2015年某院临床分离的病原菌的分布及耐药性分析

目的分析2015年广东省中医院临床分离的病原菌的分布及其耐药谱,为临床抗菌药物的使用和医院感染的监控提供依据。方法总结分析2015年临床分离的病原菌的分布及耐药情况,并采用K-B纸片扩散法对主要的病原菌进行耐药性分析,数据统计采用SPSS19.0软件进行统计分析。结果 2015年共分离3 558株病原菌,其中革兰阴性杆菌检出2 617株,占73.6%;革兰阳性球菌检出941株,占26.4%。病原菌检出率高的病原菌前10位依序是大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌。革兰阴性杆菌对厄他培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦的耐药性较低,而鲍曼不动杆菌的耐药率普遍较高;革兰阳性球菌则对头孢曲松、头孢呋辛钠、青霉素G和克林霉素的耐药性较高,未发现对万古霉素、利奈唑胺、替加环素耐药的金黄色葡萄球菌和粪肠球菌。结论病原菌的分布及其耐药谱分析的结果对医院感染的监控和对指导临床改变抗菌药物的使用习惯以降低细菌的耐药性都有着积极的意义。

不同保存时间和反复冻融对人乳头瘤病毒DNA检测结果的影响

目的研究不同保存时间和反复冻融对宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒（HPV）DNA检测结果的影响。方法收集HPV载量在103 IU/mL、105 IU/mL、107 IU/mL 3个不同水平的标本各5个,混匀后分装,分别在室温下保存1-4周和-20℃保存并反复冻融1、5、10次后,通过实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测宫颈脱落细胞中HPV-DNA载量,与起始HPV-DNA载量进行比较分析。结果标本在室温保存4周,高、中、低3个载量水平HPV-DNA都无明显变化,差异无统计学意义（P〉0.05）。-20℃保存并反复冻融10次,高、中、低3个载量水平HPV-DNA也都无明显变化,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论适宜的细胞保存液能保持宫颈脱落细胞中HPV-DNA的稳定性,能满足临床检测、复查和标本保存的需要。

人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA在不同程度宫颈病变中的应用价值

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA水平在不同程度宫颈病变中的应用价值。方法选取2011年4月至2013年4月广东省中医院妇科门诊收治的HPV感染患者430例,将HPV-DNA阳性标本根据病理资料分为炎症组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组和宫颈癌组。用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组标本的HPV E6/E7mRNA水平,比较不同宫颈病变组间HPV-DNA病毒载量及HPV E6/E7mRNA阳性检出率的差异情况。结果随着宫颈病变程度增加,HPV-DNA病毒载量未呈现逐级递增的趋势,各病变组间的病毒载量两两比较差异无统计学意义(P>0.05);而HPV E6/E7mRNA阳性检出率则逐级递增,除炎症组与CINⅠ组的检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)之外,其余各组之间的检出率两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HPV E6/E7mRNA与宫颈病变程度有高度的相关性,可作为宫颈疾病筛查的重要检测指标。

惰性分离胶管保存标本对钾、钠、氯检测结果的影响

目的:研究惰性分离胶管采集和保存钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)标本的可行性。方法:随机选择患者标本40例,采用惰性分离胶管和干燥管(无抗凝)采集同一患者血液标本,待血液凝固后立即离心,各取出150μL血清到Eppendorf管(简称Ep管)冷冻保存;再分别于2,4,6,8,24h后从惰性分离胶管中取出150μL血清到Ep管中冷冻保存,检测并比较上述血清的K+、Na+、Cl-浓度。结果:惰性分离胶管和干燥管离心后0hK+、Na+、Cl-结果差异无统计学意义(P>0.05),惰性分离胶管的2,4,6,8,24hK+、Na+、Cl-检测结果与0hK+、Na+、Cl-检测结果差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:使用惰性分离胶管不会影响K+、Na+、Cl-的检测结果,且可以防止K+、Na+、Cl-浓度的改变,能有效保存这些标本。

临床生化检验的校准验证质量评价结果分析

目的通过对参加卫生部临床检验中心2008年全国校准验证室间质量评价结果进行分析,总结在临床生化、电解质定量检查的校准验证中的经验。方法按设备厂家说明进行校准,按照美国临床实验室改进修正案(CLIA′88)的标准,对检测的钙、磷、镁、葡萄糖、尿素、肌酐、总蛋白、清蛋白、三酰甘油等9个项目定量校准验证结果进行回归方程评价和百分差异评价。结果参加定量分析校准验证的9个项目中,1个项目线性评价为线性1,5个项目为线性2,3个项目为非线性;校准验证评价4个项目的结果为差异2,5个项目的评价结果为验证2。查找原因并更换设备光源后重复试验结果3个项目为线性1,6个为线性2,校准验证评价3个项目为验证1,6个项目为验证2。结论原校准验证质量存在不足,产生差异的主要因素是系统误差所致,经改善实验条件,完善校准方法后,校准验证实验结果满意。

