应用RT-PCR-RFLP鉴别2014年新余市麻疹病毒感染病例

目的引进一种区别麻疹病毒疫苗株与野生株的简单方法,用以检测新余市麻疹病毒感染病例标本。方法新余市8份麻疹病毒感染病例标本和1株S191麻疹疫苗株经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒H基因部分片段,应用限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)方法进行酶切分析。结果 S191麻疹疫苗株被AflII限制性酶酶切成2个片段,8份麻疹病毒感染病例标本均未酶切消化。结论新余8例麻疹病例全部为麻疹野病毒所感染;RT-PCR-RFLP方法简单、有效,非常适合条件受限的实验室使用。

ELISA法和RT-PCR法在麻疹病毒检测中的应用对比

目的:对比分析酶联免疫吸附试验(ELISA)法和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法在麻疹病毒检测中的应用。方法:由本市各医院采集并送至本中心接受麻疹病毒检测的50例疑似麻疹患者为研究对象,所有患者标本均采用ELISA法和RT-PCR法进行麻疹病毒检测。对比两种检测方式在不同出疹时间段所取标本的阳性率、检测水平。结果:在50例疑似麻疹患者中,ELISA法检测麻疹病毒Ig M抗体阳性22例,Ig M抗体阴性28例,阳性率为44.00%;RT-PCR法检测,麻疹病毒Ig M抗体阳性26例,Ig M抗体阴性24例,阳性率为52.00%,两种检测方式阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。患者出疹第1天收集的标本,采用ELISA法检测阳性率为60.00%,采用RT-PCR法检测阳性率为80.00%。随着患者采样时间不断改变,两种检测方式的阳性率均逐渐降低,两种方法检测的阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。50例麻疹疑似患者同一时间段采集血清和咽拭子标本,24例患有免疫史,不伴随有免疫史亦或者是不详的共26例。结论:RT-PCR法适用于出疹时间在2 d之内疑似麻疹患者的临床诊断中,而ELISA法则适合使用在出疹时间在2 d或以上疑似麻疹患者的临床检测中。

2013-2015年新余市腹泻症候群细菌性病原谱及流行特征

目的了解新余市腹泻症候群细菌性病原谱的构成及流行特征,为腹泻病临床诊断、治疗用药及制定防控措施提供依据。方法 2013-2015年,按国家科技重大专项《腹泻病症候群检测技术方案》,采集监测哨点医院门诊的腹泻患者粪便标本进行分离鉴定。结果 147份腹泻病例粪便标本中分离阳性菌株24份,阳性率16.33%。其中非伤寒沙门菌12份(50.00%),致泻大肠埃希菌8份(33.33%),嗜水气单胞菌3份(12.50%),霍乱弧菌1份(4.17%)。阳性率最高为6月(38.46%),其次为8月(30.77%),5-9月阳性数占83.33%。男性阳性率11.69%,女性阳性率21.43%,差异无统计学意义(P=0.11)。各年龄组阳性率以20~29岁组最高,≤19岁龄组最低,不同年龄组间阳性率差异有统计学意义(P=0.04)。不同职业以商业服务人员阳性率最高(40.00%),学生最低(5.26%),不同职业人群阳性率差异无统计学意义(P=0.62)。结论非伤寒沙门菌和致泻性大肠埃希菌是新余市细菌性腹泻的主要病原菌。

新余市2012—2014年布鲁氏菌病监测结果分析

目的了解新余市布鲁氏菌病的流行情况,为制定新余市布病控制策略提供科学依据。方法 2012—2014年对从事畜牧养殖、屠宰,羊肉加工、销售等职业的布鲁氏菌病高危人群进行血清学检测及流行病学调查,并将检测出阳性的病人和动物的血清送国家疾病预防控制中心进行病原学检测。用描述流行病学方法对监测结果进行分析。结果共监测高危人群258人,感染率为7.75%,发病时间主要集中在春夏季,发病人群为中老年人,暴露方式主要为羊群的饲养与宰杀、羊肉加工销售以及食用羊肉。结论羊群是主要的传染源,传播途径主要为经皮肤黏膜和消化道传播。控制新余市布鲁氏菌病需加强综合防治,清除传染源,切断传播途径,对高危人群进行宣传干预。

