RUNX1-RUNX1T1融合基因阳性急性髓系白血病骨髓形态学特点分析

目的探讨RUNX1-RUNX1T1融合基因阳性急性髓系白血病(AML)骨髓形态学特点。方法选取2017年1月至2023年1月该院初诊的20例RUNX1-RUNX1T1融合基因阳性AML病例作为A组,20例融合基因阴性的AML病例为B组,24例PML-RARA融合基因阳性AML病例为C组,对骨髓形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学检查进行回顾性分析,同时结合国内外文献分析类似病例骨髓细胞形态学特点。结果A组骨髓中出现不同程度增多的早幼粒细胞,早幼粒细胞数目与B组相比,差异有统计学意义(P<0.05),与C组相比差异亦有统计学意义(P<0.001)。A组部分早幼粒细胞存在形态异常且A组融合基因的表达量与骨髓早幼粒细胞数目呈正相关(r=0.478,P=0.039)。A组CD56、CD19表达及c-Kit突变情况明显高于B组(P<0.05),A、B两组1个疗程化疗缓解情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。A组易出现CD56和CD19同时表达,易伴随性染色体的缺失。结论RUNX1-RUNX1T1融合基因阳性AML在骨髓形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学方面有其独特的特点。骨髓中粒细胞系统易见不同程度的病态造血,变异性大,早幼粒细胞数目的增多及形态异常亦可作为RUNX1-RUNX1T1融合基因阳性AML骨髓形态学特点之一。

2021年度上海某三甲医院细菌耐药性分析

目的分析该院2021年分离菌株特点和对常用抗菌药物的耐药性,指导临床用药和对患者的护理。方法收集2021年1-12月该院痰液、尿和血等样本分离的菌株,依据CLSI M100-S31版的药物敏感折点进行评价,统计分析菌株种类、分布和耐药特点。结果分离得到非重复病原菌4792株,其中革兰阳性菌占29.6%(1418株),革兰阴性菌占70.4%(3374株),以大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠球菌属和金黄色葡萄球菌为主。产ESBLs肠杆菌科中,克雷伯菌属的检出率为40.8%(305株),大肠埃希菌的检出率为62.5%(616株),奇异变形杆菌检出率为58.3%(126株)。碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌检出率为22.5%(95株),碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌检出率为40.6%(104株)。MRSA和MRCNS检出率分别为57.6%(257株)和78.4%(80株),未检测到耐万古霉素肠球菌。结论多重耐药株检出率仍居高不下,需继续加强抗菌药敏监测,为临床合理选择抗菌药物提供依据。

AML患者异基因造血干细胞移植后复发危险因素分析

目的探讨急性髓系白血病(AML)患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后复发的影响因素,为临床早期识别高危因素,及时采取干预措施提供依据。方法回顾性分析2017年1月1日—2020年12月31日上海交通大学医学院附属第一人民医院行allo-HSCT的132例非M3型AML患者移植相关临床数据。采用Cox回归分析评价AML患者移植后复发和无复发生存的影响因素。结果132例患者中,复发25例,中位复发时间为5个月。复发组与非复发组TP53基因突变情况、移植前状态比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,初诊白细胞计数≥100×10^(9)/L、TP53基因突变、移植前未缓解(NR)是AML患者移植后复发的独立危险因素(P<0.05)。Log-rank χ^(2)检验结果显示,初诊白细胞计数≥100×10^(9)/L组与白细胞计数<100×10^(9)/L组、TP53基因突变组与野生型组,移植前NR组与完全缓解(CR)组总无复发生存(RFS)率差异有统计学意义(P<0.05)。结论初诊时高白细胞计数、TP53基因突变、移植前NR可导致AML患者移植后复发风险增加。

记忆性B细胞体外扩增影响因素的研究进展

记忆性B细胞（Memory B cells）是成熟的初始B细胞被抗原激活分化为具有记忆功能并持续存在于宿主的一类细胞。当再次遇到相同抗原时,该细胞可迅速增殖分化为浆细胞,产生高亲和力的抗原特异性抗体,介导体液免疫应答,从而保护机体免受再次入侵的抗原感染。