血红蛋白和转铁蛋白在粪便隐血试验中的诊断价值

目的探讨血红蛋白(Hb)和转铁蛋白(TRF)在消化道出血性疾病筛查中的诊断价值。方法用蒸馏水稀释已知浓度的Hb液和TRF液,测定Hb、TRF以及Hb/TRF双联免疫胶体金法(胶体金试纸)的敏感范围。对87例临床标本进行三种试纸的临床检测,比较Hb和TRF的临床应用价值。结果Hb试纸对Hb的敏感范围为0.2～2000mg/L;TRF试纸对TRF的敏感范围为0.02～2000mg/L;Hb/TRF双联试纸的各区带敏感范围分别与单一试纸的敏感范围相同。87例临床标本中,Hb试纸检出阳性25例(28.7%),TRF试纸检出阳性36例(41.3%),Hb/TRF双联试纸检出阳性48例(55.2%)。结论Hb和TRF同时用于粪便隐血试验可以更好地筛检消化道出血性疾病。

两种糖化血红蛋白检测系统的方法学比对和偏倚评估

目的:对日立7170A和DREWDS5糖化血红蛋白分析仪这两种糖化血红蛋白检测方法进行方法学比对和偏倚评估,为实验室提供准确可靠的实验数据。方法:以日立7170A/为参考系统(X),以DREWDS5糖化血红蛋白分析仪为待比系统(Y)。依据美国临床实验室标准化协会EP9-A2文件要求,分别在上述两种检测系统中测定标本糖化血红蛋白浓度,记录检验结果,检查离群点,计算线性方程和相关系数和直线回归方程,以临床实验室改进规范88(CLIA’88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,在不同医学决定水平判断不同检测系统的偏差于临床是否可以接受。结果:实验方法与参考方法两者相关性良好,二者之间的偏差在临床允许误差内。结论:当使用2个以上检测系统检测同一检验项目时,应进行方法比对和偏倚评估,判断其临床可接受性能,以保证检验结果的可比性。

尿红细胞位相检测在肾脏疾病鉴别诊断中的应用

目的探讨尿红细胞位相检查对血尿原因鉴别诊断的临床意义。以尿红细胞>8 000个/ml,其中畸形红细胞>70%;Gl红细胞≥5%,作为肾小球性血尿的诊断标准,评估其准确性及临床应用价值。方法研究238例血尿患者,其中120例(经肾活检证实)为肾小球疾病,118例为非肾小球性疾病。通过评估患者肾脏活检与连续三次不同时间尿红细胞位相显微镜检查达到肾小球性血尿诊断标准与肾小球疾病的符合率,计算出其灵敏度和特异度。结果此诊断标准的灵敏度为93.10%,特异度为90.16%。结论尿红细胞位相检查对肾小球性血尿定位诊断准确可靠,操作简便,适于临床应用。

286株铜绿假单胞菌耐药谱及其Ⅰ类整合子的相关性研究

目的通过分析2013年分离的286株铜绿假单胞菌对16种抗菌药物的耐药情况,明确Ⅰ类整合子在铜绿假单胞菌多重耐药中所起的作用。方法采用纸片扩散法进行药物敏感试验,并以聚合酶链反应(PCR)进行Ⅰ类整合子的检测,用χ2检验对Ⅰ类整合子携带率与铜绿假单胞菌多重耐药的相关性进行统计学分析。结果在分离出的286株细菌中,检出Ⅰ类整合子89株,检出率为31.1%;Ⅰ类整合子阳性株对多种抗菌药物的耐药率明显高于整合子阴性株。结论铜绿假单胞菌的耐药情况严重,Ⅰ类整合子是铜绿假单胞菌多重耐药的重要因素。

广州地区146株产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型研究

目的检测临床收集多重耐药的肺炎克雷伯菌的基因型，以利于耐药性的控制与指导临床用药。方法收集广州地区2006年1月～2008年12月来自各种标本的产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-laetamases，ESBLs）肺炎克雷伯菌146株，聚合酶链反应（PCR）对ESBLs阳性菌进行耐药基因检测并测序。结果146株产ESBLs肺炎克雷伯菌中，120株产CTX—M型β-内酰胺酶，52株产TEM型β-内酰胺酶，12株产OXA型β-内酰胺酶，除66株为CTX—M单独存在外，其余均与TEM，OXA共存。结论广州地区产ESBLs多重耐药肺炎克雷伯菌株携带基因型复杂，应加强临床细菌基因水平的耐药监测，采取有效措施防止耐药性的传播。

经直肠13针穿刺活检和血清PSA浓度诊断前列腺癌的相关性分析

目的探讨超声引导下经直肠前列腺13针穿刺病理结果与血清前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)含量之间的关系。方法回顾性分析122例经直肠超声引导下13针穿刺法活检的患者,评价前列腺癌的检出率,观察血清PSA浓度与前列腺癌之间的关系。结果 PSA<4.0ng/mL、4.0≤PSA<10ng/mL、10≤PSA<20ng/mL、≥20ng/mL各个水平中阳性率分别为12.6%、23.8%、40.7%、77.4%,四组间阳性率的比较均有明显差异(P<0.05)。结论血清PSA浓度与前列腺癌穿刺活检阳性结果密切相关,血清PSA浓度对前列腺癌穿刺活检的实施有一定指导意义。

