SOCS2对山羊鼻甲骨细胞增殖、周期及凋亡的影响

细胞因子信号转导抑制因子2 (suppressor of cytokine signaling 2,SOCS2)在动物体内参与调节多种生理和病理过程,如细胞凋亡、细胞增殖、细胞周期、肿瘤和炎症反应等。本研究在首次克隆山羊SOCS2基因的基础上,研究过表达和干扰SOCS2表达对山羊鼻甲骨细胞增殖、周期及凋亡的影响。以1周岁的健康简州大耳羊(6只)的心、肝、脾、肺、肾、瘤胃、大肠、小肠和山羊鼻甲骨细胞共9个样本为模板,采用反转录PCR技术克隆山羊SOCS2基因CDS区序列,并进行序列分析。利用RT-qPCR技术检测SOCS2基因在不同组织中的表达。将克隆得到的SOCS2基因CDS区连接载体构建真核表达载体pcDNA3.1-SOCS2。根据山羊SOCS2基因序列设计合成并筛选有效siRNA。利用Lipofectamine^(TM) 3000试剂将pcDNA3.1-SOCS2和siRNA片段分别转染至鼻甲骨细胞,采用蛋白免疫印迹技术检测SOCS2蛋白表达,MTT法检测SOCS2对细胞增殖的影响,流式细胞术检测SOCS2对细胞周期和凋亡的影响,并利用RT-qPCR技术检测细胞周期相关基因p21、CDK2和凋亡相关基因Caspase3、Caspase7、PARP1、p53、Bax、BCL2L11和Bcl-2的转录水平。结果显示,成功扩增山羊SOCS2基因序列,总长为1 065 bp, CDS区长为597 bp,编码198个氨基酸残基。SOCS2基因在肝中表达水平最高;SOCS2可以抑制细胞增殖。成功构建真核表达载体pcDNA3.1-SOCS2,且该基因在鼻甲骨细胞内成功表达。SOCS2过表达可导致G2/M+S期细胞数量显著增加,且下调CDK2和p21基因的mRNA表达;促进细胞凋亡,且上调Caspase3、Caspase7、Bax、p53、BCL2L11、Bcl-2基因的mRNA表达,PARP1表达水平无显著变化。而干扰SOCS2表达后,G0/G1期细胞数量显著升高,且CDK2和p21基因的mRNA表达上调;细胞凋亡被抑制,且Caspase3、Bax、p53、PARP1基因的mRNA表达下调,Caspase7、BCL2L11、Bcl-2基因表达水平无显著变化。综上所述,SOCS2可将细胞周期阻滞在G2/M+S期,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。研究结果为全面揭示山羊SOCS2功能提供试验数据。

钬激光治疗机不同功率在泌尿系膀胱结石碎石的安全有效性评价

探究钬激光治疗仪的不同功率在泌尿系膀胱结石碎石中的安全有效性。方法:选取3个月大活体猪2只,将与人体结石成分、硬度相近的石灰石通过猪的尿道置入猪膀胱,形成膀胱结石模型,分A、B两组进行试验,两组均由同一高年资医生实施钬激光碎石,比较两组碎石效果及组织安全性。A组:使用钬激光治疗机,型号为HZ-E,功率范围5-70W;B组:使用钬激光治疗机,型号为HZ-B,功率范围5-90W。结果:A组 15分钟内完成碎石操作,术中实验动物心电图、右耳末梢的血氧饱和度,不受碎石影响。肉眼下膀胱黏膜无溃疡、出血、穿孔,病理下轻度炎细胞浸润,未见粘膜灼伤等异常。B组8分钟内完成碎石操作,术中实验动物心电图、右耳末梢的血氧饱和度,不受碎石影响。肉眼下膀胱黏膜无溃疡、出血、穿孔,病理下轻度炎细胞浸润,未见粘膜灼伤等异常。结论:90W钬激光用于治疗膀胱结石是安全、有效的,与70W功率疗效相当,对组织损伤均较小,风险可控。90W钬激光可以有效缩短碎石时间,缩短术程,提高效率,值得在临床推广应用。

预后预测模型在临床非转移肾细胞癌中的应用价值

目的分析比较SSIGN、Leibovich、UISS 3种预后预测模型对临床非转移肾细胞癌患者预后的预测价值。方法对1999~2012年间行手术治疗的1 202例临床非转移肾细胞癌患者进行生存分析,并将其临床及病理参数带入SSIGN、Leibovich、UISS 3种肾细胞癌预后预测模型计算其预后危险度。通过计算3种预测模型的ROC曲线下面积(AUC),AUC在0.50~0.70为低区分度;在0.71~0.90之间为中等区分度;而>0.90则为高区分度。了解3种预测模型对不同分期、分级的临床非转移肾细胞癌的预测强度。结果 1 202例临床非转移肾细胞癌患者中局限性肾细胞癌1 030例,局部进展期肾细胞癌172例。所有患者中位随访时间为63.02月,其2年及5年总生存率分别为94.7%,87.6%,不同分期、分级患者5年生存率差异有统计学意义(P<0.05);UISS、SSIGN及Leibovich评分系统对于局限性肾细胞癌总生存的预测精度分别为0.667、0.785、0.758,而3种模型对于局部进展期肾细胞癌的预测精度均在0.6以下。结论 3种预测模型中SSIGN预后评分系统在本研究验证中有一定预测价值,但对于进展期肾细胞癌患者,现有预测模型区分价值有限。