磷脂酶A_2氨基末端衍生肽的合成及其抗细菌活性的研究

目的 探讨磷脂酶A_(2)(PLA_(2))氨基末端衍生肽的合成及抗菌活性。方法 根据PLA_(2)氨基末端氨基酸残基的顺序合成为多肽PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20),将其分别与2种细菌(大肠埃希菌、枯草杆菌)在特定条件下培养,并以生理盐水作为对照,分析抗菌活性。结果 与对照比较,多肽不同作用浓度时PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20)对革兰氏阳性枯草杆菌杀菌活性更强,各多肽间比较,差异有统计学意义(P<0.05);当多肽作用浓度为500μg/ml时,PLA_(2)N_(15)对革兰氏阳性枯草杆菌杀菌活性可达99.8%,高于PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(20),及对照(P<0.05)。与对照比较,各多肽不同作用浓度时对大肠埃希菌杀菌活性比较,差异有统计学意义(P<0.05);多肽作用浓度为7.81、125.00、500.00μg/ml时,PLA_(2)N_(15)的杀菌活性均高于PLA_(2)N_(11)和PLA_(2)N_(20),及对照(P<0.05);多肽作用浓度为31.25μg/ml时,PLA_(2)N_(15)的杀菌活性低于PLA_(2)N_(11)的杀菌活性,且高于PLA_(2)N_(20)的杀菌活性(P<0.05)。结论 多肽PLA_(2)N_(11)、PLA_(2)N_(15)、PLA_(2)N_(20)对枯草杆菌、大肠埃希菌有很强的杀菌作用。

p53途径在氯化两面针碱抑制SMMC-7721细胞增殖中的作用

目的研究氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)处理后p53通路的分子水平变化,以说明p53途径在NC抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖中的作用。方法应用MTT比色法测定NC对SMMC-7721细胞存活率的影响,细胞克隆集落形成实验测定NC对细胞增殖的抑制作用;实时荧光定量PCR检测不同剂量NC对p53、p21mRNA表达的影响;酶联免疫吸附法测定p53、p21蛋白含量的变化。结果 NC(0.15,0.30,0.60,1.20,2.40,4.80 mg.L-1)浓度依赖性地降低SMMC-7721的存活率,作用48 h时IC50值为(1.03±0.18)mg.L-1;NC可明显抑制细胞集落形成,剂量为0.15,0.30 mg.L-1时,抑制率分别是74.65%、88.48%,剂量为0.60 mg.L-1时,抑制率达到了100%;NC可明显提高癌细胞中p53、p21 mRNA和蛋白的表达,并呈浓度依赖性。结论 p53通路可能在NC诱导的SMMC-7721细胞增殖抑制中起重要作用。

某肿瘤医院2012～2013年度药品不良反应报告分析

目的分析肿瘤专科医院不良反应发生的特点和规律,为临床合理用药提供参考。方法我院2012-2013年发生并上报国家不良反应监测系统450例,对不良反应报表数据进行统计分析。结果 450例不良反应中,静脉滴注382例,占84.89%,抗肿瘤药引发的不良反应359例,占79.78%,不良反应累及最多的器官是骨髓系统,其次为胃肠道损害。结论应更加规范抗肿瘤药物的使用,做好肿瘤患者化疗前后的特殊护理,并严格监护患者化疗期间出现的不良反应,尽可能减少由不良反应给患者带来的危害。

某肿瘤医院1092份住院医嘱不合理用药分析

目的:通过对住院医嘱进行抽样调查,了解不合理用药情况,提高合理用药水平。方法:采用回顾性调查,抽查住院病历1092份,针对院内使用频率较高的6类药物进行合理用药分析,包括抗菌药、免疫调节剂、抗肿瘤药、中成药、消化系统药、镇痛药。结果:1092份住院病历中,不合理病历192份,不合理率17.58%。其中中成药、抗菌药和免疫调剂不合理率较高;主要是药物用法用量不合理和溶媒选择不合理,不合理率分别为48.43%和22.40%。结论:住院医嘱仍存在较多不合理用药现象,医院相关部门应加强合理用药的管理,重视处方点评工作,并做好合理用药的宣传和培训,保障患者用药的安全、有效和经济。

