溶酶体相关膜蛋白3通过VEGF/AKT通路抑制PC-3细胞增殖、转移及血管生成

目的探索LAMP3对PC-3细胞增殖、迁移及血管生成的影响。方法Western blot(WB)及RT-PCR检测LAMP3在正常前列腺上皮细胞及前列腺癌骨转移细胞中的表达。构建稳定沉默LAMP3的PC-3细胞,分别使用CCK8、划痕试验、Transwell试验检测LAMP3对PC-3细胞增殖、迁移与侵袭的影响。通过ELISA及血管生成试验检测血管内皮生长因子VEGF、基质金属酶MMP9的表达及HUVEC细胞的血管生成,最后使用WB及RT-PCR检测VEGF、AKT/p-AKT的表达。结果LAMP3在前列腺癌细胞中的表达较正常前列腺上皮细胞明显升高,以PC-3细胞最明显(P<0.05)。沉默LAMP3能抑制PC-3细胞的增殖、迁移与侵袭能力,同时能抑制VEGF、MMP9的表达及PC-3细胞诱导的血管生成,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,LAMP3能下调PC-3细胞中VEGF、AKT/p-AKT的表达。结论LAMP3能通过调控VEGF/AKT通路影响PC-3细胞的增殖、转移和血管生成,LAMP3可能是前列腺癌骨转移的潜在治疗靶点之一。

自制一体成型式皮质骨生物型腰椎间融合器在腰椎后路椎间融合术中的中远期疗效

目的探讨自制一体成型式皮质骨生物型腰椎间融合器（FOCBLFC）在腰椎后路椎间融合术的中远期临床疗效,评价其替代金属或碳纤维腰椎椎间融合器在临床应用及在椎间融合方面的合理性及有效性。方法对获得3年以上随访的18例应用FOCBLFC行腰椎后路椎间融合术的腰椎退行性病变患者进行临床和影像学评估,分析其手术特点,并采用VAS及ODI评分评价其术后腰腿痛程度及社会、生活能力情况。同时对比手术后即刻及术后3-6年椎间隙高度、腰椎前凸Cobbs＇角变化及椎间融合情况。结果所有患者术后无明显手术相关并发症发生。术后1周及末次随访时,患者ODI及VAS评分均较术前明显降低（P〈0.05）,而末次随访时患者DI及VAS评分均较术后1周明显降低（P〈0.05）。术后2年均获得椎间隙坚强骨性融合,术后1周和末次随访时融合节段椎间隙高度均较术前增加（P〈0.05）,术前、术后1周及末次随访时融合节段前凸Cobbs＇角矫正角度差异无统计学意义（P〉0.05）。植入FOCBLFC最终逐渐被吸收替代,且没有患者出现移植物移位、内固定断裂、松脱现象。结论自制FOCBLFC与椎弓根钉棒系统相结合使用可以实现腰椎术后中远期稳定,改善和维持椎间隙高度及腰椎前凸曲度,有效实现与判断椎间融合,移植物相关并发症少见,临床效果满意,可替代金属或碳纤维等腰椎椎间融合器,在临床上推广应用。

白鲜碱通过Wnt/β-catenin信号通路抑制前列腺癌骨转移PC-3细胞的作用

目的探讨白鲜碱对人前列腺癌细胞上皮-间充质转化的抑制作用及其机制。方法培养人前列腺癌PC-3细胞,用白鲜碱处理PC-3细胞,通过MTS检测白鲜碱的半抑制浓度IC50及对PC-3细胞增殖的时间依赖性。细胞侵袭能力的检测采用Transwell实验;E-cadherin、vimentin、β-catenin和Snail蛋白表达水平的检测采用Western blot实验;使用Wnt通道激活剂(LiCl)和白鲜碱联合作用PC-3细胞后,通过Western blot实验检测Snail和E-cadherin的m RNA及蛋白表达。结果 Transwell实验结果表明,与对照组相比,白鲜碱作用PC-3细胞后侵袭能力下降(P<0.01)。PCR及Western blot的结果表明,白鲜碱作用PC-3细胞后E-cadherin的mRNA及蛋白表达升高,vimentin和Snail及细胞核中β-catenin mRNA及蛋白的表达降低(P<0.01)。与白鲜碱组比较,白鲜碱与Li Cl联合作用PC-3细胞后Snail mRNA及蛋白表达升高,E-cadherin mRNA及蛋白表达降低(P<0.01)。结论白鲜碱可能通过抑制Wnt/β-catenin/Snail信号通路而抑制PC-3细胞上皮-间充质转化。

