糖尿病小鼠模型的建立及中药舒糖宝疗效研究

目的探讨糖尿病动物模型的建立及中药舒糖宝的治疗效果。方法小鼠分成4组:正常组、模型组、治疗1组、治疗2组,后3组建立糖尿病小鼠模型,用四氧嘧啶按200mg/kg质量给小鼠腹腔注射1次后,相隔3 d,再用链佐霉素按40 mg/kg体质量连续注射4 d,每天1次,血糖升高后,治疗1组和治疗2组分别用舒糖宝和盐酸二甲双胍灌胃治疗。测定造模前、造模后、治疗后血糖含量。实验结束,从眼球取血,测定总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量。结果正常组、模型组、治疗1组、治疗2组血糖含量,造模后2 d分别为(6.25±1.21),(13.72±3.87),(18.54±9.83),(15.86±6.17)mmol/L,后3组与正常组比较有显著性差异(P<0.05或0.01);造模后5 d血糖分别为(5.74±1.19),(17.03±10.22),(19.67±4.97),(17.09±5.51)mmol/L,后3组与正常组比较有显著性差异(P均<0.01);治疗24 d血糖分别为(6.99±0.92),(17.14±8.69),(16.79±7.00),(10.99±2.24)mmol/L,模型组未降低,治疗2组降低明显,治疗1组也有一定程度降低。TC、TG各组间比较无明显差异。结论中药舒糖宝降糖疗效优于盐酸二钾双胍。

海尔福口服液对自由基清除率影响的实验研究

目的研究海尔福口服液对羟自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O.-2)清除率的影响,以进一歩探讨其药理作用。方法根据Fenton反应原理,利用H2O2与2价铁离子Fe2+混合产生.OH,加入水杨酸产生有色化合物,在波长510 nm处有最大吸收峰,可比色测定。利用AP-TEMED系统产生O.-2,显色用分光光度法测定,加入抗氧化药物干扰后,系统产生自由基受抑制或清除,计算药物对.OH和O.-2清除率。结果海尔福口服液(浓度0.1 g/mL生药)、维生素C(浓度为1 g/L)和金银花对.OH清除率分别为(100.75±8.07)%,(99.42±0.14)%,(59.61±2.21)%。前两者比较,P>0.05,无显著性差异。前两者与金银花比较,P均<0.001,均有显著性差异。海尔福口服液对.OH和O.-2清除率分别是(100.75±8.07)%,(92.07±1.37)%,两者比较,P>0.05,无显著性差异。存放1个月、6 a、12 a的海尔福口服液样品对O.-2清除率分别为(91.72±1.38)%,(89.18±4.50)%,(70.37±1.24)%,存放12 a降低明显(P<0.01);维生素C作为标准对照,不同浓度对O.-2清除率r=0.996 7,有直线关系。不同浓度海尔福口服液对.OH清除率r=0.999 0,有直线关系。结论海尔福口服液对O.-和.OH有明显的清除率,是其药理作用之一。

中药舒糖宝对2型糖尿病小鼠模型的肾组织形态及血液生化指标治疗效果的研究

用高脂高糖饲料喂养小鼠一个月后,先用小剂量、多次腹腔注射链佐霉素后再用四氧嘧啶常用剂量半量(100mg/kg体重)腹腔注射一次。待血糖升高后,将造模小鼠分为:模型组(不治疗)。治1组用盐酸二甲双胍治疗,治2组用中药舒糖宝治疗。结果正常组、模型组、治1组、治2组造模前血糖依次为6.02±0.96、5.89±1.24、6.22±0.87、6.20±1.16(mmol/L),造模后2天血糖分别为5.56±0.89、20.54±4.50、19.66±6.77、18.32±5.04(mmol/L),治疗后血糖分别为5.62±1.23、26.37±6.39、18.33±9.86、15.14±3.55(mmol/L),正常组明显低于模型组和治疗组(P<0.01),治疗组也明显低于模型组(P<0.01);总胆固醇治2组明显高于正常组和治1组;尿素正常组明显低于其他三组,治疗前尿糖正常组明显低于其他三组;肾脏病理检查结果,模型组:肾小体数量减少,肾小体边界不清楚,肾小囊壁有断裂现象,肾小管细胞肿状、空泡和坏死,肾间质有出血现象;治疗1组:肾组织病理改变好转,肾小管细胞和排列及结构基本正常,肿状、空泡和坏死现象减少。治疗2组:肾组织基本正常,肾小体数量增多,肾小囊壁、脏层边界清析,肾小管细胞肿状、空泡和坏死病理改变明显好转.结论治疗后治疗两组肾脏病理改变明显好转,血糖均有明显降低,康复效果良好。

