医学实验用Beagle犬SPF化研究初探

用Beagle犬进行医学实验,具有良好的均一性,重复性和可比性。目前,已被国际上公认用医学实验用犬。然而用普通Beagle犬做实验,由于本身的健康状态,往往干扰实验结果的正确判断和科学研究的顺利进行。在血清学、放射生物学、微生物学及免疫学等方面的研究上,更是迫切需要SPF Beagle犬。鉴于此,确立了本项研究。

医学实验用Beagle犬SPF化研究初探

用Beagle犬进行医学实验,具有良好的均一性,重复性和可比性。目前,已被国际上公认为医学实验用犬。然而用普通Beagle犬做实验,由于本身的健康状态。

SPF级Beagle犬的人工饲育

本文报告在中型聚氯乙烯薄膜隔离器内,经剖腹产和人工哺乳共育成6条(2胎)SPF级Beagle犬。人工乳是在参考他人工作结果的基础上,采用市售奶粉及宝宝乐乳儿粉以一定比例配制而成的,经50万rad钴-60γ射线灭菌消毒后,再结合仔犬的营养需要,添加适当的维生素。经过5周人工哺乳,仔犬离乳时体重与普通饲养仔犬接近,离乳后生长良好。经微生物学检测,仔犬均已达到SPF级。

培育无菌级犬的改良剖腹产技术

我们实验用无菌级大鼠、小鼠、仓鼠以及家兔的培育均已分别获得成功,大中型无菌动物技术在国外亦早已应用。为了提高我国实验用犬的品质,配合“90清洁动物年”的行动,为制定实验用犬的标准以及开展犬病研究和建立疾病模型等工作打下基础,我部现正着手各项准备工作,以培育实验用的无菌级犬。按过去操作常规,每取一胎无菌仔畜,就要牺牲一只临产前母畜(机械处死),从腹腔取出完整的子宫,通过药液消毒送入操作隔离器,然后剪开子宫、胎盘、取出仔畜,使其复苏,再移至育仔隔离器培育。

犬细小病毒性肠炎诊断方法改进——血凝抑制试验稳定性研究

关于犬细小病毒性肠炎的诊断研究,文献中报道的检测方法有电镜与免疫电镜技术、血凝与血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验、血清中和试验以及免疫荧光技术等。其中以血凝及血凝抑制试验最为常用。该法操作简便,价格低廉,无需特殊仪器,而且敏感性及特异性较高,故而是目前已被接受并经常应用于检测大细小病毒抗原抗体的方法。国外文献报道的血凝抑制试验中所采用的血凝抗原都为细胞培养病毒液。该病毒液需经三氟三氯乙烷处理并经多次离心后方作为血凝素使用。国内文献报道的血凝抑制试验多采用夏咸柱等作者(1983)所描述的方法。该法所用血凝素为粪便提取物,其配制过程复杂。

酶联免疫吸附试验测定Beagle犬抗犬瘟热病毒抗体

犬瘟热(Canine Distemper)是一种感染犬、貂的病毒性疾病。由于其传染性强,常可引起感染动物尤其是幼大、幼貂的死亡。确实有效的免疫措施和快速的检测手段是防治该病的关键。酶联免疫吸附试验由于其快速、敏感及特异性高等特点,己广泛应用于检测各种抗病毒抗体。本文建立了检测抗犬瘟热病毒抗体IgM和IgG的酶联免疫吸附试验,为评价犬瘟热疫苗的免疫效果和早期辅助诊断犬瘟热提供一个切实可行的方法。材料与方法一、犬瘟热病毒的培养 1.动物接种:将美国 ATCC的犬瘟热病毒株0.2ml滴鼻感染2月龄草犬,一周后草犬出现发热、拒食、腹泻、皮疹、咳嗽等典型的犬瘟热体征。

酶联免疫吸附试验测定Beagle犬抗犬瘟热病毒抗体

犬瘟热是一种感染犬、貂的病毒性疾病,由于其传染性强,常可引起感染动物尤其是幼犬、幼貂死亡。有效的免疫措施和快速的检测手段是防治该病的关键。本文以美国ATCC的犬瘟热病毒株经鸡胚培养,获得大量大瘟热病毒抗原,经60%蔗糖垫底超离和氯化铯平衡梯度离心提纯,可在电镜下观察到大量犬瘟热病毒颗粒。以此提纯的犬瘟热病毒作为包被抗原,建立酶联免疫吸附试验间接法测定抗犬瘟热病毒抗体,具有可靠的特异性和敏感性。测定本部38份Beagle幼犬和55份Beagle成年犬血清抗犬瘟热病毒IgM和IgG效价。

犬细小病毒的分离与鉴定

应用猫肾F-81系传代细胞,采用同步接毒的方法及无牛血清细胞培养法,从临床患出血性肠炎犬粪中分离到一株病毒。通过对第6代细胞培养病毒液进行电镜形态观察、病毒理化特性试验、核酸型测定、幼犬人工感染试验、血凝及血凝抑制试验,以及用标准抗CPV免疫血清进行病毒中和试验及免疫电镜观察等系统鉴定,证明该病毒株为犬细小病毒。在病毒的分离培养过程中,比较了细胞培养维持液中牛血清成份对病毒增殖的影响,发现含2％胎牛血清的细胞维持液对犬细小病毒的生长有抑制作用。采用无牛血清的细胞培养维持液,则有利于犬细小病毒的增殖。建议采用无牛血清细胞维持流培养犬细小病毒,以利提高犬细小病毒的产率。