术在骨科临床应用的规范化与标准化。

多学科协作的骨科加速康复外科的创新与应用

随着人口老龄化加剧,老年髋膝关节置换患者逐年增多.髋和膝关节置换的患者年龄大于65岁的分别占64.4%和70.9%,其中多科合并症的患者占比81.5%.老年髋膝关节置换患者围手术期风险大,出现并发症的几率高,甚至死亡,造成经济和社会负担.

国产多孔钽棒治疗早期股骨头缺血性坏死的临床疗效

目的探讨国产多孔钽棒治疗早期股骨头缺血性坏死（ANFH）的临床疗效。方法采用前瞻性研究分析2014年7月— 2015年12月应用国产多孔钽棒治疗的早期股骨头缺血性坏死患者18例（19髋），其中男14例，女4例；年龄30～62岁，平均44.2岁。根据改良Ficat分期：Ⅱa期4例，Ⅱb期14例。疗效评估包括术前及术后3，6，12个月患髋的Harris评分、Womac评分、股骨头生存率、影像学变化、术后并发症、骨与钽棒界面情况。结果患者均获随访8～24个月，平均16个月。末次随访未发现局部感染、切口不愈合、排异反应、钽棒断裂、松动或移位等不良事件。术后3，6，12个月Harris评分[（82.7±9.0）分、（84.5±10.8）分、（87.2±10.0）分]较术前[（75.5±11.9）分]均明显升高（P〈0.05），末次随访髋关节Harris评分：优10髋，良3髋，可5髋，差1髋，优良率68%。术后3，6，12个月Womac评分[（17.4±9.4）分、（12.4±7.3）分、（11.1±8.4）分]较术前[（28.3±13.1）分]均明显下降（P〈0.05）。影像学结果显示，17例（18髋）股骨头坏死无明显加重，股骨头生存率为95%（18/19）。其中1例因疼痛加重、股骨头塌陷，最终行人工关节置换。置换术后患髋股骨头大体标本可见钽棒与周围骨组织紧密结合，硬组织切片显示新生骨组织已长入材料的孔隙。结论国产多孔钽棒治疗早期股骨头缺血性坏死，能促进骨长入，有效缓解疼痛，防止股骨头塌陷，延缓人工髋关节置换时间，改善髋关节功能。

机器人辅助与传统方法行全髋关节置换术后偏心距和旋转中心差异比较

目的比较机器人辅助与传统手工方法行全髋关节置换术(THA)术后偏心距和旋转中心的差异。方法选取2020年5至9月在重庆医科大学附属第一医院分别采用机器人辅助和手工方法行THA的患者为研究对象,其中机器人辅助THA(rTHA)患者27例(28髋),手工THA(mTHA)患者29例(31髋)。rTHA组男16例,女11例,年龄(59±13)岁;mTHA组男18例,女11例,年龄(63±14)岁。分别记录两组患者的性别、年龄、体质指数、诊断、功能评分等数据。rTHA组采用Mako机器人通过术前设计、术中定位和实时导航辅助完成THA,mTHA组通过模板进行术前设计,常规完成THA。记录两组患者手术时间和术后功能评分;分别测量两组术前和术后股骨偏心距、髋臼偏心距和总偏心距的长度;测量髋关节旋转中心在水平方向和垂直方向的移动情况;分析术中反馈总偏心距变化与术后测量偏心距变化的相关性。结果rTHA组手术时间长于mTHA组[(80±10)min比(58±18)min,P<0.001]。术后6个月随访rTHA组Harris评分为(94.9±2.8)分,略高于mTHA组的(93.1±2.8)分(P=0.017);rTHA组西安大略湖和麦克马斯特大学骨关节炎评分(WOMAC)为(7.0±3.8)分,与mTHA组[(7.1±2.4)分]相当(P=0.840)。rTHA组术前和术后总偏心距差异在5 mm以内者占71.4%(20/28),mTHA组为45.2%(14/31);rTHA组术前和术后总偏心距差异在5~10 mm者占28.6%(8/28),mTHA组为29.0%(9/31);rTHA组术前和术后总偏心距差异>10 mm者为0,mTHA组为25.8%(8/31),差异均有统计学意义(均P<0.05)。rTHA术中反馈总偏心距的变化与术后测量总偏心距的变化具有相关性(r=0.77,P<0.001)。两组旋转中心改变均主要集中在外上象限,rTHA组旋转中心的变化主要集中在10 mm的范围内,而mTHA组旋转中心变化更为分散。结论机器人辅助较传统手工THA可更精确地恢复偏心距和旋转中心,机器人术中反馈的偏心距可以作为参考。

