维生素E对约氏疟原虫感染BALB/c小鼠早期免疫应答的抑制效应

目的:探讨维生素E(Vitamin E,VE)对致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.y17XL)感染BALB/c小鼠的免疫调节效应。方法:6～8周、雌性BALB/c小鼠,随机分为实验组和对照组,经腹腔接种1×106P.y17XL寄生的红细胞,实验组于感染前10天口服给予VE预处理。动态观察两组小鼠的原虫血症水平;流式细胞术检测感染后第0、3和5天脾树突状细胞(Dendritic cells,DCs)亚群和Toll样受体9(Toll like receptor,TLR9)表达水平、以及巨噬细胞和活化T细胞的表达数量。结果:(1)与正常感染组相比较,补充VE加重感染小鼠的原虫血症水平,死亡率于感染后第6天达到70%,而正常感染组在感染后第6天死亡率只有30%;(2)与正常感染组相比,在每一检测点,VE处理组小鼠脾脏DCs亚群表达水平显著降低;同时,F4/80+巨噬细胞数量明显低于对照组,在感染后第5天,VE处理组小鼠脾脏T细胞活化水平显著降低。结论:在P.y17XL感染早期,VE预处理可通过抑制DCs的成熟和分化,从而加剧P.y17XL感染BALB/c小鼠的感染进程。

经皮穿刺微球囊神经节压迫治疗原发性三叉神经痛效果观察

目的探讨经皮穿刺微球囊神经节压迫治疗原发性三叉神经痛的临床疗效。方法选择原发性三叉神经痛患者360例,随机分为观察组和对照组各180例,分别给予经皮穿刺微球囊神经节压迫治疗和卡马西平口服治疗。比较两组治疗总有效率和并发症发生情况。结果观察组治疗总有效率为91.11%,高于对照组的71.11%(P<0.05);观察组并发症发生率为8.88%,低于对照组的24.44%(P<0.05)。结论经皮穿刺微球囊神经节压迫治疗原发性三叉神经痛的疗效优于卡马西平。

左旋精氨酸通过活化树突状细胞增强约氏疟原虫感染DBA/2小鼠的Th1应答效应

目的探讨左旋精氨酸(L-Arginine,L-Arg)对致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.y17XL)感染DBA/2小鼠Th1免疫应答的调节效应。方法 DBA/2小鼠随机分为两组,对照组和L-Arg组,每组20只,分别给予DBA/2小鼠生理盐水和L-Arg(1.5g/kg)连续灌胃预处理7d后,每鼠经腹腔感染1×10~6个P.y17XL寄生的红细胞(pRBC)。统计两组小鼠红细胞感染率和小鼠存活率。感染后第0、3和5天每组分别处死4只小鼠,取脾组织制备脾细胞悬液,流式细胞术检测CD4^+CD69^+T细胞、F4/80^+CD36^+巨噬细胞、髓样树突状细胞mDCs(CD11c^+CD11b^+)、浆样树突状细胞pDCs(CD11c^+B220^+)数量,ELISA法检测脾细胞培养上清中γ干扰素(IFN-γ)的分泌水平,Griess反应检测脾细胞培养上清中一氧化氮(NO)含量。结果与对照组(45%)比较,L-Arg组小鼠的最高红细胞感染率降到20%,自愈时间从22d缩短到20d。感染后第3天,L-Arg组小鼠CD4^+CD69^+T细胞数量[(11.27±0.97)%]、IFN-γ分泌水平[(767.86±20.56)pg/ml]、F4/80^+CD36^+巨噬细胞数量[(36.46±1.33)%]、NO产生水平[(78.66±2.89)μmol/L]、mDCs和pDCs数量[(10.02±0.37)%和(9.01±0.53)%]均显著高于对照组[分别为(7.3±0.68)%、(485.84±39.31)pg/ml、(29.61±0.47)%、(42.51±1.32)μmol/L]、(5.51±0.87)%和(5.60±0.85)%](P<0.05),而感染后第5天均无明显差异。结论 L-Arg预处理可促进DCs的活化,从而促进DBA/2小鼠于感染早期Th1免疫应答进一步有效建立。