2型糖尿病小鼠模型的建立及中药舒糖宝治疗效果的研究

目的探讨2型糖尿病模型的建立及中药舒糖宝治疗的效果。方法用链佐霉素(STZ)加四氧嘧啶联合造模,用高脂高糖饲料喂养小鼠1个月后,先用小剂量、多次腹腔注射链佐霉素后再用四氧嘧啶常用剂量半量(100mg/kg体重)腹腔注射1次。待血糖升高后,将造模小鼠分为:模型组(不治疗),治1组,治2组。另设一组为正常组。治1组用盐酸二甲双胍治疗,治2组用中药舒糖宝治疗。测定造模前、造模后和治疗后血糖含量。治疗结束,从眼球取血,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素等生化指标。结果正常组、模型组、治1组、治2组造模前血糖依次为(6.02±0.96)、(5.89±1.24)、(6.22±0.87)、(6.20±1.16)(mmol/L),各组比较,P>0.05,无显著差异;造模后2d血糖分别为(5.56±0.89)、(20.54±4.50)、(19.66±6.77)、(18.32±5.04)(mmol/L),后3组与正常组比较,P<0.01,造模组血糖明显升高;治疗前血糖分别为(5.87±1.25)、(22.97±6.76)、(23.44±10.57)、(25.83±9.32)(mmol/L),正常组仍明显低于造模组(P<0.01);治疗后血糖分别为(5.62±1.23)、(26.37±6.39)、(18.33±9.86)、(15.14±3.55)(mmol/L),正常组明显低于模型组和治疗组(P<0.01),治疗组也明显低于模型组(P<0.01);总胆固醇治2组明显高于正常组和治1组;尿素正常组明显低于其他3组,治疗前尿糖正常组明显低于其他3组;治疗后治疗组明显降低,模型组不降反而升高。结论用链佐霉素小剂量多次腹腔注射加高脂高糖饲养可成功建立2型糖尿病模型,治疗后治疗2组血糖均有明显降低。

民族医学院校学生批判性思维能力的调查分析

目的分析民族医学院校学生批判性思维能力现状,为民族医学院校的教育教学改革提供参考依据。方法采用中文版评判性思维能力测量表(CTDI-CV)对我校临床医学、预防医学、护理医学、医学检验、口腔医学、医学影像、药学等7个本科专业一、二、三年级学生进行批判性思维能力测量。结果批判性思维能力总分269.08分,表现为负性倾向;分析能力和求知欲得分超过40分,表现为正性,寻找真相、开放思想、系统化能力、批判思维的自信心、认知成熟度得分均低于40分,表现为负性;不同专业、年级、性别学生的批判性思维能力差异有统计学意义(P<0.05)。结论民族医学院校学生在分析能力和求知欲上表现为正性,而在寻找真相、开放思想、系统化能力、批判思维的自信心、认知成熟度上表现为负性,总体批判性思维能力表现较弱。

