机能实验课教学中学生创新能力培养的实践与思考

机能实验课是医学生实践能力、科学思维和创新意识等综合素质培养的重要载体。本文从我校机能实验课的教学改革实践入手,探讨提高学生创新能力及综合素质的方法,为培养新时代高素质医学人才提供思路。

递进性开放式实验教学模式培养学生创新能力

以培养具有创新精神和终身学习能力的本科生为目标,遵从学生群体学习能力的客观规律,对传统的机能学实验课程进行改革,形成递进式开放性的实验教学模式。通过“基本技能培训—综合性试验—探索性实验—自主创新性科研”循序渐进的教学模式,引导和激励大部分学生逐步养成探索创新的思维。这种以创新培养为主的教学模式具有科学性、先进性、前瞻性和自主性,试行阶段极大程度地调动了学生参与的积极性,也促进了教师自身业务水平的提高,形成了以科研促教学的“教学-研究”良性循环,从根本上提高了教学质量,为造就出具有科学探索精神、活跃的创新思维能力和熟悉科研技能的全能型人才打下了坚实的基础。

创新综合性医学机能实验教学的改革

机能实验学作为基础医学教学一门重要学科,其教学改革和探索是一项长期而艰巨的任务。针对目前机能学所出现的生理学、病理生理学、药理学这三门学科融合难的问题,以及以培养具有创新精神和终身学习能力的本科生为目标,四川大学机能学实验室十八年来在整合教学资源和创新实验教学方面积累了丰富的经验,探索出医学机能学实验教学的新模式,提高了学生的基本技能和自主创新能力,为造就出具有科学探索精神、活跃的创新思维能力和熟悉科研技能的全能型人才打下了坚实的基础。

电针改善椎基底动脉供血不足和内耳缺血所致前庭功能障碍的实验

目的:观察电针改善家兔椎基底动脉供血不足内耳微循环障碍所致颈源性眩晕的效果,并与氟桂利嗪进行阳性对照。方法:取64只日本大耳兔随机分为对照组、模型组、电针组和氟桂利嗪组4组,每组16只。①造模:200 g／L组织硬化剂-775注射液10 mL注射至模型组、电针组和氟桂利嗪组左侧颈椎横突软组织,建立椎动脉型颈椎病模型,对照组注射生理盐水。②治疗:注射后第6周开始,电针组作双侧“风池”“听宫”“外关”穴电针处理(峰值电压4-6V,刺激频率10 Hz), 氟桂利嗪组以氟桂利嗪1．67 mg／kg进行胃灌注,1次/d,连续14 d,其他两组不干预。③观察指标:平行秋千分别产生±0．17 G、±0．34 G和±0．5 G 直线加速度刺激家兔前庭,测定诱发的眼震电图频率;经颅多普勒检测基底动脉和左、右侧椎动脉收缩期、舒张期和平均血流速度;激光多谱勒血流计检测左侧内耳血流量。结果:37只兔进入结果分析。①眼震电图频率:对照组±0．5 G直线加速度诱发的显著高于±0．17 G(P<0．05)。模型组、氟桂利嗪组3种直线加速度和电针组±0．5 G直线加速度诱发眼震电图频率均显著低于对照组(P<0．05- 0．001)。电针组3种直线加速度和氟桂利嗪组±0．5 G诱发眼震电图频率显著高于模型组(P<0．01-0．001)。②血流速度:模型组左、右侧椎动脉及基底动脉、氟桂利嗪组左、右侧椎动脉的收缩期、舒张期和平均血流速度均较对照组显著减慢(P<0．01-0．001),电针组左侧椎动脉和氟桂利嗪组基底动脉的收缩期血流速度与对照组无显著差异(P>0．05),电针组左和右侧椎动脉的舒张期血流速度显著快于氟桂利嗪组(P<0．05)。③内耳血流量:模型组和氟桂利嗪组显著低于对照组(P<0．001,0．05),电针组和氟桂利嗪组显著高于模型组(P<0．001,P<0．01),电针组与对照组无差异(P>0．05)。结论:电针可改善椎基底动脉供血不足,并通过增强内耳微循环局部调节改善内耳血供和前庭-眼反射,恢复前庭功能。其效应优于氟桂利嗪。