类风湿关节炎患者嗜碱性粒细胞与疾病活动度和Th1应答失衡的关系

目的:探讨RA患者外周嗜碱性粒细胞的活化情况和活化机制,以及与疾病活动度和Th1/Th2应答失衡的关系。方法:本研究运用流式细胞术检测类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中Th1/Th2细胞的比值和嗜碱性粒细胞数量及活化水平,用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4水平,用Western blot法检测血清中循环的Ig E型免疫复合物(Ig E-CIC)的水平。结果:Th1/Th2细胞比值与DAS28评分呈低度线性正相关关系;RA患者血清IFN-γ水平较对照组显著升高,且和疾病活动度相关,但IL-4的水平则无差异;RA患者嗜碱性粒细胞数量较对照组显著降低,且高度活化(高表达CD203c和CD62L);RA患者外周血存在高水平的Ig E-CIC,而对照组则无。结论:RA患者外周血嗜碱性粒细胞高度活化、数量显著减少,可能会迁徙至次级淋巴组织和炎症部位,对抗外周Th1应答失衡,有望为RA的防治提供新的线索。

创新型诺如病毒GⅠ/GⅡ抗原荧光纳米颗粒快速联检试纸条检测效能测评

目的评估诺如病毒GⅠ和GⅡ抗原荧光纳米颗粒快速联检试纸条的灵敏度和特异性。方法以培养的轮状病毒等其他肠道病原体和245例具有胃肠道感染症状患者的粪便为检测标本,分别用诺如病毒GⅠ和GⅡ抗原荧光纳米颗粒快速联检试纸条和诺如病毒GⅠ和GⅡ抗原二合一彩色微球法检测试纸条检测。结果诺如病毒GⅠ和GⅡ抗原荧光纳米颗粒快速联检试纸条的灵敏度显著高于诺如病毒GⅠ和GⅡ抗原二合一彩色微球法检测试纸条;对常见的轮状病毒(Wa株)、肠道腺病毒(40型)、肠道病毒柯萨奇病毒(A16)、埃可病毒(30型)和肠道病毒(EV71)无交差反应。结论诺如病毒GⅠ和GⅡ抗原的荧光纳米颗粒快速联检试纸条灵敏度显著高于彩色微球法快速检测试纸条,特异性良好。

细胞微粒在自身免疫性疾病发病中的作用:一种新的潜在治疗靶标

细胞微粒（Microparticles,MPs）是一类在某些生理或病理状况下,从血管内皮细胞或循环血细胞出芽脱落的富含磷脂的直径约为0.1-1.0μm的颗粒,具有生物活性可参与多种免疫性疾病（Immune diseases）的发病[1]。微粒被认为是多功能的亚细胞结构,通过释放生物活性分子和表面抗原与靶细胞的受体相互作用,

类风湿性关节炎患者嗜碱性粒细胞活化机制研究

目的:探讨类风湿性关节炎患者外周血嗜碱性粒细胞的活化情况及其机制。方法:流式检测正常人对照组和RA患者组外周嗜碱性粒细胞活化标记物CD203c的表达及IL-4阳性的比例;用电化学发光法检测血清IgE水平;负选正常人嗜碱性粒细胞,以anti-IgE刺激为阳性对照,置含或不含IgE的微环境中,流式检测CD203c的表达及IL-4阳性的比例。结果:较正常人对照组,RA患者嗜碱性粒细胞高表达CD203c和IL-4(均P<0.05);RA患者血清IgE水平显著高于正常人对照组(P<0.05);RA患者血清和其血清中纯化的IgE可使负选的正常人来源的嗜碱性粒细胞活化,上调CD203c表达及IL-4阳性比例。结论:RA患者嗜碱性粒活化与发病相关,且主要由IgE介导,靶向嗜碱性粒细胞及其活化通路有望为RA的防治提供新的策略。

