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加味柴胡疏肝汤君臣配伍抗癫痫作用机制的网络药理学和分子对接研究 被引量:3
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作者 卢玲 胡跃强 +3 位作者 廖现秋 李欢 蔡伦 刁丽梅 《西部中医药》 2023年第2期12-17,共6页
目的:通过网络药理学方法探讨加味柴胡疏肝汤中君药和臣药配伍的抗癫痫作用机制,并通过分子对接技术预测药物有效成分与抗癫痫靶标的结合性。方法:从DisGeNET和GeneCards数据库中分别收集癫痫的靶标,取二者交集。在TCMSP数据库中检索加... 目的:通过网络药理学方法探讨加味柴胡疏肝汤中君药和臣药配伍的抗癫痫作用机制,并通过分子对接技术预测药物有效成分与抗癫痫靶标的结合性。方法:从DisGeNET和GeneCards数据库中分别收集癫痫的靶标,取二者交集。在TCMSP数据库中检索加味柴胡疏肝汤中君药和臣药的有效成分及靶标。利用在线软件Venny进行映射得到加味柴胡疏肝汤君臣配伍抗癫痫作用的潜在靶标。通过STRING数据库构建基因功能关联网络。基于clusterProfiler包进行GO富集分析(gene ontology,GO)和KEGG富集分析(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)。同时使用Cytoscape软件构建“成分-靶标-通路”关系网络。最后,通过Autodock Vina实现君臣配伍有效成分与癫痫靶标蛋白的分子对接。结果:加味柴胡疏肝汤君臣配伍的多种有效成分能够作用于癫痫的37个潜在靶标。这些潜在靶标主要影响了69个GO生物学功能。涉及了113条KEGG信号通路。此外,加味柴胡疏肝汤君臣配伍的有效成分均可与癫痫核心靶标自发地结合,且结合性良好。结论:加味柴胡疏肝汤君臣配伍的有效成分与癫痫相关的靶标具有良好的结合性。加味柴胡疏肝汤君臣配伍的有效成分可能是通过多靶标、多途径共同发挥抗癫痫作用的。 展开更多
关键词 网络药理学 分子对接技术 癫痫 加味柴胡疏肝汤 君臣配伍
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定痫丸对急性期癫痫小鼠海马组织Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白及神经元凋亡的影响 被引量:12
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作者 刁丽梅 李华琼 +7 位作者 张庆梅 卢玲 李欢 廖现秋 吴琼 陈爱玲 杨东 仇小强 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第3期45-49,I0014,共6页
目的研究定痫丸对急性期癫痫小鼠海马组织Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白及神经元凋亡的影响,探讨其可能的疗效机制。方法取100只8~10周龄SPF级雄性小鼠,其中20只用于模型失败备用小鼠,将80只小鼠随机分为4组,分别为模型组(A)、生理盐... 目的研究定痫丸对急性期癫痫小鼠海马组织Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白及神经元凋亡的影响,探讨其可能的疗效机制。方法取100只8~10周龄SPF级雄性小鼠,其中20只用于模型失败备用小鼠,将80只小鼠随机分为4组,分别为模型组(A)、生理盐水组(B)、卡马西平组(C)、定痫丸组(D),每组20只,采用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品的方法制作急性期癫痫小鼠模型,A组不予干预,B组实验全程均给予生理盐水,C组予卡马西平混悬液灌胃,D组予定痫丸混悬液灌胃,应用免疫组化和Western Blot分别检测海马组织内β-Catenin(β-连环蛋白),Cyclin D1(细胞周期蛋白D1)和Wnt3a的蛋白表达水平,运用Tunel法检测神经元的凋亡情况。结果与生理盐水组比较,模型组海马组织中的β-Catenin、Wnt3a的蛋白表达明显上调(P<0.05),在海马CA1区和CA3区的凋亡阳性细胞增多(P<0.05);与模型组比较,定痫丸组中的β-Catenin、Wnt3a的蛋白表达下调(P<0.05),在海马CA1区和CA3区的凋亡阳性细胞减少(P<0.05);在4组海马组织中均未检测到Cyclin D1蛋白的表达。结论定痫丸可能是通过下调Wnt/β-Catenin信号通路上的β-Catenin、Wnt3a的蛋白的表达,抑制了海马神经元的凋亡,达到治疗癫痫的作用。 展开更多