高压氧治疗在骨科创伤患者中的应用研究

目的探讨高压氧治疗在骨科创伤患者中的应用。方法将我院收治的67例骨科创伤患者随机分为对照组32例和试验组35例。对照组采用创伤常规治疗,试验组在创伤常规治疗基础上加高压氧治疗,比较两组患者在临床疗效及治疗满意度方面的情况。结果两组患者在临床疗效方面试验组有效率为94.3%,明显高于对照组的78.1%,比较有统计学差异(P<0.05);两组患者在治疗满意度方面试验组满意率为91.4%,显著高于对照组的68.8%,比较有统计学差异(P<0.05)。结论高压氧治疗在骨科创伤患者中,能够显著增加创伤治疗的临床有效率,提高患者对治疗的满意度,进而减少患者痛苦、改善生活质量,值得临床选择。

股骨颈骨折临床路径应用于骨科本科生实习带教的效果研究

目的 探讨股骨颈骨折临床路径在骨科本科生实习带教的应用效果.方法 将在我科骨科临床实习的2008级本科临床医学专业80名学生随机分为两组,对股骨颈骨折病种分别采用临床路径教学（临床路径组）及传统教学（传统教学组）两种方法进行试点教学,对两组学生教学结束后进行理论及临床技能考核,同时对带教老师关于两组不同教学方法进行问卷调查.结果 临床路径教组学生的理论考试、临床技能操作和总成绩均明显高于传统教学组,差异具有统计学意义,（P＜0.01）.问卷调查反应临床路径教学方法更受带教老师的认同.结论 临床路径教学方法在股骨颈骨折病种临床实习教学中可明显提高教学效果,应用骨科临床实习带教中具有明显优势,值得推广应用.

TFAM重组腺病毒的构建及其对骨关节炎软骨细胞的保护作用

目的通过构建重组腺病毒载体,转染骨关节炎软骨细胞,探讨线粒体转录因子A(TFAM)保护软骨细胞退变的作用。方法构建TFAM重组腺病毒载体,并转染骨关节炎软骨细胞。分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹法检测转染后细胞中TFAM mRNA及蛋白的表达情况;鉴定转染后软骨细胞线粒体DNA拷贝数的变化。结果成功构建TFAM重组腺病毒,且体外转染率高;RT-PCR结果示细胞转染后MOI为500、1 000组TFAM mRNA的表达明显升高(P<0.01);Western印迹结果示转染后MOI为500、1 000两组TFAM蛋白表达均升高,其中MOI=1 000组表现最为明显(P<0.01);骨关节炎细胞组线粒体DNA的平均拷贝数为(389±117),而MOI=500组为(575±144),MOI=1 000组为(762±179),前者显著低于后两者(P<0.01)。结论转染TFAM重组腺病毒可正向增强其在软骨细胞中的表达,保持线粒体DNA结构的稳定性。

miR-21对绝经后骨质疏松骨髓间充质干细胞成骨能力影响的研究

目的 探讨miR-21对绝经后骨质疏松骨髓间充质干细胞（PMOP-hBMMSC）成骨能力影响.方法 分离培养正常人（H-hBMMSCs）和绝经后骨质疏松患者（PMOP-hBMMSCs）的骨髓间充质干细胞,并对两组细胞的成骨能力进行比较.转染上调PMOP-hBMMSCs中miR-21表达,观察分析其对成骨能力的影响.Real time RT-PCR和Western Blot比较miR-21在三组细胞间的表达差异,同时检测三组成骨标志性基因Runx2和Osterix的表达.结果 PMOP-hBMMSCs组中的miR-21表达水平、ALP的活性以及钙结节染色面积都高于PMOP组（P＜0.05）,与H-hBMMSCs正常对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;RT-PCR和Western Blot结果显示成骨诱导7d后,转染后高表达Runx2和Osterix mRNA和蛋白水平均高于PMOP组（P＜0.05,P＜0.01）,与H-hBMMSCs正常对照组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 转染miR-21后的PMOP-hBMMSCs成骨能力增强.