4种自身抗原与狼疮性肾炎相关性的CrELISA分析

目的分析4种自身抗原与狼疮性肾炎(LN)的相关性,以寻找具有更高敏感性与特异性的特征性自身抗原。方法收集广西医科大学第一附属医院检验科2013年7月—2014年7月期间的患者血清120例,其中正常人血清、系统性红斑狼疮(SLE)患者血清、LN患者血清及肾病综合征(NS)患者血清各30例。以Cr ELISA法检测四种阳性抗原蛋白在各组血清中的表达情况,并以生物信息学分析结果。结果 A1、A2在SLE组中的表达量(0.67±0.36)、(0.31±0.18)相对在正常人组中的表达量(0.47±0.24)、(0.22±0.10)与NS组中的表达量(0.33±0.17)、(0.19±0.10)更高(P<0.05),与LN组中的表达量(0.53±0.27)、(0.27±0.14),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 4种抗原中,A1、A2的敏感性相对较高,更可能是SLE/LN的特征性自身抗原,有望成为SLE/LN的诊断依据。

MAS基因在不同组织表达量的差异分析研究

肾素-血管紧张素是人体肿瘤微环境的重要组成部分。肾素血管-紧张素素系统(RAS)是人体非常重要的调节系统。RAS系统包含经典轴ACE-AngII-AT1R和替代经典轴的ACE2-Ang(1-7)-Mas。作为非经典替代轴受体的MAS基因,发挥了重要的拮抗经典轴的作用。在之前的研究中,我们对MAS基因在肝癌中的表达差异做了研究,发现其在肝癌组织和血清中的表达均高于健康对照组。有报道称,MAS基因在其它组织中也有异常表达。目的:分析MAS在不同组织中的表达情况,并分别与对应的癌旁组织对照,更加全面的了解MAS基因在人体不同组织的表达情况。方法:本文通过生物信息学手段分析MAS在人体不同部位的表达差异,数据来源GEO数据库。结果:结果显示MAS基因在心脏中的表达最高,并且其在癌组织中的表达量均高于其对应的癌旁组织。结论:综上所述,提示我们MAS基因在人体中扮演着重要的角色,本文将为研究MAS基因的拮抗机制提供更好的思路。

胚胎植入前基因检测技术的研究进展和思考

胚胎植入前基因筛查和植入前遗传学诊断能够帮助检测胚胎的整倍性,并检测其是否携带遗传病致病基因,从而筛选出更为健康的胚胎以提高妊娠率。将早期的活检技术结合近些年研发出的新一代分子生物学检测技术,使得胚胎植入前基因检测技术具有更高的精确度以及更优的时效性。本文针对胚胎植入前基因检测技术的研究现状进行综述,并从社会和人文角度对该技术的应用进行展望和思考。

15878例门诊男性精子DNA碎片指数数据分析

目的:分析门诊男性精子DNA损伤与精液常规各指标之间的关系。方法:收集南宁市第二人民医院生殖医疗中心男科门诊15878例男性精液检查资料,根据DFI结果分为A组(DFI≤15%)、B组(15%<DFI<30%)、C组(30%≤DFI),分析三组的精液常规参数以及DFI与精液常规参数之间的关系。结果:三组DFI分组在年龄、禁欲天数、精液体积、精子浓度、精子总数、精子前向运动、精子总活力以及正常精子形态均有差异,差异有统计学意义P<0.001。DFI与年龄、禁欲天数、精液体积成正相关关系,与精子浓度、精子总数、精子前向运动、精子总活力、正常精子形态成负相关关系。结论:DFI与精液常规各参数之间存在相关性,为男性不育的临床诊断和治疗提供重要参考依据。

1例Y/14号染色体不平衡易位的45,X男性的遗传学特征并文献复习

目的探讨Y/14号染色体不平衡易位的45,X男性的遗传学特点。方法回顾性分析1例Y/14号染色体不平衡易位的45,X男性患者的病史资料,总结精液检查、性激素检测、染色体核型分析、PCR及荧光原位杂交(FISH)分析结果。结合相关文献,分析此类患者表型与核型的关系。结果该患者具有男性表型,但身材矮小伴有无精症、不育。染色体核型分析显示核型为45,X,add(14)(p13)。PCR和FISH证实14号染色体短臂增加的片段来自Y染色体,含SRY基因的Y染色体短臂与14号染色体短臂融合形成一条假双着丝粒染色体,Y染色体长臂AZFb、c基因联合缺失,染色体异质化。该患者核型描述为45,X,psu dic(14;Y)(p11;q11).ish psu dic(14;Y)(CEN14/22+,Yq12-,CEP Y+,SRY+)。文献报告6例患者均含有SRY基因,存在Yp与14p发生不平衡易位,伴Yq缺失。结论SRY基因是决定45,X男性患者性别最主要的基因,Y/常染色体不平衡易位可能导致患者不育和身材矮小。