关键词 定痫丸 癫痫 WNT/Β-CATENIN信号通路 凋亡
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加味柴胡疏肝汤调控miR-204影响癫痫小鼠海马神经元调亡与ATG7、LC3Ⅱ的表达 被引量:7
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作者 汪顺贵 玉倩 +7 位作者 李华霞 李欢 卢玲 廖现秋 周艳英 宋曦 秦红玲 刁丽梅 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第7期2154-2159,共6页
目的观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马神经元自噬和凋亡的拮抗作用,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组(20 mL·kg-1·d-1灌胃两周)、模型组(180mg·kg-1腹腔注射)、加味柴胡疏肝汤组(7 ... 目的观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马神经元自噬和凋亡的拮抗作用,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组(20 mL·kg-1·d-1灌胃两周)、模型组(180mg·kg-1腹腔注射)、加味柴胡疏肝汤组(7 g·kg-1·d-1灌胃两周)、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 mimic组(2μL颅内注射)、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 inhibitor组(2μL颅内注射)、卡马西平组(混悬液30 mg·kg-1·d-1灌胃两周);采用匹罗卡品使小鼠致痫,抑制及过表达miRNA-204后,分别予加味柴胡疏肝汤灌胃,处死小鼠,取其海马组织,观察每组的指标情况:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)技术检测小鼠海马miRNA-204,以及自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达情况,采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测小鼠海马C1区神经元凋亡情况。结果与生理盐水组相比,模型组小鼠海马miR-204表达明显降低(P<0.01),自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达,神经元凋亡指数明显升高(P<0.01);与模型组相比,使用加味柴胡疏肝汤后,小鼠海马组织miR-204表达明显升高,自噬相关基因ATG7、LC3Ⅱ的表达,神经元凋亡指数明显降低(P<0.05);使miR-204过表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度增大(P<0.01);抑制miR-204表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度减少(P<0.05)。结论加味柴胡疏肝汤具有抗癫痫作用,可能是通过升高miRNA-204的表达,拮抗小鼠海马神经元过度自噬和凋亡。 展开更多
关键词 加味柴胡疏肝汤 癫痫 miR-204 自噬 凋亡
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半夏白术天麻汤治疗癫痫作用机制的网络药理学研究 被引量:5
4
作者 卢玲 胡跃强 +4 位作者 李欢 廖现秋 何乾超 蔡伦 刁丽梅 《中国现代中药》 CAS 2021年第8期1406-1415,共10页