Orbic-3D导航引导经皮微创椎弓根钉结合椎体成形治疗老年胸腰椎压缩骨折

目的探讨实时术中Orbic-3D导航引导下经皮微创椎弓根钉内固定结合椎体成形治疗老年骨质疏松胸腰椎压缩骨折的手术特点及临床影像学效果。方法 2011年1月至2012年6月,对24例老年骨质疏松单节段胸腰椎压缩骨折采用实时术中Orbic-3D导航引导经皮微创椎弓根钉内固定结合椎体成形术治疗,其中男9例,女15例,年龄67～81岁。分析手术切口、手术时间、出血量、并发症、术后椎弓根钉位置、下地活动时间、住院时间、疼痛视觉模拟VAS评分及患者满意度、手术节段高度和畸形矫正维持情况等。结果手术切口长度(8.0±0.8)cm,手术时间(56.5±10.5)min,术中出血量(60.5±15.8)ml,无神经损伤等手术相关并发症。植入的96枚椎弓根钉术后CT复查均在椎弓根内,下地活动时间(2.1±0.5)d,平均随访时间14.5个月(6～24个月)。椎体高度压缩率及VAS评分术后与手术前相比有明显改善(P<0.01),末次随访与术后6个月比较维持稳定(P>0.05)。节段后凸Cobb角矫正度数术后至末次随访基本维持稳定(P>0.05)。末次随访患者满意度95.8%。所有患者随访过程X线检查无内固定松动。结论老年单节段骨质疏松胸腰椎骨折采用实时术中3D导航引导下经皮微创椎弓根钉结合椎体成形术治疗具有手术微创、安全性高、缩短术后下地活动时间、椎体高度恢复及后凸矫正明显,并能有效维持、临床效果良好、患者满意度高等效果,是治疗该类骨折的有效选择。

单侧与双侧椎弓根入路椎体成形术治疗高龄骨质疏松性椎体压缩骨折的临床疗效比较

目的探讨单侧与双侧椎弓根入路经皮穿刺椎体成形术治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折的临床疗效及价值。方法回顾分析2007年12月～2011年2月我院56例获得6个月以上随访的女性骨质疏松性单个椎体压缩性骨折的临床资料,其中采用单侧椎弓根入路经皮穿刺椎体成形术治疗30例,双侧椎弓根入路经皮穿刺椎体成形术治疗26例,比较2组患者手术时间、骨水泥填充量、X线照射次数及术后VAS评分。结果单侧组手术时间(25±6)min显著少于双侧组(45±5)min(t=-13.426,P=0.011)。单侧组骨水泥渗漏率10.0%(3/30),与双侧组3.8%(1/26)无显著差异(χ2=0.138,P=0.710)。单侧组术中X线曝光(10.5±2.5)次,显著少于双侧组(19.4±3.0)次(t=-12.110,P=0.000)。2组术后24 h、术后6、12个月VAS评分无统计学差异(P>0.05)。结论单侧与双侧椎弓根入路经皮穿刺椎体成形术治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折均能取得良好效果。单侧穿刺方法手术时间短,X线暴露次数少;双侧入路穿刺方法手术操作相对简单。

大鼠急性脊髓损伤动物模型的建立及影像学分析

目的建立一种大鼠急性脊髓损伤的动物模型,分析模型影像特征及诊断价值。方法 32只小鼠随机分为对照组(5只)和实验组(27只),对照组只暴露T9～11脊髓,实验组显露T9～11脊髓后采用钳夹法致伤。伤后行运动功能BMS评分,术后对模型均行脊柱X线片、CT、MRI检查。结果实验组后肢运动功能损伤均明显,BMS评分与对照组差异有显著性(P<0.01);X线片可见胸椎T9～11局部骨质缺失;CT可见损伤脊髓周围组织有异常信号,但边界不清;MRI可见实验组损伤的脊髓组织T2异常强化,范围清楚,局部渗出液积聚。结论钳夹损伤建立了可靠的脊髓损伤动物模型,MRI检查对大鼠的急性脊髓损伤具有很高的敏感性和准确性。