QuEChERS提取-气相色谱法测定蔬菜中的10种有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留量

目的建立气相色谱法测定蔬菜中的10种有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留量的方法。方法样品经组织捣碎、乙腈提取、Qu ECh ERS净化、正己烷定容,配制成10.0μg/ml的混合标准工作液,采用GC检测10种有机磷类和氨基甲酸酯类农药。结果有机磷类农药的LOD为0.001 mg/kg^0.007 mg/kg,LOQ为0.003 mg/kg^0.021 mg/kg;氨基甲酸酯类农药的LOD为0.001 mg/kg^0.004 mg/kg,LOQ为0.003 mg/kg^0.012 mg/kg。平均加标回收率为79.3%~93.1%,相对标准偏差(RSD)为4.9%~15.3%。50份蔬菜样品中,涕灭威检出3份,涕灭威砜检出1份,甲胺磷检出8份,乙酰甲胺磷检出4份,氧乐果检出6份,3-羟基克百威检出1份,其余农药残留指标均未检出。结论该方法灵敏度高,回收率高,检出限低,符合分析要求,适合蔬菜中10种有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留检测的要求。

QuEChERS提取-气相色谱质谱法测定蔬菜中的21种有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类农药残留量

目的建立气相色谱质谱法测定蔬菜中的21种有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类农药残留量的方法。方法样品经组织捣碎、乙腈提取、QuEChERS净化、正己烷定容,同时以环氧七氯为内标,配制成1.0μg/ml的混合标准工作液,采用GC-MS检测21种有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类农药。结果有机磷类农药的LOD为0.001 mg/kg^0.007 mg/kg,LOQ为0.003 mg/kg^0.021 mg/kg;氨基甲酸酯类农药的LOD为0.001 mg/kg^0.004 mg/kg,LOQ为0.003 mg/kg^0.012 mg/kg;拟除虫菊酯类农药的LOD为0.001 mg/kg^0.008 mg/kg,LOQ为0.003 mg/kg^0.024 mg/kg。平均加标回收率为61.9%~99.9%,相对标准偏差(RSD)为3.5%~15.0%。50份蔬菜样品中,毒死蜱检出2份,水胺硫磷检出1份,克百威检出3份,联苯菊酯检出2份,甲氰菊酯检出1份,氯氟氰菊酯检出12份,氟氯氰菊酯检出1份,氯氰菊酯检出7份,其余农药残留指标均未检出。结论该方法灵敏度高,回收率高,检出限低,符合分析要求,适合蔬菜中21种有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类农药残留检测的要求。

微波消解-原子荧光光度法测定婴幼儿食品与乳及乳制品中的汞和砷

目的建立婴幼儿食品与乳及乳制品中汞和砷的原子荧光光度检测法。方法样品经微波消解后,原子荧光光度法检测。结果汞(Hg)在0.5μg/L^10.0μg/L和砷在2.0μg/L^20.0μg/L时均具有良好的线性关系,相关系数(r)均>0.999 0。LOD均为0.15μg/kg^10.00μg/kg,LOQ范围为0.45μg/kg^30.00μg/kg。平均加标回收率为86.0%~97.3%,RSD为3.1%~6.4%。525份婴幼儿食品与乳及乳制品中,婴幼儿食品298份,汞检出50份,含量为0.000 48 mg/kg^0.017 mg/kg;砷检出51份,含量为0.034 mg/kg^0.151 mg/kg。液态乳137份,汞检出26份,含量为0.000 51 mg/kg^0.008 mg/kg;砷检出37份,含量为0.042 mg/kg^0.094 mg/kg。婴幼儿食品90份,汞检出68份,含量为0.000 5 mg/kg^0.022 mg/kg;砷检出45份,含量为0.048 mg/kg^0.301 mg/kg。结论该方法灵敏度高,回收率高,检出限低,适合婴幼儿食品与乳及乳制品中汞和砷的检测。