AdEasy重组腺病毒系统对Ad-HIF1α的构建和鉴定

目的:采用AdEasy重组腺病毒系统构建重组腺病毒Ad-HIF1α并进行鉴定。方法:使用高保真PCR从EST克隆中扩增HIF1α基因编码区,并用限制性内切酶BamH I和Xba I对PCR片段限制性酶切,用T4 DNA连接酶将其连接至同样经BamH I和Xba I限制性酶切的穿梭载体pAdtrace-TO4,构建穿梭载体pAdtrace-HIF1α;将pAdtrace-HIF1α与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在细菌BJ5183中同源重组,得到重组腺病毒质粒pAd-HIF1α;pAd-HIF1α经Pac I酶切后转染至E1表达包装细胞系HEK293中进行HIF1α基因表达腺病毒包装,重复扩增,氯化铯密度梯度离心法纯化,获得高滴度Ad-HIF1α;感染干细胞株C3H10T1/2,通过荧光蛋白的表达了解其感染效率,并应用PCR及Western blot验证目的基因的表达,并通过检测下游靶基因VEGF的表达,了解该载体表达的目的蛋白的生物活性。结果:重组腺病毒质粒pAd-HIF1α,经PCR及酶切分析验证构建正确;在HEK293中进行HIF1α基因表达腺病毒包装,经反复冻融4次使细胞裂解,获得高滴度重组腺病毒载体;通过红色荧光蛋白(Red fluorescence protein,RFP)表达,观察到Ad-HIF1α能够高效感染C3H10T1/2细胞,并通过PCR证实了HIF1α在C3H10T1/2细胞较对照组明显高表达;在感染Ad-HIF1α的C3H10T1/2细胞中,HIF-1α下游靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达明显增高,证实表达的目的蛋白具有生物活性。结论:应用AdEasy重组腺病毒系统成功构建Ad-HIF1α,并证实其具有生物活性,为后续研究奠定了基础。

竞赛教学方式在膝关节穿刺临床技能教学中的实践

目的探讨竞赛教学在膝关节穿刺临床技能教学中的教学效果,提高学员的临床技能。方法将2020年9月进行膝关节穿刺临床技能学习的学员随机分为实验组(技能竞赛教学组)和对照组(传统教学组)。教学完成后1个月,通过随机抽签的方式选取90名学员进行考核,其中实验组39名、对照组51名,比较两组学员的技能教学效果。统计学分析采用t检验和卡方检验。结果实验组考核平均成绩为(84.18±7.21)分,对照组为(80.17±10.51)分,两组比较差异具有统计学意义(P=0.044);而对各分数段人数构成比进行分析,发现差异无统计学意义。结论竞赛教学法有助于提高学员的整体成绩,提升学员的临床技能。

三维空间法在股骨颈前倾角测量中的应用

目的 探讨数字化三维建模介导的三维空间法在股骨前倾角测量中的运用,为临床测量股骨颈前倾角提供高效方法.方法 健康志愿者10名,其中男5例,女5例;年龄18～60岁,平均43岁.行双侧股骨CT扫描,并将CT数据导入Mimics 17.0软件进行三维重建建模.以Murphy为原则分别采用传统Photoshop法和三维空间法测量股骨颈前倾角,比较两种方法所测的前倾角值和测量时间.结果 Photoshop法测得股骨前倾角为（17.0±4.2）°,三维空间测得股骨颈前倾角为（17.0±4.2）°（P＞0.05）;Photoshop法测量所需时间为（1 231.5±152.8）s,三维空间法测量所需时间为（590.0 ±37.2）s （P ＜0.01）.结论 三维空间法和传统Photoshop法测量股骨颈前倾角均能得到精确的前倾角值,但三维空间法可大大缩短测量时,提高测量效率.

抑制Runx2的表达增强BMP2诱导的干细胞成软骨分化

目的:利用腺病毒介导RNA干扰抑制成骨分化关键转录调控因子Runx2(Runt-related transcription factor 2)的表达,研究其对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成软骨分化的影响,并初步探讨相关机制。方法:利用腺病毒Ad-GFP、Ad-BMP2、Ad-SiRunx2感染C3H10T1/2细胞;共分4组:GFP组、BMP2组、BMP2+SiRunx2组和SiRunx2组。Alcian blue染色检测各组软骨细胞基质糖胺聚糖分泌;RTPCR检测Runx2、早期成软骨标志物(Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)及晚期成软骨标志物(Col10a1)mRNA表达水平;Western blot检测目的蛋白BMP2、Ⅱ型胶原(Col2a1)及X型胶原(Col10a1)的蛋白表达。结果:在BMP2诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化过程中,下调Runx2的表达可以增强Col2a1、Aggrecan及软骨细胞外基质糖胺聚糖的合成,抑制Col10a1的合成。结论:下调Runx2表达可以增强BMP2诱导间充质干细胞成软骨分化能力,并抑制软骨细胞的成熟和肥大。