青年老年股骨颈骨折患者生物型全髋关节置换术的中期临床疗效

目的探讨生物全髋关节置换术治疗青年老年股骨颈骨折患者的中期临床疗效。方法回顾分析行髋关节置换手术并获得随访的85例年龄在65～74岁的青年老年股骨颈骨折患者的临床资料,其中33例患者行生物型全髋关节置换术,52例行双极人工股骨头置换术。结果全髋关节置换术组术后关节脱位率6.1%(2/33),股骨假体松动翻修率3.0%(1/33),聚乙烯髋臼杯磨损率3.0%(1/33),末次随访Harris评分平均91分,优良率为91.7%。双极人工股骨头置换术组术后关节脱位率5.8%(3/52),髋臼磨损率59.6%(31/52),其中3例(5.7%)翻修,股骨假体松动翻修率3.8%(2/52),末次随访Harris评分平均88分,优良率为80.7%。结论采用生物型全髋关节置换术治疗青年老年股骨颈骨折可提高青年老年人的生活质量,具有更好的临床疗效。

骨水泥型人工股骨头置换术后患者全身与股骨假体周围骨密度的变化

目的通过改良双能X线吸收法对骨水泥型人工股骨头置换术后患者的全身与股骨假体周围骨密度(BMD)变化的定量测定与分析,探讨假体周围和全身BMD变化的规律以及假体松动、不稳的相关因素。方法于术后1w、1、2、3、6、9个月、1、2、3年通过改良双能X线吸收法对37例年龄在65～80岁、因新鲜股骨颈骨折行骨水泥型人工股骨头置换术的患者全身BMD与股骨假体周围BMD变化进行3年的连续动态测量,其中股骨柄假体周围BMD按Gruen法分为7个兴趣区(R1-7)进行测量。然后将测得的各时相BMD值与术后1w进行比较分析。结果术后1年内股骨假体周围BMD变化总体呈下降趋势,较术后1w下降6.63%(P<0.05),而1～3年则下降速度减缓,但股骨假体周围BMD变化与全身BMD变化无明显相关关系(P>0.05)。术后1年内股骨假体周围BMD变化主要在Gruen1、7区最明显,其中术后9月内呈明显下降趋势,且主要集中在术后1～6个月内,Gruen1区术后3月与6月分别较术后1w下降18.88%和21.02%,Gruen7区术后3月与6月BMD分别较术后1w下降22.79%和25.29%。而Gruen4区BMD术后3个月BMD回升,1年后恢复正常(P>0.05)。结论 DEXA仍是目前监测髋关节置换术后假体周围骨密度变化简单有效的方法。骨水泥型人工股骨头置换术后假体周围骨质丢失主要发生在术后3～6个月内,且以Gruen1、7区最明显,其变化规律不但提示了术后早期负重功能锻炼以及早期防治股骨近端骨丢失、骨溶解的重要性,而且为术后早期假体松动或不稳定的评估、预测及进一步临床预防性治疗研究提供了良好的依据。

微创B-Twin椎间融合器治疗腰椎不稳的疗效分析

[目的]探讨后路小切口B-Twin椎间融合术治疗退行性腰椎不稳症的手术特点和临床疗效。[方法]收治退行性腰椎不稳症患者13例13间隙,其中L4、5节段不稳11例,L5S1节段不稳2例。患者均行后路小切口开放手术B-Twin椎间融合术,疗效评价采用日本矫形外科协会(JOA)下腰痛评分标准。[结果]所有患者术后均无感染、神经功能损伤及融合器脱落等并发症。随访时间12～23个月(平均16.2个月),13例患者术前JOA评分平均4.2分,随访结束时JOA评分平均14.4分,JOA评分术后改善率:优11例,良1例,可1例,差0例,优良率92.3%。13例患者椎间植骨均获得融合,平均植骨融合时间为19.8周。随访过程B-twin椎间融合器位置良好,椎间隙高度除有2例丢失外(<10%),其余的无明显改变。[结论]对于合并有轻度退行性腰椎不稳的腰椎间盘源性疾病患者使用后路小切口B-Twin可膨胀性椎间融合器联合大量自体颗粒骨植骨融合手术治疗具有创伤小、安全性高、植骨融合率高,且临床疗效可靠的优点,值得进一步探讨。