夏氏疟原虫感染早期易感和抵抗小鼠树突状细胞亚群和表型的变化特点

目的探讨夏氏疟原虫（Plasmodium chabaudi chabaudi AS）感染早期,树突状细胞（Dendritic cells,DCs）亚群和表型的变化特点。方法感染易感的DBA/2和抵抗的BALB/c小鼠,制备感染前和感染后第3、5、8d小鼠脾细胞悬液,采用流式细胞分析技术检测2种小鼠脾细胞悬液中髓样DCs和浆样DCs的数量以及表面表达MHC Ⅱ类分子和CD80分子的DCs的百分含量。结果 DBA/2小鼠和BALB/c小鼠分别呈现以髓样DCs和浆样DCs为主的增殖模式。2种小鼠表达MHCⅡ类分子和CD80分子的DCs数量在感染后3~5d明显升高,并于感染后第8d达到最高水平,然而感染后第8d,BALB/c小鼠表达MHCⅡ类分子和CD80分子的DCs的数量明显低于DBA/2小鼠。结论感染早期,DBA/2和BALB/c小鼠在DCs亚群的增殖模式、成熟表型特征性分子的表达水平上存在显著差异。

左旋精氨酸上调约氏疟原虫感染DBA/2小鼠的抗体应答效应

探讨左旋精氨酸(L-Arginine,L-Arg)对约氏疟原虫(Plasmodium yoelii17XL,P.y17XL)感染DBA/2小鼠体液免疫应答的调节效应。于P.y17XL感染前7 d,连续每日给予DBA/2小鼠L-Arg(1.5 g/kg体重)灌胃预处理,动态观察各组感染小鼠原虫血症水平和生存率;于感染后第0、8和10天分别提取小鼠脾细胞,流式细胞术检测DBA/2小鼠浆细胞分泌IgG1和IgG2a的水平。与NC组比较,L-Arg能够显著降低感染小鼠的原虫血症水平,自愈时间提前。感染后8 d和10 d,L-Arg组CD138+B220+IgG1+细胞数量出现有意义的增加,感染后10 d,L-Arg组CD138+B220+IgG2a+细胞数量明显升高。L-Arg处理可诱导DBA/2小鼠建立更加有效的抗体免疫应答,明显加速DBA/2感染小鼠清除疟原虫。

长效和短效NO发生剂体内干预疟原虫红内期重要侵袭分子转录水平的观察

为探讨NO对疟原虫红内期侵袭相关分子MSP-1、AMA-1和RhopH complex转录水平的影响。通过雌性BALB/c小鼠腹腔感染1×106致死型约氏疟原虫P.yoelii 17XL,体内给予NO长效(NOC18)和短效(NOC5)发生剂进行干预后,纯化疟原虫成熟裂殖体,提取总RNA,通过Real-time PCR相对定量方法检测MSP-1、AMA-1和RhopH complex的转录水平。结果显示和正常感染组相比,NOC5处理后疟原虫侵入的关键分子MSP-1、AMA-1和RhopH complex的转录水平明显下降;而NOC18处理则未见这一现象。本研究结果提示NO抑制疟原虫侵袭关键分子的转录水平,进而可能下调疟原虫相应蛋白的表达,从而影响疟原虫的侵入过程。

不同维生素免疫调节作用在鼠疟模型中的实验观察

探讨不同维生素对P. y17XL感染BALB/c小鼠的免疫调节作用。将6~8周龄,雌性BALB/c小鼠,随机分为维生素（ V）处理组和对照组。 V处理组小鼠分别经50 mg/kg VA、600 mg/kg VE 或1 g/只VC连续10 d灌胃,0.2 mL/只；对照组小鼠分别给予相同剂量的溶剂（大豆油或生理盐水）处理。之后,各组小鼠分别经腹腔接种1＆#215;106 P. y17XL寄生的红细胞,动态观察感染小鼠原虫血症水平和生存率；流式细胞术检测感染后第0、3和5天小鼠脾细胞树突状细胞（ DCs）亚群（ pDCs与mDCs）百分比及功能分子（ TLR9和MHC域）的表达。与对照组相比,VA和VE处理组小鼠原虫血症水平升高,生存率降低；感染后第5天脾细胞中pDCs与mDCs亚群水平以及DCs表面受体TLR9和表面分子MHC域的表达水平显著下降。相反,VC处理组小鼠原虫血症水平降低,生存率延长,pDCs与mDCs亚群以及TLR9和MHC域的表达水平显著升高。结果表明,不同维生素对疟疾感染产生不同的调控作用,VA和VE通过抑制DCs数量和功能,加重疟疾感染,而VC则促进DCs数量和功能,推迟感染进程。

