丝素缺失突变型家蚕添食罗丹明B制备彩色荧光丝胶的研究

具有高生物相容性和生物活性的荧光材料在创伤修复、药物递送、传感器、生物测定与成像等许多领域因便于示踪或实时监测而备受青睐。对丝素缺失突变型家蚕添食荧光染料罗丹明B,系统地研究添食罗丹明B对家蚕生理指标和茧质的影响,同时研究罗丹明B在家蚕体内的转移,以及添食后丝腺中丝胶液和蚕茧中罗丹明B的含量,制备彩色荧光丝胶纤维支架并分析其细胞相容性。结果表明,添食罗丹明B后家蚕幼虫体色、蚕茧或纤维支架均呈粉红色,随着罗丹明B添加量的增加,罗丹明B在家蚕体内存留量也随之提高,6 mg/mL罗丹明B处理组家蚕丝腺中丝胶液和蚕茧中的罗丹明B含量分别为0.011 mg/mL和0.166 mg/g;添食罗丹明B对家蚕的生命力和茧质均有显著影响,随着罗丹明B添加量的增加,家蚕的生命力和茧质均呈现下降趋势;添食获得的含有罗丹明B的蚕茧或纤维支架具有强荧光特性;添食罗丹明B可获得平整、均一的彩色荧光丝胶纤维支架,且该荧光支架无细胞毒性。综上,对丝素缺失突变型家蚕添食荧光色素是获得新型荧光丝胶材料的可行性途径。

家蚕Tret1-X1基因对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的基因表达和基因组复制的影响

家蚕促海藻糖转运蛋白1异构体X1(Bombyx mori facilitated trehalose transporter Tret1-like isoform X1,BmTret1-X1)主要参与家蚕糖代谢过程。为探究其在家蚕抗BmNPV感染过程中的作用,克隆BmNPV抗性家蚕品系AN与易感品系C108的BmTret1-X1基因,发现基因编码区存在4个SNP导致的氨基酸改变,两者的预测蛋白质结构存在差异。利用pIZT/V5-His-mCherry表达载体在BmN细胞中过表达BmTret1-X1,BmNPV感染后24 h、48 h的BmNPV增殖受到抑制,BmNPV基因lef-3、vp39、p10和gp64的转录水平低于对照组(P<0.05),其中感染后24 h vp39基因的表达量与对照组相比差异达1 089倍,细胞中病毒基因组DNA复制也受到明显抑制。转染BmTret1-X1基因siRNA使BmN细胞中该基因表达量降低约一半,BmNPV的lef-3、vp39、p10和gp64转录水平升高,但BmNPV增殖和基因组DNA复制水平未见明显变化。综上所述,BmN细胞中BmTret1-X1基因的高表达对BmNPV的基因表达、DNA复制及病毒增殖具有抑制作用,该基因在家蚕对BmNPV的抗性形成过程中具有一定作用。

家蚕精子介导转基因技术体系的优化

为了构建高效的家蚕转基因技术,对采用piggyBac转座载体的家蚕精子介导转基因的主要技术参数进行优化,结果表明外源DNA的稀释剂和注射方式对导入效率影响较大,G0代未整合的外源DNA在5龄期前基本被降解破坏。推荐的家蚕精子介导基因转移技术方案为:处女蛾交尾囊注射6～8μL以0.1×TE稀释的2 g/Lpig-gyBac转座子载体DNA后正常交配产卵,根据G0代5龄期及蛾期PCR检测标记基因为阳性的蛾区自交,G1代阳性个体自交以获得纯合后代。

镇江蚕桑文化保护与发展研究

为了更好地保护和发展镇江蚕桑文化,文章对其特点和现状进行了深入地研究。近年来由于过度追求经济增长效益和效率,对蚕桑文化缺乏重视、宣传和发展规划,导致镇江蚕桑文化保护和发展非常滞后。针对存在的问题,提出解决策略:合理规划,强化宣传;加强对蚕桑文化古建筑保护;强化蚕桑文化内涵建设;与文化旅游融合发展;建设蚕桑文化主题公园;开发蚕桑特色文化产品;加强蚕桑科普文化建设。

