p44/42和p38 MAPKs在骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中发挥不同的功能

目的 观察p4 4 /42MAPK、p38MAPK通路在维生素C(VitC)、β 磷酸甘油 (β GP)诱导骨髓间充质干细胞 (BMSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。方法 用 [3 H] 甲基胸腺嘧啶掺入率法反映细胞增殖情况 ;测定碱性磷酸酶活性与钙沉积量反映细胞向成骨细胞分化状态 ;用Western blotting法反映MAPK的表达情况。结果 与溶剂对照组相比 ,在促成骨细胞分化剂VitC、β GP作用下 ,骨髓间充质干细胞 (BMSCs)p4 4 /42MAPK、p38MAPK通路均提前 5d激活。p4 4 /42MAPK通路阻断剂(PD980 5 9)明显减少 [3 H] 甲基胸腺嘧啶掺入率 ,抑制BMSCs的增殖 ;而p38MAPK通路的阻断剂(SB2 0 35 80 )则显著降低ALP活性及钙沉积量 ,抑制BMSCs向成骨细胞的分化。结论 p4 4 /42MAPK通路在BMSCs的增殖过程中起重要作用 ,而p38MAPK通路可能与BMSCs向成骨细胞分化调节有关。

植物雌激素金雀异黄酮通过p38MAPK通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化

目的研究丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPKs）的亚型p38 MAPK在植物雌激素金雀异黄酮（Genistein）促进小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells ,BMSCs）向成骨细胞分化过程中的作用.方法 BMSCs用无酚红α-MEM（含经活性碳吸附的10% FBS、β-磷酸甘油、维生素C）培养,先用Genistein处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,然后用SB203580（p38 MAPK通路阻断剂）以及PD98059（p44/42 MAPK通路阻断剂）阻断相应的通路后,再用Genistein处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,并同时观察上述处理后MAPK通路的变化.测定碱性磷酸酶（ALP）活性和钙（Ca）沉积量反映BMSCs向成骨细胞分化状况,用Western blot来检测MAPK通路是否激活.结果 Genistein（0.01,0.1,1 μmol·L-1）剂量依赖性增加小鼠BMSCs细胞内ALP活性和细胞外Ca沉积量,并同时引起p38MAPK通路的激活和p44/42MAPK通路的抑制.SB203580预处理能减弱Genistein刺激引起的p38MAPK通路的激活并同时阻止Genistein诱导的BMSCs向成骨细胞分化.结论 Genistein在0.01～1 μmol·L^-1剂量范围内可通过p38MAPK通路促进小鼠BMSCs向成骨细胞分化.

抗癫痫药遗传药理学研究进展

目的:综述抗癫痫药遗传药理学研究的最新进展。方法:对近年有关抗癫痫药的遗传药理学研究论文进行系统检索,总结研究成果,探讨可能进一步深入研究的方向。结果:近年来对抗癫痫药的遗传药理学进行了广泛的研究,发现了许多与癫痫发病有关及影响抗癫痫药治疗效果的基因变异。结论:个体差异影响着抗癫痫药的治疗效果。

CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与2型糖尿病易感性的meta分析

目的系统评价CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与2型糖尿病(T2DM)易感性的关系。方法制定原始文献的纳入、排除标准及检索策略,通过检索学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库及EMBASE、PubMed、ScienceDirect等数据库,收集有关CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与T2DM易感性的病例对照研究,以病例组与对照组CDKAL1基因rs7756992位点各种基因模型的比值比(OR)及其95%置信区间(CI)为效应指标进行meta分析,并根据研究人群种族不同进行亚组分析。结果本研究共纳入15篇文献,T2DM组和对照组病例数分别为24 315例和35 132例。Meta分析显示,CDKAL1基因rs7756992位点A>G多态性与T2DM易感性有关联[等位基因模式(G vs A):OR=1.171,95%CI1.122~1.223,P<0.001;共显性模式(GG vs AA):OR=1.380,95%CI1.258~1.515,P<0.001;共显性模式(AG vs AA):OR=1.131,95%CI 1.089~1.176,P<0.001;显性模式(AG+GG vs AA):OR=1.168,95%CI 1.101~1.240,P<0.001;隐性模式(GG vs AA+AG):OR=1.343,95%CI 1.282~1.405,P<0.001]。亚组分析显示,亚洲人群和白种人群中携带CDKAL1基因rs7756992位点G等位基因的人群发生T2DM的风险增加(P<0.05);而非洲人群中携带CDKAL1基因rs7756992位点G等位基因与A等位基因的人群发生T2DM风险的差异无统计学意义。结论在亚洲人群及白种人群中CDKAL1基因rs7756992位点A>G等位基因的突变可能是T2DM发病的危险因素之一。