目的:运用网络药理学技术探讨半夏白术天麻汤治疗癫痫的作用机制。方法:分别在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、BATMAN-TCM数据库及TCMID数据库中检索并整合得到半夏白术天麻汤的活性成分及活性成分作用的靶点。在OMIM数据库和G... 目的:运用网络药理学技术探讨半夏白术天麻汤治疗癫痫的作用机制。方法:分别在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、BATMAN-TCM数据库及TCMID数据库中检索并整合得到半夏白术天麻汤的活性成分及活性成分作用的靶点。在OMIM数据库和GeneCards数据库中检索并整合得到癫痫的相关靶点。通过Venny软件映射得到半夏白术天麻汤治疗癫痫的潜在靶点。通过Cytoscape 3.6.1软件构建成分-靶点关系网络,通过STRING 11.5数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,筛选核心治疗靶点。基于R语言软件对半夏白术天麻汤治疗癫痫的潜在靶点进行基因本体(GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并且构建KEGG关系网络。结果:共筛选出半夏白术天麻汤活性成分130个,半夏白术天麻汤治疗癫痫的潜在靶点258个,其中核心靶点5个,包括β2肾上腺素受体(ADRB2)、钙调蛋白1(CALM1)、雌激素受体1(ESR1)、一氧化氮合酶2(NOS2)、丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)。且靶点之间具有直接或间接的相互作用关系。其涉及的GO生物学主要包括γ-氨基丁酸(GABA)能突触、神经递质受体的活动、GABA-A受体活动、GABA受体活动、苯二氮卓受体活动等。其主要涉及的KEGG通路包括白细胞介素-17(IL-17)信号通路、5-羟色胺能突触等。结论:半夏白术天麻汤通过多成分、多靶点、多途径对癫痫发挥作用。 展开更多
关键词 癫痫 网络药理学 半夏白术天麻汤 靶点 通路
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从化痰息风法论治癫痫的研究进展 被引量:8
5
作者 李欢 卢玲 +3 位作者 廖现秋 何乾超 陈炜 刁丽梅 《广西医学》 CAS 2020年第8期1022-1024,共3页
癫痫属于中医学"痫病"范畴,发病机制以风痰阻络证多见,诸多医家采用化痰息风法治疗癫痫取得较好效果。本文搜集近年来有关化痰息风法治疗癫痫的文献进行综述。
关键词 癫痫 化痰息风法 中医药疗法 综述
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半夏治疗癫痫的网络药理学机制研究 被引量:4
6
作者 李欢 陈静 +6 位作者 卢玲 廖现秋 汪顺贵 玉倩 李华霞 秦红玲 刁丽梅 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第5期90-93,I0026-I0028,共7页
目的基于网络药理学预测半夏治疗癫痫的潜在有效成分及作用机制。方法通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)检索半夏的有效成分,利用中药系统药理学分析平台数据库(TCMSP)筛选半夏的有效成分,并收集其对应的作用靶标;通过GeneCards、OMIM... 目的基于网络药理学预测半夏治疗癫痫的潜在有效成分及作用机制。方法通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)检索半夏的有效成分,利用中药系统药理学分析平台数据库(TCMSP)筛选半夏的有效成分,并收集其对应的作用靶标;通过GeneCards、OMIM等数据库筛选出癫痫的靶标。运用Cytoscape软件构建半夏治疗癫痫的"药物-活性成分-疾病-靶标"网络,通过STRING数据库构建靶标蛋白相关作用网络并进行关键靶标的生物功能注释及通路分析。结果半夏8个有效成分通过干预23个靶标、81条通路发挥治疗癫痫的作用。网络分析显示半夏中24-乙基胆甾醇-4-烯-3-酮、胍、黄芩素、黄芩苷、β-谷甾醇、豆甾醇等8个活性成分通过CASP3、CASP8、CASP9、VEGFA、ESR1、HIF1A和BCL2等20个共有靶点和人类免疫缺陷病毒1感染通路、弓形虫病通路、细胞凋亡通路、p53信号通路、HIF-1信号通路等81条通路发挥对癫痫的作用。结论半夏对治疗癫痫不仅具有通过多成分作用于多靶标的特点,而且会通过潜在作用靶标之间的相互影响发挥复杂的网络调节作用。 展开更多
关键词 半夏 网络药理学 癫痫 有效成分 靶标