脐带间充质干细胞移植预防宫腔粘连的研究

目的:采用机械刮宫建立大鼠宫腔粘连(IUA)模型,研究脐带间充质干细胞(UCMSCs)对IUA的预防作用。方法:将雌性未受孕SD大鼠麻醉后进行机械刮宫,分别于术后第3、5、7、9、12天进行大体观察,取子宫刮宫段,Western blot法检测TGF-β1表达,观察子宫内膜愈合情况。将雌性未受孕SD大鼠随机分为生理盐水组、干细胞组,麻醉后行机械刮宫,术后分别给药,于给药第3天打开腹腔进行大体观察,取刮宫段,Western blot法检测TGF-β1表达;常规固定组织后进行HE染色、Masson染色,观察受损子宫的愈合程度;免疫组化检测CD34和结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果:刮宫后第3天,与其余时间点相比,TGF-β1表达明显增加,IUA程度最为严重。与生理盐水组相比,干细胞组的IUA评分显著降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与生理盐水组相比,干细胞组的TGF-β1表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);HE染色、Masson染色显示,与生理盐水组相比,干细胞组的子宫内膜纤维化程度较低,内膜愈合较好。与生理盐水组相比,干细胞组子宫组织的CTGF染色分值明显下降(P<0.01),CD34染色分值明显升高(P<0.01)。结论:UCMSCs可有效预防术后IUA,促进子宫内膜愈合。

急性等容血液稀释对血液流变学和微循环的影响

目的:探讨急性等容血液稀释(ANH)对兔血液流变学和微循环的影响。方法:16只雄性健康家兔随机分为对照组(A组)和血液稀释组(B组)。两组均常规输注乳酸林格氏液0.5ml.kg-1.min-1补充生理需要量。B组在麻醉诱导完成后30min内放血,同时等速、等量输注琥珀酰明胶,使Hct下降至30%左右。监测两组麻醉诱导后即刻(T0)、60min(T1)、90min(T2)的血液流变学及耳廓微循环血流量和肠系膜微动脉管径、微循环血流速度、血管数、功能血管数的变化。结果:B组血液稀释后于T1、T2血浆及全血粘度下降(P<0.05或P<0.01),微循环的血流量和血流速度增加(P<0.01),微动脉管径增大(P<0.05),功能血管数增加(P<0.05)。A组同期的血液流变学和微循环变化不大。结论:急性等容血液稀释可改善机体的血液流变性和微循环。

参麦注射液对感染柯萨奇B_3病毒心肌细胞的影响

目的在细胞水平探讨参麦注射液(SMI)对实验性病毒性心肌炎的治疗作用。方法采用原代培养的SD大鼠心肌细胞感染柯萨奇B3病毒(CVB3)造成实验性病毒性心肌炎细胞模型;设立正常对照组、模型组、SMI高剂量(10g/L)组、SMI中剂量(5g/L)组及SMI低剂量(2.5g/L)组,观察心肌细胞感染CVB3后第3天和第5天的搏动频率、细胞病变、细胞超微结构、上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性和CVB3滴度。结果感染CVB3后心肌细胞的搏动频率明显减慢;第5天模型组有半数细胞搏动停止,细胞病变明显,线粒体肿胀且形态不完整,内质网扩张,部分肌原纤维损坏,上清液中LDH的活性显著升高;SMI各剂量组心肌细胞均维持搏动,且高剂量组细胞病变程度、LDH活性和CVB3滴度均明显低于模型组,除部分肌原纤维损坏外,线粒体形态完整,内质网未见扩张。结论SMI对感染CVB3的培养心肌细胞搏动功能具有保护作用,并能降低心肌细胞上清液中CVB3滴度和减轻CVB3对心肌细胞的损伤。