氯化两面针碱对肝癌细胞蛋白表达谱的影响研究

目的通过分析氯化两面针碱(NC)对体外培养肝癌细胞蛋白表达谱的影响,探讨其对肝癌细胞抑制的作用机制。方法应用蛋白芯片飞行时间质谱技术测定NC作用前后肝癌细胞蛋白的表达谱,在蛋白质专家网站(ExPASy)上进行比对,采用单因素方差分析比较不同组中相同质荷比的蛋白质含量,对处理前后的质谱变化进行配对t检验分析。结果采用NC处理人肝癌细胞SMMC-7721后,应用蛋白芯片飞行时间质谱技术共筛选出有统计学意义的差异表达蛋白质峰14个,这些差异蛋白主要跟细胞凋亡、细胞周期、信号转导、转录、DNA复制及修复、代谢、免疫等通路有关。结论氯化两面针碱对肝癌细胞的抑制作用,可能是通过免疫、代谢等多条通路综合作用的结果。

以会诊为基点的临床药学实践带教模式探讨

药学本科实习是重要的学习阶段,是药学生由课本理论到临床实践,由校园进入社会的重要纽带。因此临床药学实践带教是临床药学带教老师的重要工作之一。结合临床药学实际工作,以临床药师会诊的具体案例为基点,通过提前拟好教学大纲,列出教学重点、难点,灵活运用多种教学方法,将临床药学实践紧密贯穿其中,完成药学本科实习生的临床药学带教。这一带教模式,不仅能让学生较熟练地掌握临床药学实习的相关内容,且能充分锻炼实习生发现问题、解决问题的临床药学实践思维,同时也提高了临床药师队伍的带教水平和教学质量。

指导药学实习生开展TPN药学服务的模式

文章探讨在全肠外营养（TotalParenteralNutrition，TPN）药学服务中开展药学本科实习生的带教工作方法，培养实习生的TPN药学服务意识，为医院营养支持治疗培养合格的实用人才。

POLD1基因在原发性肝癌中的表达及其意义

目的:探讨DNA聚合酶δ催化亚基基因(DNApolymerase delta catalytic subunit gene1POLD1)及其编码蛋白p125在原发性肝癌中的表达及意义.方法:选用原发性肝癌患者手术切除标本20例,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法检测POLD1基因表达,同时分析POLD1基因产物p125蛋白与临床特征的相关性.结果:与癌旁组织相比,肝癌组织中POLD1基因表达明显升高(0.70±0.34vs0.37±0.23P<0.05);其编码蛋白p125表达与POLD1基因表达一致,在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织(0.63±0.19vs0.39±0.21,P<0.05).p125蛋白的阳性表达率与肿瘤大小和临床分期有关(P<0.05),而与HBV是否感染、性别及年龄无明显关系(P>0.05).结论:原发性肝癌与POLD1基因表达有关检测其蛋白产物p125有利于判断肝癌的恶性程度.

氯化两面针碱对肝癌细胞增殖的抑制作用及机制探讨

目的探讨氯化两面针碱(NC)对体外培养的肝癌SMMC-7721细胞(以下简称肝癌细胞)DNA聚合酶δ催化亚基基因P125蛋白的影响。方法取对数生长期的SMMC-7721肝癌细胞分为给药组和对照组,给药组分别予0.150、.300、.60 mg/L的NC作用10 d。采用集落形成试验观察SMMC-7721细胞的增殖抑制作用;Western blot法检测P125蛋白表达。结果与对照组相比,给药组NC作用后肝癌细胞集落形成数量明显减少(P<0.05),并呈现剂量依赖性。给药组P125蛋白表达明显降低,呈剂量依赖性。结论 NC可明显抑制肝癌细胞增殖,其作用机制之一可能是从蛋白水平抑制P125表达。