肺诺卡菌病合并皮下脓肿2例报道

圣乔治教堂诺卡菌(Nocardia cyriacigeorgica)和皮疽诺卡菌(Nocardia farcinica)属于诺卡菌属,诺卡菌属在自然界中分布广泛,多为腐生寄生菌,经呼吸道吸入引起人的原发性化脓性肺部感染,同时又可转移到皮下组织,形成溃疡、脓肿和多发性瘘管等继发性感染[1-2]。诺卡菌引起肺部感染并播散至皮下组织的病例不多见。现报道2例诺卡菌引起肺部感染合并皮下组织脓肿的病例,旨在提高微生物检测人员应用多技术检测对该菌的鉴别判定能力,并提高医生对该种细菌在肺部感染及合并皮下脓肿的重视,为临床诊治提供一定的参考依据。

p2PSA、p2PSA%、PHI在前列腺癌辅助诊断中的价值

目的探讨前列腺特异性抗原同源异构体2(p2PSA)、前列腺特异性抗原同源异构体2百分比(p2PSA%)和前列腺健康指数(PHI)在鉴别良性、恶性前列腺疾病中的价值。方法选取行经直肠超声引导前列腺穿刺活检的男性患者250例,根据病理结果分为良性前列腺疾病组(145例)和前列腺癌组(105例),将所有患者按年龄分为≤65岁和>65岁2个年龄段。检测所有患者血清总前列腺特异性抗原(t-PSA)、游离前列腺特异性抗原(f-PSA)和p2PSA,并计算游离前列腺特异性抗原百分比(f-PSA%)、p2PSA%和PHI。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标诊断前列腺癌的效能。结果与良性前列腺疾病组比较,前列腺癌组t-PSA、p2PSA、p2PSA%、PHI均显著升高(P<0.01、P<0.001),f-PSA%显著降低(P<0.001),f-PSA差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,在≤65岁的患者中,t-PSA、f-PSA、f-PSA%、p2PSA、p2PSA%、PHI诊断前列腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.687、0.500、0.792、0.815、0.795、0.892;在>65岁的患者中,t-PSA、f-PSA、f-PSA%、p2PSA、p2PSA%、PHI诊断前列腺癌的AUC分别为0.748、0.542、0.900、0.780、0.843、0.929。结论前列腺癌标志物在不同年龄段中的诊断效能有一定差异。新型前列腺癌标志物PHI、p2PSA、p2PSA%可提高良性、恶性前列腺疾病的鉴别诊断效能。

SLE患者IgG4型抗核抗体的检测及其临床意义

目的了解系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)患者IgG4型抗核抗体检测的临床意义。方法入组SLE患者124例,并以67例类风湿关节炎(RA)患者和70例正常人为对照;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IgG4型抗核抗体水平,分析其与临床指标(血肌酐、总胆固醇、血尿素氮、血清白蛋白、血尿酸和24 h尿蛋白等)的相关性,并进一步用抗核抗体谱测定试剂盒(免疫印迹法)检测何种抗原产生IgG4型抗体。结果 SLE、RA患者的血清IgG4型抗核抗体阳性率分别为85.5%、56.7%,均显著高于正常人的18.6%(P<0.01)。SLE患者血清中IgG4型抗核抗体水平与血清C3、血清白蛋白及血清总IgG4水平分别呈正相关(r=0.55、0.42、0.52,均P<0.05);与24 h尿蛋白定量呈负相关(r=-0.47,P<0.05)。抗原特异性IgG4型抗体以组蛋白、核小体、dsDNA、Ro-52、SS-A、Sm和nRNP为主,而在15种自身抗原中,在IgG型抗核抗体阳性的SLE患者中,普遍存在IgG4亚型抗体。结论在抗核抗体阳性的SLE患者中普遍存在广谱、自身方应性的IgG4亚型抗体;IgG4型抗核抗体在SLE的发病中可能起保护作用,有望为SLE的防治提供新的策略。

