成人弥漫性低级别胶质瘤相关性癫痫的研究现状

癫痫是弥漫性低级别胶质瘤的常见症状,如果不加以控制,则会显著降低患者的生活质量,致残致死率高。肿瘤相关性癫痫的发病是多种因素导致的,且癫痫发作也会促进胶质瘤的生长。相比于高级别胶质瘤,低级别胶质瘤具有更高的癫痫发作率,因此控制癫痫发作对于低级别胶质瘤的治疗极其重要。目前,癫痫的治疗主要围绕抗癫痫药物、放化疗及手术治疗展开。本文综述弥漫性低级别胶质瘤相关性癫痫的发病机制及主要治疗方法,并为未来癫痫的个体化治疗提供研究思路。

多模式术中神经电生理监测在显微镜下手术切除脊髓内肿瘤中的应用效果

目的探讨多模式术中神经电生理监测在显微镜下手术切除脊髓内肿瘤中的应用效果。方法回顾性分析11例采用显微镜下手术治疗的脊髓内肿瘤患者的临床资料,患者术中均采用多模式神经电生理监测。比较患者术前、术后2周和1年的McCormick分级。通过复查MRI了解肿瘤切除程度和复发情况。结果11例患者行肿瘤全切除术7例、次全切除术3例、部分切除术1例;所有患者术中均出现躯体感觉诱发电位和/或运动诱发电位报警,其中7例经反复生理盐水冲洗后恢复,4例未能恢复,给予充分止血后终止手术。术后病理结果提示室管膜瘤6例、星型细胞瘤3例、网织状血管母细胞瘤1例、脂肪瘤1例。术后1年,10例患者的症状较术前有不同程度的改善,1例患者病情加重,无死亡病例。所有病例在随访期间复查脊髓MRI均未见复发。结论在颈髓内肿瘤显微镜下切除术中采用多模式神经电生理监测能有效避免或减轻脊髓损伤,提高手术安全性,改善患者预后。

微血管减压术与经皮穿刺半月节球囊压迫术治疗三叉神经痛患者术后口周疱疹和咀嚼肌无力的发生率的比较

目的比较微血管减压术与经皮穿刺半月节球囊压迫术治疗三叉神经痛患者术后口周疱疹和咀嚼肌无力的发生率。方法回顾性分析94例三叉神经痛患者的临床资料,根据手术方法将患者分为A组(经微血管减压术治疗)61例与B组(经皮穿刺半月节球囊压迫术治疗)33例。比较术后3 d两组患者口周疱疹、咀嚼肌无力的发生率。结果A组患者术后3 d口周疱疹、咀嚼肌无力的发生率均低于B组(均P<0.05)。结论相较于经皮穿刺半月节球囊压迫术,微血管减压术治疗三叉神经痛患者术后口周疱疹、咀嚼肌无力的发生率更低。

生物信息学方法筛选胶质母细胞瘤的核心基因

多形性胶质母细胞瘤(GBM)是成人最常见的恶性神经上皮肿瘤,关于其诊断和治疗的靶点研究一直是困扰研究者的难题。采用生物信息学的方法对GBM的基因表达信息进行分析,从TCGA中共获取169例GBM样本,正常脑组织样本5例,共17847个基因。筛选出差异基因3184个,利用Gene Ontology(GO)富集分析和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)对差异基因的功能进行富集分析。利用STRING工具和cytoscape构建蛋白互作网络,连通性得分最高的被筛选为核心基因。联合ONCOMINE平台对核心基因进行表达分析。采用Kaplan⁃Meier法绘制核心基因生存曲线,了解核心基因对GBM患者生存时间和生存几率的相关性。共筛选出上调差异基因1582个,下调差异基因1601个。BottleNeck算法中连通性得分前十被选为核心基因,联合ONCOMINE分析,KCNAB2在GBM中低表达。KCNAB2的过表达预测了GBM患者更短的生存时间。相较于正常脑组织,KCNAB2在GBM中低表达。而当KCNAB2过表达时,GBM患者的生存时间明显缩短。但是,核心基因KCNAB2在GBM患者生存时间中的影响机制和存在价值仍需要进一步的研究去验证。

一种新的肿瘤干细胞球囊研究技术——蛋清包埋技术

目的探索一种新的能长期、高效保存并研究肿瘤于细胞球囊的技术。方法从恶性胶质瘤原代肿瘤细胞中培养出肿瘤干细胞。将第5代肿瘤干细胞球囊经蛋清石蜡两次包埋、切片后，行HE染色、免疫组织化学染色和免疫组织荧光染色，并与传统的肿瘤干细胞球囊包埋技术及球囊免疫组织荧光染色实验进行比较。结果应用蛋清石蜡两次包埋处理的球囊切片经HE染色后，球囊分布均匀、结构完整，胞核、胞浆颜色鲜艳、对比度高。球囊切片的免疫组织化学染色和免疫组织荧光染色能准确定位球囊中阳性细胞和阳性蛋白表达位点，可进行阳性细胞及蛋白的半定量分析。结论肿瘤干细胞球囊蛋清石蜡两次包埋切片技术能提高实验效率，减少实验误差，节省成本，优于传统球囊包埋技术及传统球囊免疫荧光技术。