QuEChERS提取-气相色谱-质谱法测定豆芽中的7种植物生长调节剂残留量

目的建立气相色谱-质谱法测定豆芽中的7种植物生长调节剂残留量的方法。方法样品经组织捣碎、乙腈提取、甲醇定容后,采用GC-MS检测2,4-D-乙酯和2,4-D-丁酯;另取甲醇定容液1 ml,经QuEChERS净化、MCS柱过滤、三氟化硼甲醇进行衍生后,采用GC-MS检测4-氯苯氧乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、α-萘乙酸、吲哚乙酸和吲哚丁酸。结果 7种植物生长调节剂在0.5μg/ml^10μg/ml时具有良好的线性关系,相关系数(r)均≥0.991 5。7种植物生长调节剂的LOD为0.01 mg/kg,LOQ为0.03 mg/kg,平均加标回收率为92.2%~97.4%,相对标准偏差(RSD)为4.8%~10.1%。276份豆芽样品中,4-氯苯氧乙酸检出93份,吲哚乙酸检出70份,吲哚丁酸检出26份;2,4-D、2,4-D-乙酯、α-萘乙酸和2,4-D-丁酯4个指标在所有豆芽样品中均未检出。结论该方法灵敏度高,回收率高,检测限低,符合分析要求,适合豆芽中7种植物生长调节剂残留检测的要求。

微波消解电感耦合等离子体质谱法测定蔬菜中的6种有害元素

目的建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定蔬菜中铅、镉、总砷、铬、镍和总汞的方法。方法样品经微波消解后,利用ICP-MS法检测。结果 6种元素在1.0μg/L^100.0μg/L时,有良好的线性关系,相关系数(r)均≥0.999 1。LOD为0.3μg/kg^13.0μg/kg,LOQ为0.9μg/kg^39.0μg/kg。平均加标回收率为90.8%~99.3%,RSD为2.6%~10.1%。50份蔬菜样品中,6种元素均检出。根据GB 2762—2012《食品安全国家标准食品中污染物限量》,对江西省萍乡、宜春、吉安和新余4地市的50份蔬菜样品进行检测,检出4份铅超标;2份总汞超标;2份铬超标;1份镉超标。结论该方法灵敏度高,回收率高,检出限低,符合分析要求,适合蔬菜中这6种有害元素的检测要求。

酶联免疫吸附试验和荧光定量PCR在麻疹检测中的应用比较分析

目的通过检测麻疹疑似病例,分析比较酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量PCR法(RT-PCR),为检测方法的选择提供科学依据,以尽早确诊和控制疾病。方法应用ELISA法检测新余市2014年-2016年161例疑似麻疹血清标本中麻疹病毒Ig M抗体,RT-PCR检测其咽拭子样本中麻疹病毒RNA。结果 161例疑似病例中,ELISA法检测麻疹病毒Ig M抗体阳性29例,阳性率为18.01%;RT-PCR检测麻疹病毒RNA阳性44例,阳性率为27.33%;实验室确诊总阳性数45例,总阳性率为27.95%。2种方法的检测结果差异有统计学意义(χ~2=3.534,P<0.05),ELISA法和RT-PCR法的灵敏度分别为64.44%、97.78%。在出疹后3 d内,ELISA法检测的阳性率显著低于RT-PCR法,差异有统计学意义(χ~2=3.899,P<0.05)。结论 RT-PCR的检测阳性率和灵敏度显著高于ELISA法,RT-PCR法可用于麻疹早期的快速诊断;同时应规范完善麻疹疫苗的接种。

