N6-甲基腺苷修饰在帕金森病发病机制中的研究进展

帕金森病(Parkinson disease,PD)是最常见的神经退行性疾病之一,其主要病理学特点是多巴胺能神经元变性缺失和异常聚集的α突触核蛋白[1]。PD发生发展受到多种因素的影响,如老龄化、遗传及环境等因素[1-2]。目前,关于PD的致病机制尚未完全阐明,已发现多巴胺代谢失调、细胞自噬、凋亡、氧化应激及线粒体功能障碍可能是多巴胺能神经元变性缺失的最直接原因[3]。N6-甲基腺苷(N6-methylade-nosine,m6A)修饰是真核生物信使RNA(mRNA)最常见的表观遗传修饰之一[4]。近年来,关于m6A在PD发生发展中的作用逐渐受到重视。目前,m6A在PD发病机制中的作用主要表现在影响多巴胺能信号通路、多巴胺能神经元凋亡、氧化应激等方面。因此,我们对与PD相关的m6A研究现状做一综述,以期为PD的诊断和治疗提供新方向。

锰中毒小鼠黑质中m6A甲基化及其相关因子的表达研究

目的:研究锰中毒小鼠黑质中m6A甲基化及其相关因子表达的变化。方法:将28只成年清洁级雄性昆明小鼠按照随机数字表法分成4组:对照组、MnCl_(2)低剂量组、中剂量组、高剂量组;对照组腹腔注射等量无菌生理盐水,MnCl_(2)低、中、高剂量组分别腹腔注射10 mg/kg、20 mg/kg、30 mg/kg的MnCl_(2)溶液,1次/d,连续4周,每天观察动物一般情况并记录体重变化。各组于注射结束后3 d取黑质组织,免疫荧光法观察黑质多巴胺能神经元损伤情况,m6A甲基化试剂盒检测各组m6A甲基化修饰水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR法)实验检测m6A甲基化相关基因在对照组和MnCl_(2)高剂量组小鼠黑质中的mRNA表达水平。结果:与对照组相比,MnCl_(2)高剂量组小鼠体重降低,黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数减少,甲基化水平、m6A促甲基化基因METTL3、去甲基化基因ALKBH5及FTO mRNA表达水平升高(均P<0.05)。结论:m6A甲基化水平及甲基化相关因子METTL3、ALKBH5和FTO在锰中毒小鼠黑质中高表达,提示m6A甲基化可能在锰中毒中发挥作用。

非编码RNA在帕金森病发病机制中的研究进展

1帕金森病(PD)与非编码RNA(ncRNA)PD是不可逆的进展性神经变性病[1]。PD的分子发病机制涉及诸多生物学过程,如蛋白质降解、线粒体功能障碍、细胞自噬和凋亡等,提示PD发生进展是一个全面系统的过程[2]。ncRNA是一类不能翻译成蛋白质、可通过调节转录和翻译后修饰参与重要生物学过程的RNA分子[3]。常见的ncRNA主要包括长的非编码RNA(lncRNA)、环状RNA和微小RNA(miRNA)。目前,ncRNA在PD发病机制中的作用主要表现在影响细胞功能方面,包括影响α突触核蛋白(α-syn)形成、调控线粒体功能、调节多巴胺能神经元活性等;ncRNA在与PD相关的氧化应激、炎性反应以及细胞毒性等方面的认识还存在不足。

METTL3通过调节MAPK和NF-κB信号通路参与脂多糖诱导小鼠小胶质细胞的细胞炎症反应

目的探讨甲基转移酶3(METTL3)在神经炎症中的作用及可能机制。方法将培育的小鼠小胶质(BV-2)细胞随机分为4组:对照组、脂多糖(LPS)组、siCtrl+LPS组和siMETTL3+LPS组。利用CCK-8实验确定LPS的最佳作用浓度和细胞活性测定;q-PCR和Western blot法检测LPS诱导BV-2细胞中METTL3表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BV-2细胞培养液中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)炎症因子表达水平以及RNA m6A修饰水平。结果与对照组比较,LPS组BV-2细胞中METTL3表达水平和生物活性均升高,差异有统计学意义(P<0.01);与siCtrl+LPS组比较,下调METTL3可显著降低IL-6(P<0.05)和TNF-α(P<0.01)水平,抑制LPS导致的细胞凋亡(P<0.01)。此外,沉默METTL3可显著提高丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)以及核因子(NF-κB)的磷酸化水平(均P<0.01)。结论下调METTL3通过抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活从而抑制神经炎症的发生。