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醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫的系统评价 被引量:2
7
作者 汪顺贵 玉倩 +7 位作者 李华霞 李欢 卢玲 廖现秋 吴琼 李华琼 陈爱玲 刁丽梅 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2019年第10期2140-2150,共11页
目的系统评价醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫。方法检索PubMed、Embase以及中国知网数据库、万方数据库、维普数据库中关于醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫的临床随机对照试验,按照Cochrane协作网的系统评价要求,制定... 目的系统评价醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫。方法检索PubMed、Embase以及中国知网数据库、万方数据库、维普数据库中关于醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫的临床随机对照试验,按照Cochrane协作网的系统评价要求,制定纳入及排除标准,按照改良的Jadad量表对文献进行质量评价,绘制基本信息表,提取数据,使用RevMan5.3软件进行Meta分析,绘制偏倚风险图、森林图及漏斗图。结果共有20项研究被纳入,总病例数1714例。Meta分析结果提示醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫在提高总有效率、减少脑电图痫样放电数、痫样放电累及的导联数以及改善相关生活质量方面均优于单纯服用抗癫痫药物治疗的对照组患者。不良反应方面,观察组癫痫患者的神经系统和消化系统不良反应均明显低于对照组患者,而两组的皮肤不良反应无明显差异。结论醒脑静注射液辅助治疗脑卒中后继发性癫痫安全有效,但因研究方法质量学的限制,有待于高质量、大样本的临床随机试验提供循证依据。 展开更多
关键词 醒脑静 醒脑静注射液 脑卒中后继发性癫痫 有效性 安全性 系统评价 荟萃分析
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柴胡疏肝汤治疗癫痫的研究现状 被引量:4
8
作者 卢玲 刁丽梅 +1 位作者 李欢 廖现秋 《中西医结合心脑血管病杂志》 2021年第19期3351-3354,共4页
从柴胡疏肝汤方及其药理研究、癫痫的分类、柴胡疏肝汤的临床应用及其基础试验研究进展等多方面综述柴胡疏肝汤治疗癫痫的研究现状;癫痫的发病通常涉及肝、脾、心、肾等脏腑,柴胡疏肝汤是临床常用于治疗癫痫的方剂,具有疏肝理气、活血... 从柴胡疏肝汤方及其药理研究、癫痫的分类、柴胡疏肝汤的临床应用及其基础试验研究进展等多方面综述柴胡疏肝汤治疗癫痫的研究现状;癫痫的发病通常涉及肝、脾、心、肾等脏腑,柴胡疏肝汤是临床常用于治疗癫痫的方剂,具有疏肝理气、活血止痛之功效,对癫痫有明确的疗效。 展开更多
关键词 癫痫 柴胡疏肝汤 抑郁 从肝论治 综述
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中药有效成分多靶点治疗癫痫的研究进展 被引量:4
9
作者 李欢 廖现秋 +4 位作者 卢玲 汪顺贵 玉倩 李华霞 刁丽梅 《中西医结合心脑血管病杂志》 2021年第4期583-586,共4页
癫痫是由多种原因引起大脑神经元突发性异常放电,导致短暂性大脑功能障碍的一种慢性疾病,中药及有效成分治疗癫痫疗效确切,具有多靶点、多途径的优势,发挥保护神经元的作用,有效减少癫痫发作复发率。现综述中药有效成分在调控海马区域... 癫痫是由多种原因引起大脑神经元突发性异常放电,导致短暂性大脑功能障碍的一种慢性疾病,中药及有效成分治疗癫痫疗效确切,具有多靶点、多途径的优势,发挥保护神经元的作用,有效减少癫痫发作复发率。现综述中药有效成分在调控海马区域相关蛋白及因子、清除氧自由基、调节氨基酸及炎性因子等多靶点及机制治疗癫痫的研究进展,为癫痫的治疗及中医药的临床应用提供依据。 展开更多
关键词 癫痫 中药有效成分 多靶点 研究进展 综述
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中西医结合治疗癫痫伴抑郁Meta分析 被引量:3
10
