枯草芽孢杆菌胞外囊泡的分离及其对巨噬细胞免疫功能的影响

益生菌产生的细胞外囊泡(Extracellular Vesicles,EVs)具有介导细菌-宿主间的相互交流、呈递细菌抗原和调节宿主免疫功能等作用。为了研究枯草芽孢杆菌(B.subtilis)来源的胞外囊泡(BS_EVs)对巨噬细胞免疫应答反应的影响,该试验通过超速离心和密度梯度离心法分离纯化了枯草芽孢杆菌来源的BS_EVs,并分别用6组不同浓度的BS_EVs和PBS(对照组)刺激小鼠巨噬细胞12 h。试验结束后,收集细胞培养上清液和细胞裂解液,测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和细胞因子分泌量、细胞裂解液中免疫相关酶活性。结果显示:(1)采用差速离心和梯度密度离心法成功从B.subtilis 168培养上清中获得纯化的BS_EVs;(2)在细胞试验中,低浓度处理组(1、2和4μg/mL BS_EVs)对细胞活性无显著影响(P>0.05),而高浓度处理组(8和16μg/mL BS_EVs)则显著降低了细胞活性(P<0.05);各处理组对免疫反应相关酶活和炎性细胞因子分泌量均有显著影响(P<0.05),其中高浓度处理组表现出更强烈的促炎作用。研究结果表明,适量BS_EVs可增强巨噬细胞免疫功能,揭示了肠道微生物与宿主相互作用的可能通路。