3系铝合金微波组件壳体的激光封焊工艺研究

利用激光封焊机对微波组件的3A21铝合金外壳气密性封装的固体激光器脉冲激光封焊工艺进行了试验研究,分析了脉冲峰值功率、脉冲宽度、脉冲波形等激光焊接工艺参数对最终焊接结果的影响。通过优化激光封焊工艺,获得了氦气漏气率优于3×10-9Pa·m3/s、焊缝成形美观、无裂纹和气孔的焊接样品。试验结果对3A21铝合金微波器件和组件外壳的气密性脉冲激光封焊工艺质量的提升具有一定的指导意义。

RSV感染气液相界面培养人支气管上皮细胞模型的建立及其对HMGB1和pMLKL表达的影响

目的构建呼吸道合胞病毒(RSV)感染气液相界面(ALI)培养的人支气管上皮细胞(hBEC)模型,为深入研究呼吸道病毒致病机制提供更接近体内环境的细胞模型;通过分析RSV感染对高迁移率族蛋白1(HMGB1)和磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域(pMLKL)表达的影响,探讨RSV感染损伤支气管上皮的致病机制。方法将hBEC接种到Transwell膜上,进行液体浸没式培养,细胞汇合度达100%后转ALI培养,倒置显微镜观察细胞生长状态。细胞分化成熟后按照以下分组分别感染RSV病毒:6 h对照组,6 h感染复数(MOI)1.0组,6 h MOI 3.0组,24 h对照组,24 h MOI 1.0组,24 h MOI 3.0组。每组3个复孔。通过免疫荧光染色确认RSV感染效果和RSV感染对细胞核蛋白HMGB1和pMLKL表达的影响。结果经细胞扩展期液体浸没式培养4~10 d后,细胞汇合度达100%。转ALI培养约4周后,细胞条索状分布越来越清晰,且分泌肉眼可见的黏液,形成黏液层,将Transwell膜石蜡包埋切片,得到典型的假复层上皮HE染色结果。经抗RSV抗体免疫荧光染色确认,MOI为3.0感染24 h RSV病毒成功感染细胞;抗HMGB1和抗pMLKL免疫荧光双染色结果显示,该感染条件下,细胞核内出现粉色荧光[为蓝色4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)和红色HMGB1荧光Merge结果],证实RSV感染后出现HMGB1核表达;而RSV感染前后均未见pMLKL表达。结论通过在Transwell膜上液体浸没式扩展培养和ALI分化培养,可获得分化良好的hBEC,且能较长时间维持其形态及功能,可为呼吸道病毒感染及其他常见呼吸道疾病研究提供更接近体内环境的细胞模型。在MOI 3.024 h条件下,RSV成功感染该细胞模型,并引起损伤相关分子蛋白HMGB1核表达。

慢性荨麻疹患者血清IgE和IgE受体及其自身抗体的表达及意义

目的:探讨慢性荨麻疹(CU)患者血清免疫球蛋白E(IgE)、可溶性IgE高亲和力受体α(sFcεRⅠα)、IgG型抗IgE、IgG型抗FcεRⅠ自身抗体的水平及意义。方法:收集2018年1至7月于上海市第一人民医院首诊的43例CU患者作为CU组,同时选择37例皮炎湿疹患者及51名健康体检者分别作为疾病对照(DC)组及健康对照(NC)组。采用免疫比浊法检测血清IgE,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗IgE、抗FcεRⅠ和sFcεRⅠα。采用非参数检验分析各组指标水平的差异,Spearman相关分析评估各指标间的相关性及其与病情的关系,受试者工作特征曲线分析各指标诊断价值。结果:CU组血清IgE、抗IgE、抗FcεRⅠ水平显著高于NC组,中位数分别为65.70 IU/ml比17.10 IU/ml,χ^2=28.541,P=0.001;0.61比0.39,χ^2=27.408,P=0.001;0.64比0.51,χ^2=29.102,P<0.001。CU组抗FcεRⅠ水平显著低于DC组,0.64比0.83,χ^2=25.869,P=0.007。CU、DC、NC组血清sFcεRⅠα中位数分别为5.74、5.38和4.50 ng/ml,差异无统计学意义,χ^2=3.463,P=0.177。IgE与sFcεRⅠα、抗IgE与抗FcεRⅠ水平呈正相关(r=0.455,P<0.001;r=0.611,P<0.001)。四指标与病程、症状严重程度无明显相关关系,P>0.05。IgE、抗IgE、抗FcεRⅠ对CU的诊断效能(AUC均=0.72)优于sFcεRⅠα(AUC=0.61),四项联合检测可达最高诊断效能(AUC=0.83);抗FcεRI对CU与DC具鉴别诊断价值,AUC=0.70,P=0.002。结论:CU患者血清IgE、抗IgE及抗FcεRⅠ水平显著升高。肥大细胞活化相关分子具有成为CU诊断指标的潜能。