作者 玉倩 李华霞 +5 位作者 汪顺贵 卢玲 李欢 廖现秋 刁丽梅 仇小强 《河南中医》 2020年第4期557-565,共9页
目的:系统评价中西医结合治疗癫痫伴抑郁患者的临床疗效。方法:计算机检索中国知网、万方数据库、中国医学生物文献数据库、维普资讯、PubMed及Web of Science等中英文数据库,筛选出自各数据库建库以来至2018年7月关于中西医结合治疗癫... 目的:系统评价中西医结合治疗癫痫伴抑郁患者的临床疗效。方法:计算机检索中国知网、万方数据库、中国医学生物文献数据库、维普资讯、PubMed及Web of Science等中英文数据库,筛选出自各数据库建库以来至2018年7月关于中西医结合治疗癫痫伴抑郁的临床随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)研究,根据系统评价标准依次进行文献质量评价和Meta分析。结果:纳入14个研究,共1183例患者。Meta分析结果显示:中西医结合治疗癫痫伴抑郁在降低HAMD评分、提高QLOIE-31评分方面优于单纯西药治疗。癫痫发作频次改善率效应值合并量OR=3.53,95%CI(1.73,7.17),Z=3.48(P=0.0005),差异有统计学意义(P<0.05)。临床安全性效应值合并量OR=0.59,95%CI(0.35,0.98),Z=2.03(P=0.04),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中西医结合足疗程治疗癫痫伴抑郁临床疗效优于单纯西药治疗,且临床安全性良好,但因纳入研究数量和质量有限,上述结论尚待高质量的RCT研究验证。 展开更多
关键词 癫痫 抑郁 中西医结合疗法 META分析
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基于定痫汤干预后癫痫小鼠海马区miRNA-204表达水平的变化及脑电图变化的研究
11
作者 卢玲 刁丽梅 +1 位作者 李欢 廖现秋 《中医药学报》 CAS 2022年第2期33-38,共6页
目的:研究定痫汤干预后癫痫小鼠脑电图的变化、小鼠海马区miRNA-204表达水平的变化以及自噬相关蛋白ATG7、LC3II的表达变化,探讨其可能的作用机制。方法:取50只雄性昆明小鼠,其中40只随机分成模型组、生理盐水组、卡马西平组和定痫汤组... 目的:研究定痫汤干预后癫痫小鼠脑电图的变化、小鼠海马区miRNA-204表达水平的变化以及自噬相关蛋白ATG7、LC3II的表达变化,探讨其可能的作用机制。方法:取50只雄性昆明小鼠,其中40只随机分成模型组、生理盐水组、卡马西平组和定痫汤组,每组10只,另外10只为备用小鼠。首先对各组实验动物进行灌胃给药两周,模型组和生理盐水组均予20 mL·kg^(-1)·d^(-1)生理盐水进行灌胃;定痫汤组予7 g·kg^(-1)·d^(-1)定痫汤药液进行灌胃;卡马西平组予30 mg·kg^(-1)·d^(-1)卡马西平混悬液灌胃。然后,通过盐酸匹罗卡品构建小鼠急性癫痫模型。其次,对各组小鼠进行行为学和脑电图观察。最后,将小鼠断头取脑,采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠海马区miRNA-204表达水平的变化;并且通过免疫组化法检测自噬相关蛋白ATG7、LC3II的表达变化。结果:与生理盐水组相比,模型组小鼠癫痫发作的频率多、持续时间长,小鼠脑电图尖波、棘波、棘慢波明显增多,海马区miRNA-204的表达明显下调(P<0.01),自噬相关蛋白ATG7、LC3II的表达明显增多(P<0.01)。与模型组相比,使用定痫汤干预后小鼠癫痫发作频率减少,小鼠脑电图痫性波形减少,小鼠海马区miRNA-204的表达升高(P<0.01),自噬相关蛋白ATG7、LC3II的表达下调(P<0.01)。结论:定痫汤可以减少小鼠癫痫发作的频率,减少小鼠脑电图的痫性波形。其可能是通过上调miRNA-204的表达,抑制自噬相关蛋白ATG7、LC3II的表达,拮抗小鼠海马神经元过度自噬,从而发挥抗癫痫的作用。 展开更多
关键词 定痫汤 癫痫 miRNA-204 脑电图 ATG7 LC3II
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基于网络药理学探讨天南星治疗癫痫的作用机制 被引量:3
12
作者 李欢 卢玲 +4 位作者 廖现秋 何乾超 陈炜 梁霜 刁丽梅 《西部中医药》 2022年第10期23-28,共6页