零切迹颈前路椎间融合器结合锁定钢板治疗多节段脊髓型颈椎病的疗效

目的探讨零切迹颈前路椎间融合器(ACIFC)结合锁定钢板治疗多节段脊髓型颈椎病(MCSM)的手术特点和近期临床疗效。方法采用新型ACIFC行椎间盘切除椎间融合(anterior cervical discectomy and fusion,ACDF)术结合单椎体次全切除减压植骨融合长节段钢板内固定术(ACCF)治疗MCSM患者25例,分析手术特点及术后并发症,对比手术前后JOA评分,融合节段Cobbs角变化和判断术后稳定性、融合率情况。结果 25例患者术后随访12～33个月,平均(22.5±6.5)个月,术后吞咽困难发生率8%。术后1、6个月及末次随访JOA评分较术前不断提高(P<0.01),末次随访JOA评分优良率为84%。术后1周和末次随访与术前相比融合节段Cobbs角度明显改善(P<0.01),术后1周与末次随访比较无明显Cobbs角度丢失(P>0.05),随访过程中未发现融合器、钢板、螺钉移位,末次随访颈椎X线及CT检查判断ACIFC行ACDF融合率为71%,单椎体ACCF融合率为100%。结论零切迹ACIFC结合锁定钢板治疗MCSM可更多保留椎体结构、骨量及充分减压,同时避免前路长节段钢板的应用,减少手术创伤及术后并发症,并保证手术节段术后稳定性及融合率,近期临床疗效满意。

导航精确定位下经皮注入骨水泥椎体成形的特点

椎体骨质疏松压缩性骨折26例(31个椎体)应用导航技术行经皮椎体后凸成形术注入骨水泥,观察导航精确定位下骨水泥注入后的生物相容性反应。计算Beck值和Cobb值及手术前后目测类比评分的变化。结果表明,31个椎体注入骨水泥后椎体成形,无骨水泥向椎体前方和侧方渗漏,无椎体后方(椎管内)渗漏。无术中死亡及心脑血管系统急性不良反应发生,无脊髓和神经根急性损伤等副作用。术后疼痛减轻。可见导航技术定位准确,行经皮椎体后凸成形术注入骨水泥可行。

可注射骨水泥椎弓根钉内固定术治疗伴骨质疏松的多节段腰椎管狭窄症的疗效

目的探讨可注射骨水泥椎弓根钉内固定术治疗伴骨质疏松的多节段腰椎管狭窄症的疗效。方法回顾性队列研究2013年1月至2017年5月我院采用后路单纯腰椎管减压椎弓根钉内固定术治疗的60例伴骨质疏松的多节段腰椎管狭窄症患者,将30例应用可注射骨水泥强化椎弓根钉设为观察组,30例应用常规椎弓根钉设为对照组,均随访2年以上。比较两组病例手术时间、术中和术后出血量、手术并发症及内固定螺钉松脱率情况;比较术前、术后6个月及末次随访时行VAS评分、ODI指数评价临床疗效。结果观察组手术时间比对照组手术时间多,差异具有统计学意义(P<0.01),两组术中、术后出血量差异无统计学意义(P>0.05)。两组病例术后6个月、末次随访的VAS评分和ODI指数均较术前改善,差异具有统计学意义(P<0.05),而两组间各时段的VAS评分和ODI指数对比无统计学差异(P>0.05);观察组中随访期间无螺钉松动,对照组中2例(6.7%,2/30)患者共发生4枚螺钉出现松动。结论对于伴骨质疏松的多节段腰椎管狭窄症的手术治疗时,可注射骨水泥椎弓根具有更好的固定作用,但增加手术时间,建议在病情条件允许时实行可注射骨水泥椎弓根钉技术。