优化脂质体对肝癌细胞株HepG2细胞转染效率

摸索用Lipofectamine 2000(Lipo)转染质粒pEGFP-C1到肝癌细胞HepG2较为合适的转染条件。以HepG2细胞为研究对象,采用脂质体Lipofectamine 2000转染pEGFP-C1质粒,在24孔板先按每孔0.5μg固定pEGFP-C1质粒用量,摸索Lipo在1μL、1.5μL、2μL、2.5μL量上较为合适的用量,确定Lipo用量后,然后固定Lipo为1μL,摸索质粒用量0.5μg、1μg,确定脂质体与质粒的最佳比例。此外,对转染中培养基是否含血清,Lipofectamine 2000与pEGFP-C1质粒比例为1:0.5的基础上,扩大用量,即Lipofectamine 2000 2μL和pEGFP-C1质粒1μg,以及脂质体复合物孵育细胞时间进行优化。最后,采用荧光倒置显微镜观察细胞转染效率和方差分析及秩和检验的统计学方法进行统计分析。结果显示,pEGFP-C1质粒固定为0.5μg时,Lipo用量在1μL及1.5μL用量组转染效率最好,之后随着Lipo用量加大,转染效率下降;固定Lipo用量1μL,pEGFP-C1质粒0.5μg时转染效率最好(p<0.05),比例不变,扩大Lipo和质粒用量,并不增加转染效率。转染后于3 h、6 h、8 h、12 h、24 h换成正常培养基培养,转染6 h后换液较好。此外,研究发现培养基是否含血清不影响转染效率。本研究表明在24孔板板中用Lipofectamine 2000转染HepG2细胞时较为合适的转染条件为每孔1μL Lipofectamine 2000和0.5μg质粒,脂质体与质粒的最佳比例为2:1,血清不影响转染效率,用含血清培养基转染后6 h换液培养。

RAS对各肝病影响的研究进展

肾素-血管紧张素系统(rennin angiotensin system,RAS)是机体内重要的具有调节血压、水钠平衡等功能的内分泌调节系统。近年在各肝病的研究中发现,RAS失衡与各种肝病的发生与发展均有密切关系。肝组织内存在局部的完整RAS系统,当肝细胞或肝组织受到某种致病因素的刺激时,局部RAS被激活,各成分活性增强并重新分布,继而影响肝病的发展。早期研究已证实ACE-AngⅡ-AT1R轴表达上调可加重肝脏损伤,促进各肝病的进展。新近研究发现的ACE2-Ang(1-7)-Mas轴被不断证明是ACE-AngⅡ-AT1R轴的反向调节轴,被称为"替代RAS经典轴",发挥拮抗ACE-AngⅡ-AT1R轴的作用,对肝病的进展起一定的缓解或逆转作用。本研究就近年来关于RAS对各肝病的影响的相关研究做一综述,为找到更有效的缓解和治愈肝病的新方法提供新思路。