家蚕人工授精关键技术的研究

1材料与方法 1．1材料家蚕品种为菁松、皓月，由该研究室提供；解剖镜为OLYMPUS SZ51；精子细胞采集所用器材均为自制。Penicillin—Streptomycin和胰蛋白酶购自Invitrogen公司。TC-100培养基购自Sigma公司。

电穿孔技术及其在精子介导转基因中的应用

介绍了电穿孔技术和精子介导转基因技术,同时总结了近年来电穿孔技术在精子介导转基因中的应用进展。

家蚕人工授精关键技术的研究

[目的]研究高效的家蚕人工授精技术。[方法]取雌蛾交配约30min后的交尾囊,通过挤压离心提取精细胞,胰蛋白酶处理后进行交尾囊注射。[结果]建立了家蚕精子细胞高效采集技术;2人解剖操作,每h可取得精液100μl左右;显微镜观测精子细胞活率达80%以上;精液的纯度较好,家蚕的受精率平均达76.5%。[结论]高效家蚕精液提取处理技术的建立为家蚕精子其他相关技术的研究提供技术基础。

基于“微信”的药理学辅助教学平台实践研究

构建基于"微信"的辅助教学平台对于弥补传统教学平台的不足具有重要意义。本课题研究了基于"微信"的药理学辅助教学平台的构建与实施。该平台促进了学生学习药理学的主动性、便捷性、互动性和有效性,有助于药理学教学质量的提高。

高校校企协同研究生培养模式研究

文章阐述了高校校企协同研究生培养的优势,分析了我国高校校企协同培养研究生机制存在的主要问题,指出了高校校企协同研究生培养模式的构建方法,包括创新和完善协同培养机制;提高人才培养与企业需求契合度;政府切实发挥在协同培养中的主导作用。

所院“融合管理”模式下本科生导师制的实践探索

本科生导师制度是高等教育因材施教和人文教育的重要举措。本文探讨了江苏科技大学蚕业研究所和生物技术学院在所院融合管理的新模式下,在本科生导师制的实践与探索方面取得的经验与成绩,以期为其他类似的高等教育机构在人才培养方面提供借鉴。

dsRNA对家蚕核型多角体病毒复制增殖的抑制效果

以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)复制必需的极早期基因ie-1和细胞释放型病毒CRV入侵关键基因gp64为靶序列,分别人工设计并体外转录出dsRNA I1(438 bp)和dsRNA G1(337 bp),用家蚕培养细胞BmN研究目标dsRNA对BmNPV复制、增殖的抑制效果。结果表明:dsRNA I1能有效地抑制BmNPV在BmN细胞中的增殖,最大抑制效果使培养液中的病毒滴度(TC ID50)比对照降低了104.30倍;dsRNA G1能显著地抑制新形成的病毒粒子的细胞侵染能力,最高可使培养液中的病毒滴度降低103.17倍。

电动桑树伐条机的研制

电动桑树伐条机采用直流电机驱动,滚珠丝杠机构传动,集成电路控制,并对刀刃楔角、刀刃形状进行了省力化设计,样机手持部分质量<1 kg。经中试表明,该机安全省力、轻便高效,桑园伐条最高工效>2 000枝/h,最大剪切直径32 mm,是适用于规模化蚕桑生产的新型桑树伐条作业工具。

响应面法优化桑椹白藜芦醇的提取工艺条件

白藜芦醇是一种具有抗氧化、抑菌、抗癌、保护心血管、延缓衰老等诸多生理作用的多酚化合物。以药食两用的桑椹为原料,在单因素试验基础上,采用中心组合法设计响应面试验优化桑椹白藜芦醇的提取工艺条件。结果表明,桑椹中白藜芦醇提取的最佳工艺参数为:以甲醇作为提取剂,料液比1∶30,提取温度27.5℃,提取时间8.0 h。通过液相色谱对桑椹中的白藜芦醇进行定性定量分析,桑椹冻干粉中白藜芦醇的提取量为315.30μg/g。