急性淋巴细胞白血病患儿亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与甲氨蝶呤毒副反应的研究

目的:研究亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与甲氨蝶呤对急性淋巴细胞白血病患儿所致毒副反应的关系。方法:筛选急性淋巴细胞白血病患儿98例,运用PCR-RFLP方法分析亚甲基四氢叶酸还原酶基因型,分析此基因型与甲氨蝶呤临床毒副作用的关系。结果:携有突变基因型的患者甲氨蝶呤血药浓度高,发生毒副反应的风险大。结论:MTHFRC677T多态性与ALL患儿大剂量甲氨蝶呤化疗后的毒副作用有关,主要表现为胃肠道反应和骨髓抑制。

大剂量甲氨蝶呤治疗儿童急性淋巴细胞白血病排泄延迟分析

目的观察大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)治疗儿童急性淋巴细胞白血病排泄延迟的发生率,探讨MTX排泄延迟与不良反应的关系。方法筛选101例ALL患儿,对其应用HD-MTX化疗的临床资料进行统计,对MTX排泄延迟及其不良反应加以分析。结果总体排泄延迟发生率为19.77%,两个剂量组排泄延迟发生率无显著性差异。发生排泄延迟的患儿MTX不良反应发生率较高,需增加甲酰四氢叶酸钙解救。结论MTX排泄延迟可增加其不良反应,临床应调整解救方案保证用药安全。

美罗培南致血浆丙戊酸钠浓度异常1例

1病例简介 患者,男,4岁4个月。因发热3 d、抽搐4次入院。患儿3 d前出现发热,至当地医院行输液治疗,输液中出现抽搐,发作时呈双眼上翻,四肢抖动,口吐白沫，面色发绀，最长持续约15min自行缓解，遂送我院急诊，给予相关对症支持治疗后仍见抽搐发作，为进一步治疗转入我院神经内科。

HPLC法测定抗601合剂中绿原酸的含量

目的建立抗601合剂中金银花有效成分绿原酸含量测定的方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Hy-persil ODS(4.0 mm×125 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(15∶85∶0.5),流速1.0 ml.min-1,检测波长为327 nm,柱温27℃。供试品溶液加50%甲醇-水溶液,超声震荡,取上清液。结果绿原酸进样浓度在0.2～2μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.3%,RSD为0.79%(n=6)。结论所用方法准确、简便可行、重现性好,可作为抗601合剂的质量控制方法。

二苯乙烯苷对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的防治作用

目的探讨二苯乙烯苷对载脂蛋白E(Apo E)敲除小鼠动脉粥样硬化的防治作用及其机制。方法 Apo E敲除小鼠24只,随机分为正常对照组、模型对照组(高脂饲料)和治疗组(二苯乙烯苷20 mg·kg-1灌胃给药,每天1次),每组8只。通过主动脉和心脏主动脉窦冰冻切片油红O染色,观察二苯乙烯苷对Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的作用;Western blotting方法检测二苯乙烯苷对C反应蛋白(CRP)诱导的人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)蛋白表达的影响。结果正常对照组主动脉未见明显的斑块沉积,模型对照组呈现红色着色和点状脂质条纹沉积;与模型对照组比较,治疗组血管脂质沉积减少,心脏主动脉窦粥样斑块面积减小。二苯乙烯苷可降低CRP诱导的LOX-1蛋白表达。结论二苯乙烯苷可能通过抑制LOX-1的蛋白表达,减少Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块形成。

香丹注射液对家兔血小板聚集功能的影响

目的研究香丹注射液对血小板聚集功能的影响。方法进行体内、体外试验,观察香丹注射液对不同诱导剂诱导的家兔血小板聚集率的影响。结果香丹注射液体内能抑制二磷酸腺苷(ADP)、血小板活化因子(PAF)诱导的血小板聚集;体外试验对ADP、PAF诱导的血小板聚集亦有抑制作用,半数抑制浓度(IC50)分别为76.73 mg mL-1、89.21 mg mL-1。结论香丹注射液具有抑制血小板聚集的作用。