少数民族偏远山区儿童虐待现况及影响因素分析

目的分析广西少数民族偏远山区儿童虐待(CA)现况及影响因素,为开展儿童虐待预防干预提供参考依据。方法运用多阶段整群随机抽样方法,采用儿童受虐筛查表(SQCA)对广西少数民族偏远山区5 390名中小学生进行调查,并用多因素非条件Logistic回归分析探索儿童虐待的影响因素。结果有5 273名儿童曾遭受家人虐待,报告率达97.8%。言语侮辱、经济控制、用刀棒等伤人、忽视、隔离、拳打脚踢、抓咬打耳光等、性侵犯虐待的报告率分别为74.0%,64.4%,52.6%,44.4%,37.3%,26.3%,26.3%和5.1%。8种类型的虐待行为发生率比较,差异有统计学意义(χ2=7 821.953,P<0.01)。非条件Logistic回归分析结果表明,年龄大、跟父母生活在一起、家庭所在地为城镇是儿童虐待发生的保护因素;兄弟姐妹多、精神质个性明显、父亲酗酒是儿童虐待发生的危险因素(P值均<0.05)。结论应加强对少数民族偏远山区儿童虐待问题的重视,减少儿童虐待的发生。

利用CRISPR-Cas9技术敲除MAS1基因的质粒构建与酶切方案优化的研究

CRISPR-CAS9技术是新一代基因编辑技术,可简便快捷地对哺乳动物细胞进行指定基因的敲除,实现沉默外源基因表达的目的。但传统的CRISPR-CAS9技术提供的酶切方案没有特异性,致使酶切效率不稳定,影响胶回收率以及后续实验。本实验通过改变酶切体系大小,以及酶切反应时间,继而通过胶回收率及测序检测的方法验证最佳酶切条件,最后通过荧光定量PCR和Western blotting实验检测目的基因的表达量,确认是否成功敲除目的基因。研究结果说明:BbsⅠ酶与px459质粒比值为1μL:500 ng,酶切体系为50μL,酶切时间为45 min时,酶切效果最佳、胶回收率最高,且此时目的基因在细胞内的表达量为0,确定该实验条件下目的基因被成功敲除。

Ang-(1-7)通过G蛋白偶联受体Mas在人肝癌细胞HepG2中的作用

为了研究Ang-(1-7)通过Mas对人肝癌细胞增殖的影响及在Mas高、低表达模型中分析其表达差异、凋亡等细胞生理活性变化,我们采用药物(Mas激活剂Ang-(1-7),Mas抑制剂A779)干预Hep G2细胞,分别对Ang-(1-7)和A799进行剂量、时间效应实验,实时定量RT-PCR检测药物干预后细胞Mas的表达水平,最后流式细胞仪检测药物干预后细胞的凋亡变化。结果表明,Ang-(1-7)与A779的有效工作浓度为10-7mol/L,Ang-(1-7)促进Mas的表达,Mas表达水平高于对照组。相反,A779抑制Mas的表达,但作用不明显,主要为拮抗Ang-(1-7)的功能。Ang-(1-7)处理组细胞凋亡明显升高,揭示Mas表达提升诱导人肝癌细胞凋亡。

多次退火环状循环扩增联合高通量测序技术在体外受精胚胎无创检测非整倍体中的应用

为建立基于多次退火环状循环扩增联合高通量测序(multiple annealing and looping-based amplification cycles combined with next-generation sequencing,MALBAC-NGS)技术的体外授精胚胎非整倍体无创检测体系,本研究提前对非整倍体遗传缺陷胚胎进行筛查,收集在南宁市第二人民医院生殖中心接受体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization embryo transfer,IVF-ET)的患者临床资料,比较了对照组(正常年龄)与观察组(高龄患者)的卵子数量、囊胚质量等数据,并分别运用MALBAC-NGS及传统胚胎植入前遗传学筛查(preimplantation genetic screening,PGS)技术对上述两组胚胎染色体进行筛查。研究结果表明,观察组获卵数、优质卵子比率及囊胚率显著低于对照组(P<0.05),两组间胚胎卵裂率无显著差异(P>0.05)。对照组及观察组间胚胎活检样本与培养液样本MLABAC扩增成功率无显著差异(P>0.05);经MALBAC-NGS检测,对照组及观察组组内胚胎活检样本与培养液样本染色体拷贝数检测结果无显著差异(P>0.05)。结果证实MALBAC-NGS技术可利用胚胎培养液进行染色体拷贝数检测,具备成为临床检测标准的潜力。