门静脉压升高是胆盐诱发急性胰腺炎微循环障碍的始动环节

有报道,在胆盐诱发的急性胰腺炎早期,胰腺动脉收缩导致了胰腺微循环障碍。本实验的目的就是验证上述发现是否正确。胆胰管内注射牛黄脱氧胆酸钠诱发大鼠和犬胰腺炎;使用活体显微镜观察大鼠胰腺微动脉管径的变化;记录犬胰腺小动脉压的变化;计数机能毛细血管并乘以胰腺湿重校正;用激光多普勒测量胰腺灌流量。我们发现,在诱发胰腺炎后20min内大鼠胰腺微动脉扩张;犬胰腺动脉压从104.5±4.8mmHg降到54.6±5.6mmHg;5min时下腔静脉血的血细胞压积显著低于门静脉血;校正了的胰腺机能毛细血管密度增加。胰腺微循环障碍与门静脉压升高(最多升高9.18±0.78mmHg)同时发生。将门静脉压降低至基础水平可使胰腺灌流量增加约2.4倍。实验显示,在胆盐诱发急性胰腺炎的早期,胰腺动脉发生了扩张而不是收缩;这时门静脉压升高;门静脉压升高大大减小了胰腺血管压差,并导致血浆丢失和局部血液浓缩,导致胰腺微循环障碍。

急性高容血液稀释对红细胞流变学的影响

目的探讨急性高容血液稀释(AHH)对红细胞流变学的影响。方法20只雄性健康家兔随机分为对照组(A组)和血液稀释组(B组)。两组均常规输注乳酸林格液0.5ml/(kg.min)补充生理需要量。B组在麻醉诱导完成后30min内输注万汶行高容血液稀释,使Hct下降至30%左右。监测两组麻醉诱导后即刻(T0)、60min(T1)、90min(T2)的红细胞流变学变化。结果B组血液稀释后于T1、T2纤维蛋白原浓度、血细胞比容、红细胞聚集指数显著下降(P<0.05或P<0.01),红细胞电泳时间、红细胞变形指数及刚形指数变化不大。A组同期的红细胞流变学参数无明显变化。结论急性高容血液稀释可显著改善机体的红细胞流变性。

加强手术室护理干预 控制肝移植切口感染

目的 探讨肝移植手术切口感染的有效护理干预措施，降低切口感染率。方法以《医院感染诊断标准（试行）》为诊断标准，对肝移植手术进行回顾性调查，查找肝移植手术术中切口感染主要危险因素，加强手术室护理干预。结果1999年1月1日-2004年12月31日所做的185例肝移植手术，发生切口感染10例，切口感染率5．4％。2005年1月1日～2007年12月31日所做的346例肝移植手术，切口感染7例，切口感染率为2．02％。结论加强手术间空气质量管理，完善消毒铺巾方法以及有效的切口保护、体温保护、缩短手术时间、全手术过程中严格的无菌操作原则等护理干预措施，能够有效地预防和控制肝移植手术切口感染。

利钠肽C受体在利钠肽舒张猪冠状动脉血管中的作用

目的:探讨利钠肽C受体是否参与3种利钠肽的舒张血管作用。方法:采用离体血管环灌流方法,观察心房利钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、C型利钠肽(CNP)、硝酸甘油和利钠肽C受体激动剂cANF4-23对猪冠状动脉的作用;然后加入利钠肽C受体阻断剂cANF4-28观察利钠肽舒张血管作用的变化。实验分为8组(n分别=8):分别为ANP组、BNP组、CNP组、硝酸甘油组、cANF4-23组、cANF4-28+ANP组、cANF4-28+BNP组和cANF4-28+CNP组。结果:CNP组冠状动脉最大舒张率(36.5±4.0)%低于ANP组(60.4±22.6)%、BNP组(68.5±11.5)%和硝酸甘油组(53.8±6.9)%,差异均有统计学意义(P均<0.05);其余各组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。cANF4-28+CNP组最大舒张率为(21.3±10.3)%与CNP组(36.5±4.0)%比较冠状动脉最大舒张率明显减弱(P<0.05),差异有统计学意义。cANF4-23组冠状动脉最大舒张率为(42.4±17.6)%,与CNP组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3种利钠肽对猪冠状动脉均有良好的扩张作用;利钠肽C受体参与了CNP对猪冠状动脉的舒张作用,而没有参与ANP和BNP的扩张冠状动脉作用。