6株枝孢霉的鉴定与分析

目的利用ITS基因序列分析对临床分离的6株枝孢霉进行分子生物学鉴定与分析,以提高对枝孢霉的鉴定能力。方法从皮肤病患者中分离6株枝孢霉,通过观察培养后菌落的形态及其显微镜下特征,并利用ITS序列对其进行PCR分子生物学分析,并将PCR产物送公司进行测序。结果 6株枝孢霉由显微镜下的形态和培养的菌落特征鉴定,提取其DNA进行PCR扩增,产物进行1%琼脂糖凝胶电泳分析,再由Tanon-3500凝胶成像系统确定扩增所得电泳带的大小在500~750 bp之间,测序结果经Blast比对,其中4株鉴定为球孢枝孢霉100%,1株鉴定为枝孢样枝孢霉100%,1株鉴定为枝孢霉属97%。结论通过ITS基因序列分析技术,能更有效准确地提高对枝孢霉的鉴定能力,为临床的准确治疗方案提供有力的依据。

Roche e601检测乙型肝炎病毒表面抗原可行性评价

目的评价用Roche e601检测乙型肝炎病毒表面抗原的可行性。方法用Roche e601测定新鲜标本和HBsAg质控品,通过分析精密度、准确度、阴性和阳性符合率、检测低限、阴性标本可靠性等性能指标评价该检测系统测定HBsAg结果的可靠性。结果低、高值标本批内、批间精密度的变异系数(CV)均比厂家要求小;在60个室间质评样品检测结果中,HBsAg阴性符合率为100%(40/40)、阳性符合率100%(20/20);该系统的检测临界值为0.01IU/mL;40份HBsAg浓度在0.8<COI<1.0(接近临界值)且HBV-DNA检测结果均小于5.0×102的患者样本,用该检测系统检测结果均为阴性,阴性标本可靠性为100%。结论该检测系统检测乙型肝炎病毒表面抗原的性能能够满足临床要求。

大腹皮水煎剂对结肠术后肠吻合组织的修复作用

目的观察大腹皮水煎剂对大鼠结肠吻合术后早期肠动力的恢复及肠吻合组织修复的影响,初步评价其早期应用的安全性及有效性。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、大腹皮组、西沙比利组,除假手术组外,术后分别灌胃给予生理盐水、大腹皮水煎剂、西沙比利,每天一次,观察大鼠死亡率、第一次的排便时间、不同时段肠吻合口愈合率以及其组织病理情况变化。结果与模型组比较,术后第3 d、第6 d大腹皮组存活率明显提高(P<0.01),西沙比利组存活率明显提高(P<0.05);大腹皮组、西沙比利组第一次排便时间明显提前(P<0.01);术后第3 d、第6 d大腹皮组肠吻合愈合率明显高于模型组(P<0.05);大腹皮组、西沙比利组肠组织病理学评分明显低于模型组(P<0.05),且病理显示粘膜层、粘膜下层水肿、炎性浸润明显减少。结论大腹皮水煎液可通过改善肠吻合愈合率,提早恢复肠动力,减少炎症而促进结肠术后肠吻合组织的修复。

近海浅海海水弗朗西斯菌的分离培养和鉴定

目的对广东地区近海浅海海水弗朗西斯菌进行分离培养,以了解弗朗西斯菌在近海浅海海水中的分布情况。方法在广东近海浅海地区水域内,选取茂名市电白区水东湾(2019年10月4日)以及惠州市两大湾(巽寮湾、双月湾,2019年8月12日)进行多点采集水样,分别19份和29份。利用前期探索出针对分离弗朗西斯菌的有效海水前处理手段(浓缩、酸处理)以及分离培养基(BHI-2216E-GVPC和BCYEα-2216E-GVPC)进行分离培养,依据弗朗西斯菌的菌落特征,初步将可疑菌株进行分纯培养,并对纯培养后的可疑菌株进行传统形态特征、生理生化特征、16S rRNA分子特征等鉴定。结果19份水东湾水样中有14份(阳性率为73.7%)成功分离到共60株目标菌(含邻近兼性胞内寄生菌);29份惠州地区水样中有17份(阳性率为58.6%)成功分离到共79株目标菌(含邻近兼性胞内寄生菌)。经菌落特征、细菌形态学检查、生化反应以及测序结果比对后,水东地区60株目标菌分离出弗朗西斯菌属(含潜在新种)12株(20.0%),潜在新科2株(2.9%),惠州地区79株目标菌分离出弗朗西斯菌属(含潜在新种)22株(27.8%),潜在新科18株(22.8%)。结论广东地区近海浅海海水中弗朗西斯菌菌种资源丰富,且存在不同的该菌属内新种以及可能存在邻近新属。