目的:基于网络药理学探寻天南星治疗癫痫的潜在有效成分及作用机制。方法:根据口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%、类药性(drug likeness,DL)从中药系统药理学技术平台(tra-ditional Chinese medicine systems pharmacology... 目的:基于网络药理学探寻天南星治疗癫痫的潜在有效成分及作用机制。方法:根据口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%、类药性(drug likeness,DL)从中药系统药理学技术平台(tra-ditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)中筛选出天南星的活性成分、作用靶点。通过GeneCards、OMIM数据库寻找癫痫的相应靶点,将天南星作用靶点与癫痫相关靶点取交集,筛选出天南星治疗癫痫的活性成分及作用靶点。运用Cytoscape 3.7.2软件构建天南星治疗癫痫的“药物-活性成分-疾病靶点”网络。通过STRING数据库构建靶标蛋白相关作用网络并进行关键靶标的生物功能注释及通路分析。结果:1)天南星中有效活性成分有6种,作用于26个癫痫靶点;关键活性成分包括8、11、14-二十二碳三烯酸甲酯、24-表蛇甾醇、β-谷甾醇、谷甾醇、豆甾醇等。2)网络分析显示天南星治疗癫痫的核心靶点包括CASP3、ADRA1B、JUN、MAOA、CASP8、CASP9、MAOB、PTGS2、SLC6A4、ADRB2、BAX、BCL2、PRKCA等。3)基因富集分析得到GO功能条目84个,主要包括类固醇激素受体活性、核受体活性、转录因子活性、细胞因子活性、细胞因子受体结合、核糖核酸聚合酶二转录因子结合、泛素样蛋白连接酶结合等;KEGG富集通路74条,主要涉及富集在细胞凋亡-多种信号通路、乙型肝炎信号通路、人类免疫缺陷病毒1型感染信号通路、p53信号通路、铂耐药信号通路、细胞凋亡信号通路、EB病毒感染信号通路、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)信号通路、人类巨细胞病毒感染信号通路等通路。结论:基于网络药理学探讨天南星治疗癫痫的作用靶点及信号通路,为进一步研究其治疗癫痫的作用机制提供了新的线索。 展开更多
关键词 癫痫 网络药理学 天南星 有效成分 机制
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加味柴胡疏肝汤调控miRNA-204对癫痫小鼠海马自噬的影响 被引量:11
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作者 汪顺贵 玉倩 +10 位作者 李华霞 李欢 卢玲 廖现秋 吴琼 李华琼 陈爱玲 刁丽梅 何乾超 蔡伦 梁霜 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第22期1-7,共7页
目的:观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马微小非编码RNA 204(miRNA-204)的表达影响,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法:将60只小鼠随机分为6组:正常组,模型组(盐酸匹罗卡品180 mg·kg-1),加味柴胡疏肝汤组(7 g·kg-1·d-1)... 目的:观察加味柴胡疏肝汤对癫痫小鼠海马微小非编码RNA 204(miRNA-204)的表达影响,探讨其发挥神经保护作用的机制。方法:将60只小鼠随机分为6组:正常组,模型组(盐酸匹罗卡品180 mg·kg-1),加味柴胡疏肝汤组(7 g·kg-1·d-1),加味柴胡疏肝汤+miRNA-204模拟物组(7 g·kg-1·d-1+2μL),加味柴胡疏肝汤+miRNA-204抑制物组(7 g·kg-1·d-1+2μL),卡马西平组(30 