GSTT1、GSTM1基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病早期治疗反应及化疗不良反应的关系

目的:研究谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)家族中GSTT1、GSTM1基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)早期治疗反应和化疗不良反应的关系。方法:筛选ALL患者98例,采用多重PCR技术分析GSTT1、GSTM1基因型,比较不同基因型患者早期治疗反应和发生化疗毒副作用的差异。结果:GSTT1基因缺失型患者早期治疗反应较GSTT1基因非缺失型患者好(OR=3.35,95%CI:1.05～10.73,P=0.041),GSTT1和GSTM1基因双非缺失型患者发生早期治疗反应差的风险明显高于GSTT1和GSTM1任一基因缺失型及双缺失型(OR=5.73,95%CI:1.73～18.95,P=0.004)。GSTM1基因缺失型患者发生口腔黏膜炎、肝功能异常及感染的风险高于GSTM1基因非缺失型患者(P<0.05),GSTT1和GSTM1基因双缺失型患者发生肝功能异常及感染的风险明显高于两基因非双缺失型患者(P<0.05)。结论:GSTT1和GSTM1基因型与ALL患者早期治疗反应及化疗不良反应发生率相关,GSTT1和GSTM1基因型有助于指导ALL患者个体化治疗方案的制定。

大孔吸附树脂精制呼吸通提取液的工艺研究

目的制定大孔吸附树脂精制呼吸通提取液的最佳工艺。方法采用L9(34)正交设计,以HPLC法测定其中黄芩苷的吸附、解析率为指标,分别考察动态吸附中药液浓度、树脂量、流速对吸附的影响;解析液浓度、体积、流速3个因素对解析的影响。结果吸附药液浓度为0.1 g生药/ml,树脂用量为2倍药材量,速度10 ml.min-1;解析液为70%乙醇,10倍药材量,流速10 ml.min-1,黄芩苷的解析率可达90%以上。结论大孔吸附树脂精制呼吸通提取液工艺简单、稳定、可控。

卡维地洛作为P-糖蛋白抑制剂的研究进展

卡维地洛是第三代β-受体拮抗剂,对于高血压和冠心病具有安全有效地舒张血管的作用。另外,它还具有强大的抗氧化性,在人血浆中的某些代谢产物的抗氧化性更强。这些性质使其能够治疗左室功能障碍和慢性心功能不全。文献报道卡维地洛可以逆转由P-糖蛋白介导的多药耐药现象(MDR),其逆转效果和维拉帕米相似,有望发展成为一种可应用于临床的P-糖蛋白抑制剂。本文综述了卡维地洛对于MDR的逆转活性,以及逆转MDR的机制方面的研究进展。

注射用帕米膦酸二钠的处方与工艺研究

目的确定注射用帕米膦酸二钠的制备处方及工艺。方法选择适宜赋形剂,进行处方筛选,对冻干工艺进行考察。结果以甘露醇为赋形剂,经过22 h的冻干过程,制得成形性好,质量可靠的注射用帕米膦酸二钠。结论注射用帕米膦酸二钠处方工艺可行。

高效液相色谱法测定西罗莫司血药浓度

目的：建立快速测定人全血中西罗莫司浓度的高效液相色谱方法。方法：色谱柱为Zorbax Eclipse XDB C18（4.6mm×150mm,5μm）;流动相为甲醇-乙腈-去离子水（50∶22∶28,v/v）;流速1.2mL.min-1;紫外检测波长278nm;柱温50℃。结果：西罗莫司浓度测定的线性范围为2.5~50.0μg.L-1,最低检测浓度为2.0μg.L-1,平均回收率为103.2%,日内RSD小于5%,日间RSD小于4%。结论：本方法简便、快速,定量准确,可用于西罗莫司临床药动学研究,也可用于西罗莫司常规血药浓度监测。

