小白链霉菌中CRISPR-Cas9基因敲除系统的构建与优化

小白链霉菌(Streptomyces albulus)是工业上生产ε-聚赖氨酸的主要菌株。为提高S.albulus的ε-聚赖氨酸合成能力,基于诱变和抗性筛选的传统育种方法被普遍应用。然而,由于传统育种存在“疲劳效应”,当前S.albulus的育种陷入了瓶颈。为利用代谢工程方法进一步提高S.albulus的ε-聚赖氨酸合成能力,亟需建立基于CRISPR-Cas9的基因编辑方法。为此,该文以S.albulus GS114为研究对象,以ε-聚赖氨酸合成酶基因pls为靶基因,构建了CRISPR-Cas9基因敲除系统,成功敲除了pls,编辑效率为100%。为进一步提高获得的敲除株数量,对S.albulus GS114结合转移条件进行了系统优化,获得的最优结合转移条件为:供受体比例1∶1,镁离子浓度30 mmol/L,55℃热激孢子10 min,培养20 h后覆盖抗生素。在最优转移条件下,结合转移效率达到2.5×10^(-8),较优化前提高了78%。该研究结果一方面为后续S.albulus的代谢工程改造提供了重要工具,另一方面为其他工业链霉菌构建CRISPR-Cas系统提供了重要参考。

浓香型白酒中短链脂肪酸及其乙酯对人体的影响

酒精性肝脏疾病(alcoholic liver disease,ALD)是一种全球性疾病,其与长期过量摄入酒精有关。除了戒除酒精以外,充分发挥酒精饮料中健康因子的功效也能减轻酒精成分对人体的损害。浓香型白酒是我国销量最高的白酒,浓香型白酒中潜在健康因子短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)含量高,且对浓香型白酒有重要的风味贡献。这些SCFAs主要是窖泥中梭菌的代谢产物,它们能加快乙醇在体内的代谢,降低白酒的醉度,影响肠道内微生物的生长代谢,保护肠黏膜屏障,参与宿主免疫与炎性反应,与ALD进程密切联系,具有一定的生物活性。该文将对浓香型白酒中SCFAs及其乙酯的产生及生理功效进行综述。

公路工程试验检测技术在施工中的应用探析

随着我国公路工程的进步,公路的相关基础设施建设也应该逐渐完善,在这种情况下,我们要日益关注公路工程的质量安全。公路工程的质量控制在整个工程的施工之中是非常重要的,通过公路工程的检测能够进一步提高公路工程的质量,帮助我们更好的管理工程。结合笔者的实践经验,本文主要探讨了公路工程检测在公路工程质量控制中的应用,以供广大学者和读者朋友参考。

浅析西部地区的基础设施建设

在实施西部地区基础设施建设中,须要解放思想,转变观念,抓住机遇,搞好各项基建项目,改善投资环境,搞好服务,促进发展.……

骑行羌塘困难级"北方的空地"

最后的荒原艰难抉择荒凉、寂寥却又别样美丽的大羌塘,地球上最后一块净土,是藏羚羊、野耗牛等珍稀野生动物的天堂。但对于人类来说,高寒缺氧、复杂地貌、动物侵袭以及变幻莫测的恶劣气候,加之身体、心理、经验、食物、水源等诸多不确定因素,危机四伏随时可能丧命的极端环境被称为生命禁区。