mg·kg-1·d-1),各灌胃2周;采用匹罗卡品使小鼠致痫,6组分别灌胃给药、抑制及过表达miRNA-204后,处死小鼠,取其海马组织,观察每组的指标情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠海马miRNA-204的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3),自噬相关标志性蛋白7(ATG7)的表达情况,苏木素-伊红(HE)染色观察每组小鼠海马病理学变化;透射电镜观察各组小鼠海马组织自噬情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠miRNA-204表达显著降低(P<0.01),海马C1区病理改变最明显,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著升高(P<0.01),自噬小体数量最多;与模型组比较,加味柴胡疏肝组小鼠海马组织miRNA-204表达明显升高(P<0.05),海马C1区病理改变减轻,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达明显降低(P<0.05),自噬小体数量减少;加味柴胡疏肝汤+miRNA-204模拟物组小鼠海马组织miRNA-204表达显著升高(P<0.01),海马C1区病理改变最轻,ATG7,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达显著降低(P<0.01),自噬小体数量最少;与加味柴胡疏肝汤比较,加味柴胡疏肝汤+miRNA-204抑制物组上述指标变化趋势相同,变化幅度明显减少(P<0.05)。结论:加味柴胡疏肝汤可以改善癫痫小鼠海马组织病理改变,其作用机制可能是通过升高癫痫小鼠海马miRNA-204的表达,抑制神经元过度自噬,减少细胞凋亡。 展开更多
关键词 柴胡疏肝汤 癫痫 miRNA-204 自噬
原文传递
加味柴胡疏肝汤调控miR-204对急性癫痫小鼠海马AKT/mTOR/P70S6K通路和脑电图的影响 被引量:10
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作者 汪顺贵 玉倩 +7 位作者 李华霞 李欢 卢玲 廖现秋 陈炜 宋曦 秦红玲 刁丽梅 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期273-276,共4页
目的探讨加味柴胡疏肝汤是否通过调节miR-204影响急性癫痫小鼠AKT/mTOR/P70S6K信号通路以及脑电图。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组、模型组、加味柴胡疏肝汤组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 mimic组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 in... 目的探讨加味柴胡疏肝汤是否通过调节miR-204影响急性癫痫小鼠AKT/mTOR/P70S6K信号通路以及脑电图。方法将60只小鼠随机分为6组:生理盐水组、模型组、加味柴胡疏肝汤组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 mimic组、加味柴胡疏肝汤+miRNA-204 inhibitor组、卡马西平组。采用匹罗卡品使小鼠致痫,分别予加味柴胡疏肝汤灌胃、抑制及过表达miR-204后观察每组的指标情况;采用脑电图仪检测每组小鼠脑电波;RT-PCR检测每组小鼠海马组织miR-204的表达;Western Blot检测每组小鼠通路蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达情况。结果与生理盐水组相比,模型组小鼠脑电图痫性波明显增多,miR-204表达明显降低,通路相关蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达明显下降;与模型组相比,使用加味柴胡疏肝汤后,小鼠脑电图痫性波减少,小鼠海马组织miR-204表达明显升高,通路相关蛋白p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K表达升高;使miR-204过表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度增大;抑制miR-204表达后,与单纯使用柴胡疏肝汤相比,上述指标变化趋势相同,变化幅度减少。结论加味柴胡疏肝汤通过升高miR-204的表达,激活AKT/mTOR/P70S6K通路,使其通路蛋白磷酸化,发挥神经保护的作用,减少痫性波,达到治疗癫痫的目的。 展开更多
关键词 加味柴胡疏肝汤 癫痫 miR-204 AKT/mTOR/P70S6K 脑电图
原文传递
基于网络药理学探讨柴胡治疗癫痫的作用机制 被引量:3