人脑胶质瘤多药耐药细胞株的构建及生物学特性鉴定

目的体外构建胶质瘤耐甲磺酸伊玛替尼多药耐药细胞株，并研究其生物学特性。方法采用逐渐增加培养基中伊玛替尼药物浓度的方法诱导构建耐甲磺酸伊玛替尼的人脑胶质瘤U251细胞株（命名为U251AR）；CCK8法检测U25IAR、U251对多种化疗药物的IC50和耐药指数；QRT-PCR法检测耐药相关基因ABCC1、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA的表达，流式细胞术检测ABCG2蛋白的表达。结果体外培养12个月后建立了稳定耐药的细胞株U251AR，与亲代细胞相比异形性不显著。U251和U251AR对化疗药物的IC50相比较差异均有统计学意义（P〈0．05），U251AR对甲磺酸伊玛替尼、阿霉素、顺铂的耐药指数分别为20．41、5．06、10．28，表现出多药耐药特征。QRT-PCR检测结果显示耐药细胞株U251AR中ABCC1、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA的表达明显高于亲代U251细胞，流式细胞术检测结果显示U251AR中ABCG2蛋白的表达强于亲代U251细胞，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论成功建立多药耐药的胶质瘤细胞株U251AR，其多药耐药与ABCCl、ABCB1、ABCB4、ABCG2mRNA及ABCG2蛋白的表达上调相关。

脑肿瘤相关长链非编码RNA的研究现状

长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）是一类转录本长度超过200nt的RNA分子，它们并不编码蛋白，而是以RNA的形式在多种层面上（表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等、调控基因的表达水平。

一种功能性分离和纯化胶质瘤干细胞的方法

目的 探索一种简单、高效、稳定、可靠、经济的胶质瘤干细胞分离和纯化方法. 方法 取对数生长期U87细胞,应用无血清干细胞培养基,置含1％O2的缺氧培养箱中培养,10d后传代培养并离心收集第一代肿瘤球（G1）,连续传代培养获得第5代肿瘤球（G5）.免疫组化染色检测G5肿瘤球中巢蛋白（nestin）、CD133和缺氧诱导因子2α （HIF2α）的表达;Western blotting检测G1～G5肿瘤球中HIF2α蛋白的表达;免疫细胞化学染色检测G5分化细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、O1及βⅢ微管蛋白（βⅢ-Tublin）的表达.6只裸鼠按随机数字表法均分为实验组和对照组（每组3只）,于左侧背部皮下分别注射105个/5 μL G5、U87细胞,25 d后处死裸鼠,取出肿瘤,免疫组织化学染色检测肿瘤中nestin的表达. 结果 G5肿瘤球中nestin、CD133、HIF2α阳性细胞率分别为91％±5％、95％±4％和98％±2％; Western blotting检测显示G1～G5肿瘤球中HIF2α蛋白的表达逐渐增加;G5细胞能分化为表达βⅢ-Tublin、GFAP、O1的子细胞;6只裸鼠均长出肿瘤,实验组的肿瘤体积较大,且肿瘤组织nestin阳性细胞率（47％±11％）明显高于对照组（5％±2％）. 结论 使用功能性分离和纯化方法获得的G5肿瘤球细胞,表达胶质瘤干细胞的特异性标记物、具有三系分化能力和较强的体内成瘤能力,符合胶质瘤干细胞的特征.

用于预测低级别胶质瘤患者生存率的列线图模型构建

目的构建列线图模型预测低级别胶质瘤(LGG)患者的生存率。方法从癌基因数据库(TCGA)数据库中下载患者临床数据,构建临床预测模型比较临床参数与LGG患者的预后关系。结果Kaplan-Meier生存分析结果显示诊断年龄>65岁、KPS<80分、肿瘤分级G3、分子亚型为IDH野生型、首次治疗后肿瘤有进展、化疗史与LGG患者中位生存时间降低相关(P<0.05),COX因素分析结果显示诊断年龄>65岁、肿瘤分级G3级、分子亚型为IDH野生型、首次治疗后肿瘤有进展是LGG患者的独立危险因素(P<0.05),并以相关危险因素绘制列线图,其ROC曲线下面积(AUC)分别为0.810、0.850、0.874,且预测生存率与实际生存率曲线较吻合,列线图校准度与区分度均较好。结论利用列线图可预测低级别胶质瘤患者生存率。