固相萃取-气相色谱质谱法同时测定水果中五氯硝基苯和百菌清残留量

目的建立固相萃取-气相色谱质谱法(GC/MS)同时测定水果中五氯硝基苯和百菌清残留量的方法。方法样品经组织捣碎于离心管中,加入环氧七氯内标溶液,经氯化钠、乙腈和无水硫酸钠提取,提取液经Florisil柱净化,采用丙酮+正己烷溶液洗脱后氮吹至近干,用正己烷定容,配制成5.0 mg/L的混合标准工作液,进行GC/MS检测五氯硝基苯和百菌清农药。结果五氯硝基苯和百菌清的LOD分别为0.001 mg/kg和0.002 mg/kg,LOQ分别为0.003 mg/kg和0.006 mg/kg,平均加标回收率为81.2%~113.1%,相对标准偏差(RSD)为6.7%~12.3%。119份水果样品中,未检出五氯硝基苯;2份猕猴桃检出百菌清,含量分别为0.012 mg/kg和0.031 mg/kg,均未超标。结论该方法灵敏度高,回收率高,检出限低,符合分析要求,适合水果中五氯硝基苯和百菌清农药残留检测的要求。

水产品污染引起霍乱暴发疫情的检验和调查分析

目的分析霍乱疫情暴发的原因,为霍乱防控工作提供科学依据,及时有效处置疫情,减少霍乱疫情的暴发,保障人民身体健康。方法参照《霍乱防治手册》(第6版)标准检验,采用描述性分析对霍乱疫情进行流行病学调查与实验室检验结果分析。结果此次疫情从聚餐的同批次甲鱼、牛蛙活体样本中检出7份O139群霍乱弧菌阳性标本,阳性率为4.14%(7/169),1份餐具涂抹样本为阳性,阳性率为4.35%(1/23)。暴露人口653人,发病6人,罹患率为0.92%,带菌者28人,感染率为4.29%,未出现死亡病人。结论这次疫情为食源性霍乱疫情暴发,建议相关部门加强对农村集体聚餐的卫生监督与管理,加强对水产品市场的日常监管和检测。

气相色谱-质谱法测定街头流动餐饮蔬菜及其制品中的农药残留

目的建立街头流动餐饮蔬菜及其制品中的农药残留的气相色谱-质谱分析方法。方法样品经乙腈提取、SILICA/PSA柱净化、丙酮定容后用气相色谱-质谱仪进行测定。结果加标的20种农药样品测得的平均回收率为66.1%~105.6%,相对标准偏差（RSD）为3.70%~10.75%。93份样品中,甲萘威检出2份,克百威检出5份,毒死蜱检出4份,三唑磷检出11份,联苯菊酯检出1份,甲氰菊酯检出29份,氯氟氰菊酯检出21份,其余农药残留指标均未检出。生菜中三唑磷、甲氰菊酯和氯氟氰菊酯的检出数高于土豆丝和咸菜。2份咸菜中的克百威超标,2份土豆丝中的氯氟氰菊酯超标。结论本法选择性好、灵敏度高、回收率高、检出限低,符合分析要求,适合街头流动餐饮中有机磷类、氨基甲酸乙酯类和拟除虫菊酯类农药残留的检测。

2007年-2016年新余市麻疹监测结果及流行病学分析

目的了解新余2007年-2016年麻疹监测情况及流行状况,为消除麻疹提供科学依据。方法按照《全国麻疹监测方案(2009年)》进行监测;流行病学分析采用描述法,SPSS 19. 0进行数据分析。结果 2007年-2016年新余市报告的疑似麻疹病例共609例,年均报告发病率为5. 44/10万,其中确诊麻疹病例107例,占疑似病例的17. 57%,年均发病率为0. 96/10万;每年3月-8月份为发病高峰期。确诊麻疹病例中,以15岁～30岁为主,占42. 99%;无免疫史者占59. 81%;县区年均发病率差异不明显。结论 2007年-2013年新余市麻疹消除工作取得重大进展,而2016年又有所反弹。应进一步加强麻疹监测和成人的疫苗补种工作,提高适龄儿童的疫苗接种及时率。