血清IgE水平与冠心病的相关性分析

目的:探讨血清IgE水平与冠心病的相关性。方法:将我院收治的135例患者根据冠脉造影结果分为冠心病组(CHD)和非冠心病组(non-CHD),冠心病组根据临床症状分为稳定型心绞痛组(SAP)、不稳定型心绞痛组(UAP)和急性心肌梗死组(AMI),动脉堵塞程度用Gensini评分量化,采用SIMENS BNII全自动免疫散射比浊仪测定总IgE水平。比较CHD和non-CHD组患者及SAP、UAP和AMI组患者血清IgE水平的差异,并进一步分析血清IgE等级与冠心病Gensini积分的相关性。结果:non-CHD患者血清IgE水平(32.3(13.5,61)KU/L)明显低于CHD患者(69(26.4,169)KU/L)(P=0.001),UAP和AMI患者血清IgE水平(78.6(37.0,191.0)KU/L、118.5(75.3,148.1)KU/L)均显著高于SAP组(36.7(20.7,96.7)KU/L)(P=0.034和P=0.001),且多支血病变组患者血清IgE水平(67.2(30.9,249.0)KU/L)显著高于单支血管病变患者(34.6(18.1,59.0)KU/L)(P=0.039)。IgE水平根据四分位间距分为四个等级,随着IgE分级水平增加冠心病Gensini积分增加。结论:冠心病患者血清IgE水平升高,且与冠心病类型和血管堵塞程度都存在显著相关性,可能辅助冠心病的诊断及病情监测。

间接ELISA定量检测抗IgE自身抗体方法的建立

目的建立一种间接ELISA法定量检测IgG型抗人IgE自身抗体,并初步评估慢性荨麻疹(CU)患者血清抗IgE含量。方法选取2018年1至12月于上海市第一人民医院首诊的75例CU患者及120名健康体检者,收集相应血清样本及临床资料。以人IgE包被微孔板,加入人源化抗人IgE标准品(奥马珠单抗)或待检血清,再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgG,建立间接酶联免疫法,并进行条件优化及方法学评价。采用Mann-WhitneyU检验、卡方检验分析CU患者及健康人血清IgE水平,采用受试者工作曲线(ROC)分析抗IgE对CU的诊断效能。结果IgE包被量5.0×10^-4mg/ml,血清稀释度1∶300,酶标抗体稀释度1∶100000;标准曲线R2=0.996;批内及批间变异系数3.9%~7.5%、6.0%~8.2%;血红蛋白≤1.3g/L、三酰甘油≤4.6mmol/L、胆红素≤171μmol/L时,对检测结果无明显影响;低、高浓度样品回收率95.9%、108.4%;空白限5.8×10^-4mg/ml,检出限1.8×10^-3mg/ml,定量限2.0×10^-3mg/ml;线性范围约2.0×10^-3~354.4mg/ml;抗IgE达354.4mg/ml时未见钩状效应;血清4℃过夜、反复冻融6次后抗IgE水平保持稳定。CU患者血清抗IgE水平[19.0(1.9,58.6)mg/ml]显著高于健康人血清抗IgE水平[0.7(0.002,11.1)mg/ml],P<0.001;当抗IgE截断值定为15.3mg/ml时,CU患者阳性率为54.7%,显著高于健康对照(18.3%),P<0.001,AUC达0.736。结论成功建立血清抗IgE的间接ELISA法,CU患者血清中存在抗IgE自身抗体。