野生型p53对肝癌细胞POLD1基因表达及细胞恶性表型的影响

目的:探讨野生型p53对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖和细胞恶性表型影响的一种可能机制.方法:设计并构建p53特异性小干扰shRNA绿色荧光真核表达质粒(p53-siRNA)和表达EGFP-p53融合蛋白的p53绿色荧光真核增强表达质粒(pEGFP-p53),通过脂质体Lipofection-2000介导转染,将表达pEGFP-p53重组质粒、p53-siRNA及空载体pEGFP-C1转染入SMMC-7721细胞;经G418筛选,获得稳定细胞系7721-p53、7721-C1;7721-p53RNAi、7721-NC.通过RT-PCR检测转染后p53、POLD1mRNA表达水平.通过生长曲线测定,克隆形成实验,了解SMMC-7721细胞在p53表达水平改变后细胞癌性的变化.结果:与人肝癌细胞SMMC-7721比较,转染质粒pEGFP-p53的野生型p53高表达组,p53mRNA表达量增高,POLD1基因的表达量降低;而转染pGPU6/GFP/neo-p53i-769的p53低表达组,p53mRNA表达量降低,POLD1mRNA表达量增高,其他组较空白对照无明显变化.对高表达野生型p53的人肝癌细胞系SMMC-7721-pEGFP-C1-p53,低表达野生型p53的人肝癌细胞系SMMC-7721-pGPU6/GFP/neo-p53i-769,和普通人肝癌细胞SMMC-7721分别进行MTT和平板克隆形成实验.MTT结果发现:SMMC-7721-pGPU6/GFP/neo-p53i-769的细胞其生长速度比普通肝癌细胞的要快,而SMMC-7721-pEGFP-p53的细胞较普通肝癌细胞生长速度较慢.克隆形成实验结果显示:pEGFP-C1-p53、pGPU6/GFP/neo-p53i-769组克隆形成率分别为38.1%和72.6%,与普通肝癌细胞SMMC-7721的克隆形成率52.6%相比,均有统计学差异(P<0.05).结果显示:在人肝癌细胞SMMC-7721中,野生型p53高表达组能够抑制POLD1的基因转录,并抑制细胞增殖活性;而低表达组能够促进POLD1的基因转录,促进细胞增殖.结论:p53对POLD1的调控作用可能是p53对肝癌细胞增殖和细胞恶性表型影响的一种新的机制.

人突变型CDK4真核荧光表达质粒的构建及对人肝细胞SMMC-7702中POLD1基因表达的调控

目的:构建包含突变型CDK4基因的真核绿色荧光表达载体,作为POLD1基因依赖的细胞周期复制调控的模型,研究POLD1基因相关的癌性增殖的机制,为干预细胞恶性增殖提供新的思路.方法:设计人突变型CDK4基因全长特异性引物进行P C R扩增人肝癌细胞系SMMC-7721总cDNA,以pEGFP-C1质粒为模板连接,得到重组质粒GFP-CDK4后进行测序和生物信息学比对分析;转染细胞分3组:实验组(转染突变型CDK4重组真核表达质粒GFP-CDK4),阴性对照组(转染空载体pEGFP-C1组)和空白对照组(SMMC-7702).通过MTT试验分析细胞增殖变化;实时荧光定量PCR技术检测CDK4、POLD1及细胞周期相关因子的表达量,Western blot检测蛋白表达的差异.结果:成功构建了人突变型CDK4基因真核表达质粒GFP-CDK4,转染到肝细胞SMMC-7702后使细胞表达融合绿色荧光的C D K4蛋白;S M M C-7721细胞中突变型的C D K4存在5个碱基突变,4个碱基插入,2个碱基缺失,这使得5个氨基酸序列发生了改变;与空白对照组及阴性对照组相比,实验组细胞增殖明显升高(0.826±0.08vs0.596±0.06,0.609±0.10,F=7.033,均P<0.05);实验组CDK4mRNA表达水平差异明显(1.94±0.11vs1.01±0.00,1.05±0.12,F=54.046,P<0.01),POLD1mRNA相应地升高(2.47±0.25vs1.16±0.00,1.26±0.23,F=135.496,P<0.01);稳定转染细胞的蛋白水平变化趋势与基因相同,其中实验组CDK4(0.65±0.03vs0.41±0.03,0.39±0.05,F=14.665,均P<0.05),P125(0.54±0.04vs0.30±0.07,0.25±0.06,F=11.788,均P<0.05).结论:人突变型CDK4基因的真核表达载体GFP-CDK4显著促进肝细胞的增殖能力,这与POLD1基因及P125蛋白的高表达相关.