溶剂吸收-气相色谱质谱法测定水果中二硫代氨基甲酸盐(酯)类残留量

目的建立溶剂吸收-气相色谱质谱法(GC/MS)测定水果中二硫代氨基甲酸盐(酯)类残留量的方法。方法样品经组织捣碎于顶空瓶中,加入SnCl2·HCl溶液,放入水浴中反应2 h后取出冷却,用注射器加入正己烷,振摇萃取后离心取上清液,配制成5.0 mg/L的标准工作液,进行GC/MS检测二硫代氨基甲酸盐(酯)类农药。配制成5.0 mg/L的标准工作液,进行GC/MS检测二硫代氨基甲酸盐(酯)类农药。结果二硫代氨基甲酸盐(酯)类农药的LOD为0.003 mg/kg,LOQ为0.01 mg/kg。平均加标回收率为75.3%~105.1%,相对标准偏差(RSD)为5.9%~8.2%。119份水果样品中,二硫代氨基甲酸(盐)酯类检出16份,均未超标,含量为0.015 mg/kg^0.714 mg/kg。结论该方法灵敏度高,回收率高,检出限低,符合分析要求,适合水果中二硫代氨基甲酸(盐)酯类农药残留检测的要求。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定水果中11种杀菌剂残留量

目的建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定水果中11种杀菌剂残留量的方法。方法样品经组织捣碎于离心管中,加入乙腈,用高速组织捣碎机制备成匀浆,加入氯化钠,振荡,待液液分层后加入无水硫酸镁,迅速旋上瓶盖,振荡涡旋后离心,取上清液,加PSA涡旋混匀后离心,取上清液过滤膜,配制成10种杀菌剂(200μg/ml)和腐霉利(400μg/ml)标准工作液,进行HPLC/MS/MS检测11种杀菌剂。结果 11种杀菌剂的检出限为0. 001 mg/kg^0. 007 mg/kg,定量限为0. 003 mg/kg^0. 021 mg/kg。平均加标回收率为78. 2%~118. 2%,相对标准偏差(RSD)为4. 3%~13. 8%。119份水果样品中,杀菌剂检出42份,均未超标,含量为0. 008 94 mg/kg^1. 48 mg/kg。结论该方法灵敏度高,回收率高,检出限低,符合分析要求,适合水果中11种杀菌剂残留检测的要求。

基于碰撞/反应池技术的电感耦合等离子体质谱法测定米粉中9种元素

目的建立米粉中钛(Ti)、钒(V)、铬(Cr)、锰(Mn)、镍(Ni)、铜(Cu)、砷(As)、镉(Cd)和铅(Pb)的电感耦合等离子体质谱检测方法。方法米粉样品经微波消解后,采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对9种元素进行测定。结果 9种元素的线性关系良好(r=0. 999),加标回收率为70. 3%～119. 5%,相对标准偏差(RSD)<10%。10份米粉样品中,9种元素均检出,米粉中Ti、V、Cr、Mn、Ni、Cu、As、Cd和Pb的含量分别为1. 24 mg/kg～1. 99 mg/kg、0. 004 2 mg/kg～0. 041 mg/kg、0. 92 mg/kg～1. 15 mg/kg、1. 049 mg/kg～4. 8 mg/kg、0. 32 mg/kg～0. 57 mg/kg、0. 48 mg/kg～2. 65 mg/kg、0. 009 mg/kg～0. 025 mg/kg、0. 044 mg/kg～0. 18 mg/kg和0. 039 mg/kg～0. 12 mg/kg,根据GB 2762—2017《食品安全国家标准食品中污染物限量》,有7份样品中的Cr超标,含量为1. 033 mg/kg～1. 15 mg/kg。结论本法灵敏、准确、快速,可用于米粉中9种元素的测定。