二甲双胍与二氯乙酸盐对MYCN扩增神经母细胞瘤BE-2C细胞的协同抗肿瘤作用

目的研究二甲双胍和二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)单独与联合应用,对MYCN扩增神经母细胞瘤BE-2C细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法CCK-8法检测二甲双胍与DCA单独或联用对BE-2C细胞增殖的抑制作用;采用葡萄糖和乳酸测定试剂盒,检测葡萄糖吸收量和乳酸生成量的变化;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot分析凋亡相关蛋白的表达变化。结果二甲双胍和DCA对BE-2C细胞增殖均具有明显的抑制作用,联用组的葡萄糖消耗和乳酸的产生量较二甲双胍单独用药组明显减少(P<0.01);联用组的细胞凋亡率较单独用药组均明显升高(P<0.01);联用组细胞的Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平较单用组均明显增加,而Bcl-2蛋白表达水平较单用组明显降低。结论二甲双胍联用DCA对MYCN扩增神经母细胞瘤BE-2C细胞具有协同抗肿瘤作用,且与减少二甲双胍引起的乳酸堆积和诱导肿瘤细胞发生凋亡有关。

药学专业硕士研究生《人类疾病动物模型》课程教学探讨

《人类疾病动物模型》是采用人为的方法在动物体内复制类似人类疾病的一门课程,在医学研究中十分重要。本项目先论证和完善《人类疾病动物模型》理论课的内容;其次进行验证性实验的教学内容及教学过程;最后提出设计性实验的范围及实施方案,评价教学效果。旨在强化相关教师的专业技能和培养药学硕士专业研究生的创新科研思维。

细胞色素P450酶2A6、2B6、2C9及2C19基因多态性对丙戊酸钠血药浓度的影响

目的探讨细胞色素P450酶2A6（CYP2A6）、286（CYP286）、2C9（CYP2C9）和2C19（CYP2C19）基因多态性对丙戊酸钠血药浓度的影响。方法选择单药服用丙戊酸钠的癫痫患儿131例，应用多重PCR方法对CYP2A6＊4基因多态性进行检测，应用PCR．连接酶检测反应技术对CYP286。6、CYP2C9＊2、CYP2C9＊3、CYP2C19＊2和CYP2C19＊3基因多态性进行检测，应用均相酶放大免疫分析法测定丙戊酸钠血药浓度，采用单因素方差分析方法或t检验进行统计学分析。结果患儿根据CYP2C9、CYP2C19基因型分为4组：G1组（CYP2C9和CYP2C19均为强代谢者）、G2组（CYP2C19中间代谢者）、G3组（CYP2C19弱代谢者）和G4（CYP2C9弱代谢者）；G3（3．70±0．95）、c4组（4．35±1．48）标准化血药浓度显著高于G1组（2．57±1．30，t=3．056、4．490，均P〈0．01）和G2组（2．76±1．19，t=2．827、4．462，均P〈0．01）；G3（19．46±5．20）、G4组（19．30±7．67）丙戊酸钠剂量（mg／d）显著低于G1组（24．10±6．97，t=2．359、2．297，均P〈0．05）。未发现突变型CYP2A6’4和CYP286’6对丙戊酸钠剂量和丙戊酸钠标准化血药浓度的影响。结论CYP2C9和CYP2C19基因多态性会影响丙戊酸钠血药浓度，弱代谢（G3和G4组）的患JIA]~用丙戊酸钠应适当减少剂量。

MTHFR基因多态性及单体型与大剂量甲氨蝶呤化疗毒性反应的相关性研究

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因多态性及其单体型与急性淋巴细胞白血病患儿大剂量甲氨蝶呤（HDMTX）化疗毒性反应的相关性。方法采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性方法对HDMTX化疗后出现毒性反应（n=61）和无毒性反应的患儿（n=36）MTHFR基因677C〉T、1298A〉C单核苷酸多态性（SNP）进行基因分型和单体型分析，并应用病例对照分析方法进行相关性研究。结果MTHFR677C〉T不同基因型在两组患儿中的分布频率差异无统计学意义（x2=4．609，P=0．100）。1298A〉C不同基因型在两组患儿中的分布频率差异有统计学意义（x2=10．192，P=0．006），1298C等位基因（AC＋CC基因型）携带者出现毒性反应的风险降低（OR=0．245，95％CI：0．099～0．607，P=0．002）。677C〉T与1298A〉C存在着强连锁不平衡（D’=0．895），CC单体型携带者出现毒性反应的风险降低（OR=O．338，95％C1：0．155～0．738，P=0．005），而TA单体型携带者出现毒性反应的风险增加（OR=1．907，95％C!：1．045～3．482，P=0．035）。结论MTHFR1298C等位基因及CC单体型可能是HDMTX毒性反应的保护因素，TA单体型可能是危险因素。