RNA干扰技术抑制人肝癌细胞POLD1基因表达的研究

目的应用RNA干扰技术抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因的表达,探索该技术干预肝癌的可行性。方法制备4个针对人POLD1基因的shRNA表达质粒,转染SMMC-7721细胞48 h后,荧光定量PCR法检测POLD1基因的表达,CCK-8检测细胞生长情况。结果测序鉴定证实4个shRNA表达质粒构建成功,将其转染SMMC-7721细胞后,NEO-POLD1-1和NEO-POLD1-4表达质粒抑制效果明显,使SMMC-7721细胞的增殖受到抑制,并且使POLD1基因表达在mRNA水平抑制,NEO-POLD1-1相对表达量为(0.1425±0.0205),NEO-POLD1-4相对表达量为(0.209±0.009)。结论针对POLD1基因设计的shRNA在体外有效地抑制了POLD1基因mRNA的表达和肝癌细胞的增殖,且实现RNA干扰具有序列选择性。

P53 shRNA对肝癌细胞增殖的影响

目的观察用RNA干扰(RNAi)下调SMMC-7721人肝癌细胞系P53表达后对细胞增殖及P21蛋白表达的影响。方法设计合成P53基因的短发夹RNA(shRNA),并构建pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA重组质粒。重组质粒转染SMMC-7721细胞,经G418抗性筛选获得阳性克隆。克隆形成实验观察细胞的增殖,RT-PCR法及Western blot法分别检测P53、P21的mRNA及蛋白表达。BALB/c裸鼠皮下注射SMMC-7721细胞,建立移植瘤模型,瘤部位多点注射pGPU6/GFP/Neo-P53 shRNA,观察瘤体积变化和瘤重。结果 P1、P2、P3 3条P53 shRNA均可明显降低P53mRNA水平(P<0.05,P<0.05,P<0.01);干扰P53表达明显升高SMMC-7721细胞克隆形成率(P<0.05),P21mRNA和蛋白的表达均随着P53的沉默而显著降低(P<0.05)。P53 shRNA明显增加裸鼠移植瘤的体积和重量(P<0.05)。结论 shRNA干扰P53基因可抑制P53和P21蛋白表达,使癌细胞恶性增殖。

重组质粒BFP-cyclin D1的构建及表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移能力的影响

目的构建含人cyclin D1基因全长编码区的蓝色真核荧光表达载体BFP-cyclin D1,并观察cyclin D1的表达对MCF-7增殖和迁移能力的影响。方法以人乳腺癌MCF-7细胞总RNA为模板,经PCR扩增和酶切后与pEBFP-N1质粒连接,得到重组质粒BFP-cyclin D1。转染到人乳腺癌MCF-7细胞后分为3组:实验组转染BFP-cyclin D1,阴性对照组转染pEBFP-N1;空白对照组为MCF-7,以荧光定量PCR检测基因表达;MTT实验检测细胞生长速度;细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果成功构建了BFP-cyclin D1,并在人乳腺癌MCF-7细胞中呈高表达,荧光定量PCR检测示实验组cyclin D1在转染后12h开始增高,48h达到高峰并持续高表达,与激光共聚焦显微镜观察实验组蓝色荧光表达量的趋势一致;MTT实验证实实验组细胞增殖速度(48、72、96h)显著高于对照组(P<0.01);细胞迁移实验表明实验组细胞迁移能力显著高于对照组细胞(P<0.01)。结论 cyclin D1的高表达促进了人乳腺癌MCF-7细胞的增殖和迁移,这可能与其缩短细胞周期、促进DNA合成和复制功能有关。

医改新政下医院药学实习的教学改革

本文简述了以“审方”为主导的医院药学实践教学新模式对比传统以药房发药为主的带教模式的教学效果,分析表明新模式提高了学生的实习积极性和解决问题的能力,培养了学生对未来工作的自信和岗位胜任力,学生实习收获增加,提出以“审方”为主导的医院药学实习教学改革迎合当前医院药学发展的趋势,有助于提高药学生的岗位适应能力,值得进一步深入探讨和研究。

