基于中药系统鉴别法的金铁锁及其混淆品的精确鉴别

目的:建立金铁锁药材及其混淆品有效的鉴别方法,分析二者在显微特征、DNA信息特征等方面的差异,为精确鉴定金铁锁药材及其混淆品,以保障用药安全奠定基础。方法:采用中药系统鉴定,对金铁锁药材及其市售混淆品样本的显微特征及其ITS序列进行BLAST比对分析、ITS序列的特异位点差异分析,N-J系统发育树分析等,建立金铁锁及其混伪品的系统鉴定方法。结果:中药系统鉴定法的显微特征中,金铁锁正品药材中无草酸钙结晶,而其混淆品瓦草中具有大量的草酸钙簇晶分布,可作为其鉴定的重要依据之一;此外,金铁锁药材ITS序列与瓦草ITS序列差异明显,采用BLAST比对分析、N-J系统发育树分析等可将二者进一步精确鉴别。结论:采用中药系统鉴定法能够很好的对金铁锁及其混伪品进行精确的鉴别。

基于HMGR、SQS1、β-AS基因CNVs的甘草道地性机制研究

本文利用real-time PCR方法对不同产地甘草的3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)、鲨稀合成酶1(squalene synthetase 1,SQS1)、β-香树脂醇合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)基因的拷贝数进行了研究,发现不同产地的HMGR基因存在1～3个拷贝数变异,SQS1基因存在1～2个拷贝数变异,未发现β-AS基因拷贝数变异。甘草HMGR、SQS1、β-AS基因拷贝数存在5种自然组合类型:A型(2+1+1)、B型(1+1+1)、C型(3+2+1)、D型(2+2+1)和E型(3+1+1),其中内蒙古杭锦旗甘草存在A、B两种类型,A与B的比例为1∶1.3;内蒙古赤峰甘草也存在A、B两种类型,但A与B比例为3∶1;宁夏盐池甘草存在A、B、C、D 4种类型,A/B/C/D比例为1∶5.1∶1∶2,A/B比例为1∶5.1;甘肃民勤甘草存在A、B、E 3种类型,A/B/E比例为4.1∶2.1∶1,A/B比例为2∶1。本研究证明中药功能基因基因组拷贝数变异(copy number variations,CNVs)与产地具有相关性,可能是道地药材形成的机制之一。

基于NCBI核酸数据库的紫荆皮混淆品种华中五味子的DNA鉴定研究

目的:探讨利用NCBI核酸数据库中ITS序列鉴定紫荆皮商品药材,为保证紫荆皮药材质量提供依据。方法:从紫荆皮药材中提取DNA,以ITS序列通用引物进行PCR扩增,扩增产物经纯化后直接双向测序,利用ITS序列相似度和系统发育树进行鉴定。结果:获得了紫荆皮商品药材的ITS序列信息。结论:经DNA鉴定,发现市场上流通的紫荆皮主流商品来源于木兰科五味子属植物华中五味子,药用部位为茎皮。

一种中药精确鉴定方法——中药系统鉴定法

针对目前传统鉴定方法在中药鉴定过程中的不足(如多来源药材品种鉴定),结合分子鉴定的技术优势与特点,文章提出了一种较为精确的中药鉴定方法,中药系统鉴定法。文章介绍了中药系统鉴定法的概念、原理及方法,通过实例验证了该方法的可行性。中药系统鉴定法的提出,不仅从性状、显微、化学等"表型性状"方面揭示中药"种"的特征信息,还从其遗传物质DNA信息(基因型)的角度,更深层次的揭示"种"、"亚种"、"居群"等分类及演化关系等,为中药鉴定学科的深入发展,开拓了更广阔的研究领域。