肥大细胞分化与成熟

肥大细胞(mast cell, MC)来源于骨髓造血干细胞,在骨髓中多次分化后成为肥大细胞祖细胞(mast cell progenitor, MCp),然后释放入外周血液循环系统。MCp在自身表达的趋化因子及其受体、整合素和相关因素的作用下,快速迁移至外周组织定居、分化和成熟,进而维持机体的稳态或参与疾病的发生、发展。文章就MC在骨髓内外分化、迁移和成熟的过程作一综述,以期为MC相关研究提供理论参考。

轮状病毒-肠道腺病毒荧光纳米颗粒联检试纸检测效能测评

目的评估轮状病毒-肠道腺病毒抗原荧光纳米颗粒快速联检试纸条的灵敏度和特异性。方法以培养的轮状病毒、肠道腺病毒、以及其他肠道病原体，还有140例具有胃肠道感染症状患者的粪便标本，分别用轮状病毒-肠道腺病毒抗原荧光纳米颗粒快速联检试纸条和轮状病毒-腺病毒抗原二合一彩色微球法检测试纸条检测。结果轮状病毒-肠道腺病毒抗原荧光纳米颗粒快速联检试纸条的灵敏度显著高于轮状病毒-腺病毒抗原二合一彩色微球法检测试纸条；对常见的柯萨奇病毒（A16）、埃可病毒（30型）和肠道病毒（EV71）无交叉反应。结论轮状病毒-肠道腺病毒抗原的荧光纳米颗粒快速联检试纸条灵敏度显著高于彩色微球法快速检测试纸条，特异性良好。

嗜碱粒细胞在胶原诱导性关节炎小鼠发病早期中的作用

用鸡Ⅱ型胶原免疫C57BL/6小鼠,制备胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)小鼠模型。用MAR-1抗体清除嗜碱粒细胞,以同型抗体为对照。记录各组小鼠关节炎指数(arthritis index,AI)的变化。ELISA法检测血清抗Ⅱ型胶原抗体、IL-4、IL-6和IFN-γ水平。小鼠关节标本用HE染色进行病理分析。探讨嗜碱粒细胞在胶原诱导性关节炎小鼠发病早期中的作用。结果显示,成功建立CIA小鼠模型。清除嗜碱粒细胞组、模型对照组和MAR-1抗体同型对照组相比,清除嗜碱粒细胞可显著抑制关节炎指数的升高,显著降低抗Ⅱ型胶原的抗体水平以及血清IL-4的水平,但对IL-6和IFN-γ的水平无影响。同时,清除嗜碱粒细胞可显著改善CIA模型小鼠的关节外观和关节病理改变。研究表明,靶向清除嗜碱粒细胞可减轻CIA模型小鼠的早期发病症状,可能与其介导IL-4生成和自身抗体产生相关。

新型联检GI和GII型诺如病毒荧光微球检测条的研制和应用

制备并评估联检GI和GII型诺如病毒荧光微球检测条的检测效率。以层析材料和特异性双抗体，按常规双抗体夹心法制备联检GI和GII型诺如病毒荧光微球检测条。以轮状病毒细胞培养物和343例临床表现为胃肠道感染症状病人的粪便标本作为检测对象，用联检GI和GII型诺如病毒荧光微球检测条检测并与CerTest Norovirus GI-GII one step combo cardtest检测结果比较。成功制备了联检GI和GII型诺如病毒荧光微球检测条。检测性能：①联检GI和GII型诺如病毒荧光微球检测条的敏感性较CerTest Norovirus GI-GII one step combo card test方法高（4～8）倍；②与轮状病毒（Wa株）等一些肠道病毒无交叉反应。结果表明成功制备联检GI和GII型诺如病毒荧光微球检测条，其检测性能良好。