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作者 卢玲 梁妮 +5 位作者 廖现秋 李欢 李明芬 秦红玲 宋曦 刁丽梅 《中医学报》 CAS 2021年第8期1744-1750,共7页
目的:通过计算机网络药理学技术分析柴胡治疗癫痫的活性化合物及其作用靶点,并预测其作用机制。方法:通过中药系统药理学分析平台筛选出柴胡的化学成分和靶点,利用GeneCards和OMIM数据库筛选出癫痫相关的靶点,基于在线软件venny 2.1.0... 目的:通过计算机网络药理学技术分析柴胡治疗癫痫的活性化合物及其作用靶点,并预测其作用机制。方法:通过中药系统药理学分析平台筛选出柴胡的化学成分和靶点,利用GeneCards和OMIM数据库筛选出癫痫相关的靶点,基于在线软件venny 2.1.0分析获得108个柴胡与癫痫的共同靶点,并使用Cytoscape软件构建“柴胡活性化合物-靶点”网络图,STRING数据库构建蛋白互作网络(PPI网络),并进行PPI网络拓扑分析筛选出核心靶点,利用clusterProfiler对108个共同靶点进行GO分析和KEGG分析,再通过Cytoscape软件构建KEGG关系网络。结果:从数据库中筛选出17个柴胡的活性成分,对应靶点166个,包括与癫痫相关的108个靶点。对共同靶点进行PPI网络拓扑分析,筛选获得12个核心靶点。通过GO分析获得富集前20位的GO条目,KEGG分析除了获得富集前20位的通路外,还获得了与癫痫密切相关的MAPK信号通路和细胞凋亡通路等。结论:本研究初步揭示了柴胡治疗癫痫的可能作用机制,推测柴胡可能通过多成分、多靶点、多信号通路共同起到治疗癫痫的作用,为进一步深入研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 柴胡 癫痫 靶点 通路 网络药理学
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小柴胡汤治疗癫痫的网络药理学研究 被引量:4
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作者 卢玲 李欢 +4 位作者 廖现秋 汪顺贵 玉倩 李华霞 刁丽梅 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2020年第22期2296-2302,共7页
目的:通过中药网络药理学技术研究小柴胡汤治疗癫痫的活性成分、作用靶标、靶标的相互作用关系、靶标的生物学功能及其作用的通路,探讨其可能的作用机制。方法:在中药系统药理学数据库和分析平台上筛选出小柴胡汤的活性成分,并根据活性... 目的:通过中药网络药理学技术研究小柴胡汤治疗癫痫的活性成分、作用靶标、靶标的相互作用关系、靶标的生物学功能及其作用的通路,探讨其可能的作用机制。方法:在中药系统药理学数据库和分析平台上筛选出小柴胡汤的活性成分,并根据活性成分检索其成分作用的靶标。利用在线文本挖掘服务器(GeneCards)和人类孟德尔遗传数据库(OMIM)查询与癫痫相关的靶标,并使用在线软件venny 2.1对癫痫相关的靶标与小柴胡汤作用的靶标取交集,得到小柴胡汤治疗癫痫的潜在靶标156个。将潜在靶标导入Cytoscape软件,初步获得"成分-靶标"关系网络;同时基于clusterProfiler包对潜在靶标进行基因本体(GO)功能富集分析、基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。并根据KEGG富集分析结果,构建"潜在靶标-KEGG通路"关系网络。此外,为了解靶标之间的相互作用关系,把潜在靶标导入STRING在线数据库,构建蛋白-蛋白相互作用网络(PPI网络),将关系网络编排导入Cytoscape软件进行拓扑结构分析获得核心子网络。结果:小柴胡汤的活性成分有162种,主要包括:槲皮素、汉黄芩素、黄芩苷、山柰酚、人参皂苷Rh2、异鼠李素、柚皮素、木蝴蝶素等;作用的靶标有156个。其主要作用的途径有:IL-17信号通路、细胞凋亡、C型凝集素受体信号通路、内分泌的阻力等。结论:小柴胡汤治疗癫痫体现了中药复方多成分、多靶标、多通路共同作用的特点。本研究进一步拓宽了小柴胡汤在神经系统疾病方面的应用,为进一步的实验研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 小柴胡汤 癫痫 网络药理学 靶标 通路
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