注射用清开灵冻干粉的一般药理作用研究

目的:观察注射用清开灵冻干粉对动物中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统的影响及对戊巴比妥钠阈下催眠剂量作用的影响。方法:尾静脉注射给予小鼠不同剂量注射用清开灵冻干粉,或同时腹腔给予阈下催眠剂量的戊巴比妥钠,观察小鼠一般行为学指标和自主活动的变化,以及对戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响;给予麻醉犬不同剂量清开灵冻干粉观察该药对血压,心电图以及呼吸指标的影响。结果:注射用清开灵冻干粉大剂量(210.18 mg/kg)对小鼠有中枢神经系统抑制作用(P<0.05),并有延长巴比妥类睡眠时间的作用(P<0.05)。对犬心血管系统及呼吸系统的影响试验结果显示,清开灵冻干粉各剂量(43.92 mg/kg、21.96 mg/kg、10.98 mg/kg)均对麻醉犬心血管系统及呼吸系统均无影响(P>0.05)。结论:注射用清开灵冻干粉有一定程度的中枢神经系统抑制作用。对心血管系统(心率、心率节律、心电图)、呼吸系统(呼吸频率、呼吸深度、呼吸节律)无明显影响。

槲皮素对K-Ras突变型结直肠癌细胞的特异性杀伤效应

目的:研究植物源性黄酮类化合物单体槲皮素对K-Ras突变型结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)细胞的杀伤作用。方法:体外培养人结直肠癌细胞K-Ras突变型CRC细胞系(DLD1K-RAS G13D)和K-Ras野生型CRC细胞系(DLD1K-RAS WT),分别给予50和100μM的槲皮素处理24h,采用MTT和集落形成实验,观察细胞增殖情况;以流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting测定DLD1K-RAS G13D和DLD1K-RASWT的Ras信号通路相关蛋白AKT、JNK、MEK和ERK的表达。结果:槲皮素(50-100μM)处理24h后,与DLD1K-RASWT相比,突变型细胞DLD1K-RAS G13D增殖和集落形成明显降低(P<0.05)。槲皮素处理后,cleaved-PARP和caspase-3活化明显增强;磷酸化的AKT(p-AKT)随槲皮素浓度增加表达降低,在KRAS突变细胞中上述变化更加明显。结论:槲皮素通过caspase依赖凋亡通路诱导K-Ras突变细胞凋亡,并通过抑制AKT信号通路的活化,特异性抑制K-Ras突变细胞的增殖和集落形成。

大鼠死后腓肠肌直接电兴奋性变化与早期死亡时间的关系

目的探讨大鼠死亡后不同时间腓肠肌电兴奋性的变化,为早期死亡时间的推断提供新的指标。方法建立大鼠机械性窒息模型,利用电生理检测仪检测死亡后不同时间大鼠腓肠肌对不同强度的电刺激的反应性,记录肌肉组织动作电位出现时间,统计学分析其差异并建立回归方程。结果大鼠机械性窒息死亡后一定时间内,其腓肠肌对电刺激的兴奋性与死亡时间呈明显线性关系。结论肌肉组织的电兴奋性可以作为早期死亡时间推断的有效指标。

急性高容血液稀释对微循环的影响

目的探讨急性高容血液稀释(AHH)对微循环的影响。方法16只雄性健康家兔随机分为对照组(A组)和血液稀释组(B组)。两组均常规输注乳酸林格氏液0.5ml.kg-1.min-1补充生理需要量。B组在麻醉诱导完成后30min内输注佳乐施行高容血液稀释,使Hct下降至30%左右。监测两组麻醉诱导后即刻(T0)、60min(T1)、90min(T2)的红细胞压积(Hct)、血红蛋白含量(Hb)及耳廓微循环血流量和肠系膜微循环微动脉管径、血流速度、血管数、功能血管数的变化。结果B组血液稀释后于T1、T2的Hct及Hb下降(P<0.01),微动脉管径增大(P<0.05),功能血管数增加(P<0.05),微循环的血流量、血流速度增加(P<0.01)。A组同期的Hct、Hb和微循环变化不大。结论急性高容血液稀释可显著改善微循环。