FG、D-二聚体测定结合WELLS评分对预测下肢深静脉栓塞价值的临床研究

摘要目的探讨用FG、D-二聚体测定结合危险性评估（WELLS评分分组）的方法预测下肢深静脉栓塞可行性。方法2005年8月1日～2006年8月1日骨科住院病人64例，已排除合并有对DVT有肯定影响因素的患者。术后当天根据下肢深静脉栓塞危险度评分表（wells评分表）进行评分分组：低危组：分值〈1；危险组：1≤分值≤2；高危组：2〈分值。术后当天，抽静脉血进行相关实验室指标检测，包括PT（凝血酶原时间）、APTT（部分活化凝血酶原时间）、FG（纤维蛋白原）、D二聚体、VWF（血管性血友病因子），记录结果。术后4～7天，彩色超声多普勒检查双下肢深静脉，记录结果。通过循证医学的方法验证、评价相关实验室测定指标结合wells评分对DVT的初步预测效果。结果通过循证医学评价方法得出：实验室指标结合wells评分对各组患者诊断价值的准确性评价结果分别为：64％、77％、92．5％。结论FG、D-二聚体测定结合wells评分可用于骨科术后DVT的早期预测。

线粒体转录因子A参与软骨细胞退变逆转的机制

目的初步探讨线粒体转录因子A(TFAM)参与软骨细胞退变逆转机制,以期阐明TFAM与骨关节炎发生、发展的关系。方法以含血清培养液培养分离的原代正常软骨细胞和骨关节炎(OA)软骨细胞,MTT检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡变化,并利用基因组学和定量PCR等技术分析膝关节OA患者、正常关节软骨细胞的线粒体DNA特征和TFAM表达的差异情况。结果 1MTT检测OA细胞组的增殖低于正常细胞组(P<0.01);2OA组细胞凋亡率为7.11%,而正常组为1.65%,IL-1β诱导后OA细胞凋亡率为35.13%,正常组有13.79%;3OA软骨细胞TFMA mRNA的表达量低于正常软骨细胞(P<0.05),且OA软骨细胞线粒体DNA的平均拷贝数显著降低(P<0.01);线性回归分析结果表明OA细胞和正常细胞中TFMA mRNA的表达量和线粒体DNA拷贝数之间均有相关性(P<0.05)。结论分离的原代OA软骨细胞符合软骨细胞退变,为其研究提供了较好的实验对象,其线粒体DNA拷贝数与调控其转录、复制的主要调节因子TFMA的表达有相关性。

生物型腰椎间融合器的研制及生物力学研究

目的:研究和开发一种新型的腰椎间融合器——生物型腰椎间融合器,并对该融合器进行生物力学测验。方法:融合器设计为用整块的异体皮质骨制成以保证其强度,融合器有特定形状和规格;从两具强壮壮年男性的新鲜尸体上截取四段股骨中上段,按设计制成融合器并冻干,然后利用瑞典进口的材料生物力学实验机,进行力学测验,测定融合器的压缩破坏力,并将结果与文献报道进行比较分析。结果:该组融合器的压缩破坏力为(10 040±1 805)N,和碳素纤维融合器比较差异无显著性(P﹥0.05),与髂骨块比较差异有显著性(P<0.05)。结论:生物型腰椎间融合器强度可以满足作为融合器的即刻支撑重建脊柱初期的稳定性的作用。

骨关节炎患者线粒体转录因子A表达与线粒体DNA拷贝数关系的研究

目的研究膝关节骨关节炎患者与正常人外周血及关节软骨细胞中的线粒体转录因子A(TFAM)表达和线粒体DNA拷贝数的关系,探讨其相关性。方法选择20例的膝关节骨关节炎患者为骨关节炎组,以正常关节软骨患者20例为对照组。各收集其外周血及关节软骨细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光PCR(SYBR GREEN I染料法)检测外周血及软骨组织中TFAM mRNA的表达水平和软骨细胞线粒体DNA拷贝数。结果骨关节炎组外周血和软骨细胞TFAM mRNA的表达量均低于正常组患者(P<0.05),且二者表达量呈正相关(P<0.01);骨关节炎组线粒体DNA的平均拷贝数均于正常组患者软骨细胞(P<0.01),且与软骨细胞TFAM mRNA的表达量呈正相关(P<0.01)。结论 TFAM通过增加其线粒体DNA拷贝数,这将可以对骨关节炎的病因提出新的解释和补充,可能为骨关节炎的检测和治疗提供新的途径。