某肿瘤专科医院碳青霉烯类抗菌药物的临床应用分析

目的了解碳青霉烯类抗菌药物在肿瘤专科医院的临床应用情况,分析和评价药物使用的合理性。方法回顾性分析2018年3月-2019年3月广西医科大学附属肿瘤医院住院患者使用碳青霉烯类抗菌药物的存档病历350份,评估碳青霉烯类抗菌药物的临床应用情况,评估其合理性。结果350份主要分布在重症医学科53份(15.14%)、血液及淋巴肿瘤内科48份(13.71%)、胃肠肿瘤外科39份(11.14%)等临床科室。亚胺培南西司他丁钠和比阿培南的药物利用指数(DUI)分别为1.50和1.03。碳青霉烯类抗菌药物临床应用评价中,适应证、品种选择及给药方案合理率均在90%以上,“使用抗菌药物前有病原学送检”和“及时请抗菌药物专家会诊”两个项目合理率相对较低。结论碳青霉烯类抗菌药物使用剂量基本合理,但专家会诊、微生物送检方面仍有不足,需进一步监督和管理。

急性肺损伤大鼠肺组织高迁移率族蛋白1的表达及其意义

目的动态观察高迁移率族蛋白1(HGMB1)在失血性休克复合内毒素注射致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织的表达情况,初步探讨HMGB1在ALI发病机制中的作用。方法采取失血性休克复合内毒素注射手段建立ALI大鼠动物模型,采用RT-PCR方法,检测肺组织HMGB1mRNA的表达情况。结果正常大鼠肺组织有少量HMGB1mRNA表达,遭受失血性休克复合内毒素注射打击后,HMGB1mRNA表达迅速升高,至ALI 24h达最高峰,随后有所下降,ALI各组大鼠表达水平与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论正常大鼠肺组织有一定水平HMGB1mRNA的表达,遭受失血性休克及内毒素注射打击后,HMGB1mRNA表达异常增高,可引起过度炎症反应,从而促进ALI的发生与发展。

P21对胃癌细胞MGC-803的增殖抑制及对POLD1基因表达的调控

目的:研究P21对POLD1基因的调控通路,以探索阻断癌细胞恶性增殖的机制.方法:实验主要分3组:阴性对照组(转染空载体pXJ41-neo的803-pXJ细胞)、空白对照组(胃癌细胞MGC-803)、实验组(转染P21重组真核表达质粒pXJ41-p21的803-p21细胞).MTT实验分析细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR技术检测基因表达水平的变化,Westernblot分析蛋白表达差异.结果:MTT实验显示,与空白对照和阴性对照组相比,实验组细胞增殖受到明显抑制,凋亡率(%)增高(11.36±0.51vs7.39±0.17,7.69±0.47,F=85.338,均P<0.05).实验组P21mRNA表达水平显著提高(2.15±0.23vs1.05±0.11,1.00±0.00,F=59.054,均P<0.05),POLD1则显著下调(0.45±0.07vs1.09±0.13,1.00±0.00,F=49.907,均P<0.05);P21、P125蛋白表达变化与基因变化相一致.cyclinE、Rb1基因表达均上调,CDK2基因表达下调,c-myc基因表达则变化不大.结论:P21抑制了胃癌细胞的增殖、促进其凋亡,同时抑制了POLD1基因的表达,这种抑制作用可能通过CDK2、cyclinE、Rb1等细胞周期因子实现.

阳江核电周围环境饮用水中总α、总β水平调查

调查了阳江核电运行前后其周围饮用水总α、总β水平,并与对照点饮用水的放射性水平进行了比较。结果表明,阳江核电周围饮用水总α、总β水平小于现行《生活饮用水卫生标准》中对水质放射性指标的指导值。核电运行前、后总α、总β水平相当,与对照点的监测值处于同一水平。

广东省台山核电站运行前(2016/06—2017/12)周围环境气溶胶总α、总β放射性水平监测

报道广东省台山核电站运行前(2016/06—2017/12)周围环境气溶胶中总α、总β放射性水平监测结果。监测结果表明,台山核电站外围10 km范围内3个监测点(气象站、钦头村、新松水库)环境气溶胶总α放射性水平为0. 01～0. 57 m Bq/m^3,总β为0. 07～2. 30 m Bq/m^3。