约氏疟原虫Pys48核酸疫苗传播阻断效应的实验研究

探讨约氏疟原虫(Plasmodium yoelii17XL)Pys48核酸疫苗免疫BALB/c小鼠的特异性抗体产生特点及其效应。将Pys48核酸疫苗肌肉内注射免疫BALB/c小鼠,并以空质粒注射组作为对照,3次免疫后通过P.y17XL攻击小鼠;采用ELISA检测免疫后小鼠血清中特异性抗体水平;通过P.y17XL感染小鼠,取其感染后第3天含有配子体的血液进行体外培养,观察合子、动合子的形成数量。ELISA结果显示疫苗免疫组小鼠血清特异性抗体滴度明显高于对照组;而合子、动合子数量明显低于对照组。提示Pys48核酸疫苗具有良好的免疫原性,免疫小鼠后可以建立起有效的传播阻断效应。

不同地区三甲医院外科感染患者细菌检测及耐药性分析

目前,三甲医院凭借着丰富的医疗资源和较高的医疗水平已经成为患者的就医首选,同时也造成三甲医院门诊量大、住院人数多、医护人员工作量大等弊端,进而引发了以外科感染为首的院内感染。而且,随着临床抗菌药物的滥用,细菌耐药率逐年上升,进一步增加控制感染的难度。

维生素E对P.y17XL感染BALB/c小鼠早期Th1应答的免疫调节作用

目的探讨维生素E对致死型约氏疟原虫感染BALB/c小鼠Th1免疫应答的调节效应。方法将6～8周、雌性BALB/c小鼠经腹腔接种1×106P.yl7XL寄生的红细胞,并随机分为实验组与感染对照组,实验组于感染前10d口服给予VE预处理。流式细胞术检测感染后第0、3、5天脾Tregs的百分含量;ELISA检测脾细胞培养上清中的IFN-γ、IL-10的水平;Griess反应检测脾细胞培养上清中一氧化氮的含量。结果与正常感染组比较:补充VE组Tregs增殖明显增多;补充VE组IFN-γ和NO分泌减少,而IL-10的分泌水平增加。结论在P.yl7XL感染早期,VE预处理可显著抑制Th1免疫应答效应,从而进一步加剧P.y17XL感染BALB/c的死亡进程。

左旋精氨酸通过上调Th1应答介导抗疟保护性免疫

目的探讨左旋精氨酸(L-Arginine,L-Arg)对致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.y17XL)感染BALB/c小鼠Th1免疫应答的调节效应。方法于P.y17XL感染前7天,连续每日给予BALB/c小鼠L-Arg(1.5 g.kg-1体质量)灌胃预处理;动态观察各组感染小鼠原虫血症水平和生存率;于感染后d 0、d 3和d 5分别提取小鼠脾细胞,流式细胞术检测BALB/c小鼠CD4+CD69+T细胞、F4/80+CD36+巨噬细胞数量;ELISA法检测脾细胞培养上清中IFN-γ的分泌水平,Griess反应检测脾细胞培养上清中NO含量。结果与NC组比较,L-Arg能够降低感染小鼠的原虫血症水平,延长生存时间。L-Arg组CD4+CD69+T细胞数量出现有意义的增加,IFN-γ分泌水平明显提高,F4/80+CD36+巨噬细胞数量出现明显升高,NO的分泌也明显增加。结论在感染早期L-Arg处理可诱导Th1免疫应答的有效建立,明显遏制P.y17XL感染早期红内期疟原虫的感染进程。

约氏疟原虫Pys48核酸疫苗免疫效应的观察

目的探讨约氏疟原虫(P.yoelii17XL)Pys48核酸疫苗免疫BALB/c小鼠后免疫功能特点。方法将Pys48核酸疫苗肌肉内注射免疫BALB/c小鼠,并以空质粒注射组和正常小鼠作为对照,3次免疫后4w,处死小鼠;采用ELISA分别对疫苗免疫组和对照组小鼠脾细胞上清的IFN-γ、IL-4进行检测;流式细胞术检测脾中树突状细胞(Dendritic cells,DCs)亚群数量,表达TLR9的DCs的百分含量,以及分泌IgG抗体的B细胞百分含量。结果核酸疫苗免疫组IL-4水平较空质粒对照组和正常对照组均明显升高(P<0.05),IFN-γ水平与其它两组相比差异无统计学意义;脾中髓样DCs(mDCs)的数量在3组间无明显差异,浆细胞样DCs(pDCs)的数量在核酸疫苗免疫组出现有意义地升高,且表达TLR9的DCs的百分含量及分泌IgG抗体的B细胞百分含量均明显高于空质粒对照组和正常对照组(P<0.05)。结论 Pys48核酸疫苗具有良好的免疫原性,免疫小鼠后,通过增强特异性体液免疫发挥疫苗效应。