生皮散对大鼠感染性创面微循环的保护作用

目的观察生皮散对大鼠感染性创面微循环的保护作用。方法将SD大鼠随机分成6组,每组10只,分别为空白组,模型组,阳性药(七厘散)组,生皮散高、中、低剂量组(1.8 g/kg、0.9 g/kg、0.45 g/kg)。除空白组外,各组大鼠制备皮肤全层缺损,且创面接种金黄色葡萄球菌形成感染性创面。除模型组外,各组大鼠创面处分别于术后第3 d外敷七厘散和各剂量的生皮散,连续12 d于创面处给药,分别在造模成功后第3、5、7、10、15 d测量创面面积。并观察创面造模前和给药后(15 d)微循环血流灌注量(PU)、血细胞聚集程度(CMBC)以及运动血细胞的速率(Velocity)。15 d后处死大鼠,取创面皮肤组织进行HE染色。结果七厘散组和生皮散各剂量组均显著缩小创面面积(P<0.01);HE染色结果显示经过生皮散治疗后,创面的炎性浸润程度明显减轻,新生肉芽组织明显增多;生皮散显著降低创面微循环PU、CMBC及V的变化率(P<0.05)。结论生皮散通过改善创面的微循环而促进组织修复,具有明显的生肌作用。

乙醇对家兔脑血流量影响的实验研究

目的探讨乙醇对家兔脑微循环的影响。方法15只家兔随机分为3组,分别给予56%(v/v)白酒10 ml、20 ml、30 ml灌胃,以酒精灌胃法制作动物模型,用PeriFlux 5 000激光多普勒血流仪检测3组家兔灌胃后不同时间大脑局部微区血流改变情况。以灌胃前数据为正常对照。结果灌胃前的正常脑血流值在各组之间无差异。灌酒后5 min,各组脑血流量均比灌酒前明显升高;灌酒后15～30 min,脑血流量达到较高值,比灌酒后5min明显升高;灌酒后1h基本同灌酒后15～30 min的表现。各浓度组之间脑血流量在相应的灌酒时间段也有较大的差异。结论家兔脑血流量与酒精摄入量成正比;随着摄入酒精量的增大,家兔脑血流速度增快。

机能学实验教学中培养学生的自主学习及科研能力的探讨

目的:探索在机能学实验教学中如何培养学生的自主学习及科研能力。方法:在2016级临床医学专业中,实验组33名学生采用传统教学方式,教改组69名学生采用教学责任小组的教学改革方式,使学生成为教学主体,学生与教师一起完成机能学教学。结果:实验组与对照组在考试成绩上无显著性差异(P>0.05);问卷调查显示,该教改实践使学生全程参与科研的兴趣及能力有较大提高。结论:采用教学责任小组的教学改革方式增加了学生的参与性和积极性,且对培养学生自主学习能力和科研能力大有裨益。

机能学实验结果分析能力培养方式探究

医学机能实验学是一门研究机体正常机能,疾病发生机制和药物作用规律的实验性科学。在以动物为主的实验中,实验结果往往与预期不一致。根据实验中可能出现的多种情况,构建“机能学实验结果分析思路图”,旨在帮助学生提高对实验结果的观察、分析、处理能力,培养学生的科研思维和严肃的科学态度,启发科研探索性意识和团队协作精神,逐步形成严谨的科研思维,为今后科研工作奠定基础。

生皮散对大鼠Ⅲ期压疮创面的保护作用

目的观察生皮散对大鼠Ⅲ期压疮创面的保护作用。方法将SD大鼠随机分成6组,每组10只,分别为模型组,空白组,阳性药(七厘散)组,生皮散高、中、低剂量组(1.8、0.9、0.45 g/kg)。给药前3 d除空白组外,其余各组制备大鼠Ⅲ期压疮模型,连续15 d于创面处给药,分别在造模成功后第0、3、7、10、15天测量创面面积;15 d后处死大鼠,取一部分创面皮肤组织进行HE染色,一部分进行肿瘤坏死因子α(TNF-α)的测定。结果七厘散组和生皮散各剂量组均显著缩小创面面积(P<0.01),降低局部组织中TNF-α的水平(P<0.01),HE染色结果显示炎性浸润程度明显减轻,新生肉芽组织明显增多。结论生皮散通过抑制压疮局部炎症细胞释放TNF-α而促进组织的修复,具有明显的生肌、抗炎作用。