脂多糖对约氏疟原虫感染DBA/2小鼠感染早期的免疫调节作用

目的本文主要探讨脂多糖(LPS)在致死型约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17×L,Pyl7×L)感染早期的调节作用。方法 6～8w、雌性DBA/2小鼠,随机分为实验组和对照组,经腹腔接种1×106 Pyl7XL寄生的红细胞。实验组于感染后d2静脉给予LPS(25μg/只)。动态观察两组小鼠的原虫血症水平,小鼠脾脏树突亚群及其表面TLR4和活化T细胞的表达水平。结果 (1)两组小鼠于感染后约d15均自愈,LPS处理组小鼠的原虫血症水平在感染后d5-8显著低于对照组;(2)与对照组相比,在感染后d3和d5,LPS处理组小鼠脾脏DCs亚群表达水平显著升高,在感染后d3,TLR4表达水平显著升高。在感染后d5,LPS处理组小鼠脾脏细胞培养初始活化T表达水平显著升高。结论在P.y17×L感染早期,LPS可通过激活TLR4强化DC成熟进一步强化Th1免疫应答反应,降低原虫血症,这将为疫苗的开发提供新的靶点。

卡介苗接种对小鼠伯氏疟原虫感染早期树突状细胞活化状态的影响

为观察疟原虫感染早期卡介苗（BCG）接种对小鼠树突状细胞（DC）活化状态的影响,用Plasmodium berghei ANKA感染C57BL/6小鼠,3天后接种BCG（P.b-3-B实验组）,同时以未接种BCG的感染小鼠为对照.通过动态观察两组感染鼠的原虫血症水平和生存率,流式细胞术检测感染后0、5和8天脾细胞中CD11c＋CD11b＋DC、CD11c＋B220＋DC、CD11c＋CD80＋DC和CD11c＋MHCⅡ＋ DC百分率.结果显示,P.b-3-B实验组的原虫血症从感染后第8天开始逐渐增高,66.7%的小鼠存活至第20天死亡,而对照组小鼠多于感染后8～10天死于脑型疟疾;感染后第5和8天,P.b-3-B实验组小鼠CD11c＋CD11b＋DC、CD11c＋CD80＋DC和CD11c＋MHCⅡ＋DC百分率均显著低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,感染后第8天,CD11c＋B220＋DC百分率也明显低于对照组（P〈0.01）.这些结果表明,疟原虫感染早期接种BCG可下调DC亚群百分率和表面分子表达水平,并以此影响疟疾的感染进程.

地塞米松对P.y17XL感染DBA/2小鼠早期免疫应答的影响

目的探讨地塞米松对约氏疟原虫(Plasmodium yoelii 17XL,P.y17XL)感染DBA/2小鼠早期免疫应答的调节效应机制。方法 6～8周、雌性DBA/2小鼠,随机分为实验组和对照组,经腹腔接种1×106P.yl7XL寄生的红细胞,实验组于感染后第1和2天尾静脉给予地塞米松处理。动态观察各组感染小鼠原虫血症水平和生存率;于感染后第0天、3天和5天分别提取小鼠脾细胞,流式细胞术检测树突状细胞(DCs)亚群(髓样树突与浆样树突)百分比及功能分子的表达,CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞总数的百分比;ELISA法检测脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-10的分泌水平;Griess反应检测脾细胞培养上清中一氧化氮(NO)含量。结果与正常感染组相比,地塞米松处理组:①生存率明显降低;②感染后第3和5天脾细胞中两种树突状细胞亚群水平以及DCs表面MHCⅡ类分子和共刺激分子CD86的表达水平显著下降,而CD4+CD25+Foxp3+T细胞仅于感染后第3天降低,而第5天之后则明显升高;③脾细胞培养上清中IFN-γ、IL-10、NO的产生水平均明显降低。结论地塞米松由于显著抑制DBA/2小鼠抵御P.y17XL感染保护性免疫应答的建立,从而致其死亡。

不同地区三级甲等医院住院病人对男护士的认知态度以及男护士短缺的相关影响因素调查

[目的]分析调查我国不同地区三级甲等医院内住院病人对男护士的认知态度以及接纳情况,并分析男护士短缺的相关影响因素。[方法]随机抽取4个医院的住院病人1 600例,每个医院均抽取400例,对比观察不同地区住院病人对男护士的认知程度、对男护士的接纳情况,并分析不同地区男护士短缺的相关影响因素。[结果]在对男护士的认知态度上,东南地区与中南地区显著高于西北地区与东北地区(P<0.05);在对男护士的接纳情况上,东南地区与中南地区显著高于西北地区以及东北地区(P<0.05);在对相关影响因素进行多元回归分析后得出其中不同性别、文化程度的住院病人对男护士的接纳态度存在显著差异(P<0.05);不同地区男护士短缺的相关影响因素并不相同,但各个地区排在首位的均为传统观念的影响。[结论]我国住院病人对男护士的总体知晓率较高,但是接纳程度仍较低,男护士的社会地位仍然不高,目前造成我国不同地区男护士短缺的首要影响因素为传统观念的影响。

糖原合成激酶3不同亚型的研究进展及其前景展望

糖原合成激酶3存在着α和β两种亚型,人体内各种复杂的生理过程都与糖原合成激酶3密切相关,糖原合成激酶3不仅参与了肿瘤细胞的侵袭、转移、凋零,其也参与了细胞周期的加速。其多元化的生物学活性调节方式导致其在不同类型的恶性肿瘤中所起的作用并不相同,本文将从糖原合成激酶3不同亚型的结构构成,以及糖原合成激酶3不同亚型的研究进展做一个综述,并对糖原合成激酶3抑制剂的开开发前景做一个展望。

我国不同地区三甲医院患者鲍曼不动杆菌的分布及耐药性比较

目的总结东南、西北、中南、东北、华北以及华东地区2014年6月—2015年6月9个大型三甲医院鲍曼不动杆菌的分布及其耐药性,为临床合理用药提供依据。方法收集2014年6月—2015年6月入院且发生鲍曼不动杆菌感染的患者,对其痰、分泌物、血液等进行分离培养。药敏实验方法按CLSI规定的标准进行,并采用WHONET 5.6软件进行计数、SPSS 20.0软件进行统计分析。结果各地区住院患者共分离1 950株鲍曼不动杆菌,主要来自于中心ICU(16.63±4.36)%、神经外科(15.97±4.28)%、普通外科(14.29±2.01)%和心血管内科(17.92±2.66)%。样本来源主要是痰(72.84±3.52)%,其次还主要来源于尿液(7.38±1.53)%和胸/腹水(5.65±1.89)%。鲍曼不动杆菌对本实验中各种抗菌药物的耐药率均>60%。结论鲍曼不动杆菌在心血管内科和中心ICU最多,可能是由于病人抵抗力虚弱造成的。就当前来看,鲍曼不动杆菌对目前常用的抗菌药物普遍耐药。因此,加强对鲍曼不动杆菌耐药性的检测,防止其播散流行,是最好的感染控制的方式。

血糖仪与全自动生化仪检测末梢血和静脉血血糖的比较

目的 比较血糖仪与全自动生化仪检测末梢血和静脉血的一致性. 方法 选取2012年11～12月于我科门诊就诊的糖尿病和非糖尿病患者197例,使用3款血糖仪和日立7180全自动生化分析仪分别检测末梢血和静脉血血糖,并行线性回归分析和配对t检验. 结果 当红细胞压积（Hct）在35.1％～51.6％时,3款血糖仪与日立7180相关性顺序由高到低为罗氏Accuchek（末梢血：R2=0.968,静脉血：R2=0.966）、爱科莱GT-1920、强生One Touch.爱科莱GT-1920检测末梢血与日立7180的偏倚较小,检测静脉血的偏倚较大.罗氏Accuchek检测静脉血的均值低于日立7180.强生One Touch的偏倚约为10％. 结论3 款血糖仪与全自动生化分析仪相关性均较好,Hct可对两者的相关性造成影响.

一氧化氮对疟原虫侵袭相关分子转录水平影响

目的探讨一氧化氮(NO)对疟原虫红内期侵袭相关分子MSP-1、AMA-1和Py 235转录水平影响。方法雌性BALB/c小鼠腹腔注射1×106个致死型约氏疟原虫P.yoelii 17XL感染红细胞,疟原血症达到60%～80%,腹腔注射NO短效发生剂NOC 5,孵育30 min,纯化疟原虫成熟裂殖体,提取总RNA,通过实时定量PCR相对定量方法检测MSP1、AMA1和Py 235转录水平。结果 NO处理后MSP1和AMA1 2种分子mRNA表达水平分别为(0.54±0.02)和(0.37±0.01),与对照组比较,明显降低(P<0.01);作为疟原虫毒力标志的检测基因PYO 5054mRNA表达水平呈下调表现(P<0.05)。结论 NO抑制疟原虫侵袭关键分子转录水平,从而可能影响疟原虫的侵入过程。