小型反向式切桑机的研制及主要技术参数的优化试验

为提高蚕桑生产中切桑作业的工效和质量,满足小蚕共育规模化发展的需要,研制了一种小型反向式切桑机具。该机由独特结构的带齿形刀的刀辊、圆刀片组和定刀构成,三者之间的配合完成对桑叶横向和纵向切割,具有工效高、可保持桑叶新鲜度及造价低廉等特点。根据该机的切碎原理及工作过程,分析影响桑叶切碎质量的主要因素,通过对主要工作部件圆刀片组、刀辊的技术参数的分析及单因素试验,确定机具的最佳工作参数为:齿形刀与圆刀片组之间的间隙1.5～2.0 mm,齿形刀楔角12°,齿形刀厚度3 mm,圆刀片组转速1 000～1 200 r/min,刀辊转速650 r/min,输送带速度0.11 m/s。样机试用切桑工效达到400 kg/h,是人工切桑的12倍以上。

小蚕共育室温湿度无线调控系统设计——基于ZigBee

为克服小蚕共育室现有调控系统接线复杂、防腐性和稳定性差以及安装维护困难等问题,开发了一种基于ZigBee技术的温湿度无线数据采集和控制系统。该系统由上位PC机、以射频芯片CC2430为核心的中心控制器、无线传感器和执行机构组成,上位机软件在VisuaiC++平台上开发而成。运行结果表明,温度控制精度为0.5℃,湿度精度为2%RH,系统运行稳定可靠。

SAGE技术及其应用

综述了基因表达系列分析(Serial analysis of gene expression,SAGE)技术的基本原理和最近SAGE技术的应用情况以及在家蚕功能基因研究中的应用前景。

利用在线近红外光谱鉴别雌雄蚕蛹的方法

采用自动识别雌雄蚕蛹的技术与设备,是解决蚕种生产人工鉴蛹人力短缺和保证鉴蛹正确率的有效途径之一。以6个家蚕品种的蚕蛹供试,利用自制的在线近红外光谱检测装置进行雌雄蛹的鉴别。分别以3种采谱条件采集各供试家蚕品种蚕蛹样品的近红外光谱,以采用全谱和经竞争性自适应重加权算法（CARS）、无信息变量消除法（UVE）优选后的波长变量分别建立偏最小二乘判别分析（PLSDA）的雌雄蚕蛹识别模型。测试结果显示,在3种采谱条件下,以单个家蚕品种的光谱数据建模时雌雄蚕蛹鉴别的正确率达100%;多个家蚕品种的蚕蛹混合后采集光谱数据建模,其中采用方法 a（积分时间8 ms,扫描次数5次）、方法 b（积分时间为8 ms,扫描次数10次）、方法 c（积分时间20 ms,扫描次数10次）获取光谱数据建模的鉴别正确率分别达94.2%、95.2%、100.0%。选择高速采集光谱的方法 a,经CARS法优选波长后建模的测试结果优于经UVE法优选波长建模的结果,对校正集、交叉验证集和预测集蚕蛹样品的雌雄识别正确率分别为100%、100%和96.2%。研制的在线近红外光谱检测装置及建立的检测方法与模型,可应用于蚕种生产中快速鉴别分选雌雄蚕蛹。

家蚕转录因子AP-4基因cDNA的分子克隆与生物信息学分析

AP-4(activator protein 4)是一种转录因子,在生物的生长发育中有重要作用。根据家蚕表达序列标签(EST)并利用cDNA末端快速扩增(RACE)方法克隆了家蚕AP-4(Bombyx mori activator protein4)基因,结合生物信息学方法对所获的序列进行开放阅读框、序列同源性分析,预测了AP-4蛋白的理化性质。获得的家蚕AP-4基因cDNA的全长为1621bp,其开放阅读框为996bp,编码331个氨基酸,基因由3个外显子和2个内含子组成。同源性比对表明该基因推导的氨基酸序列与棉铃虫AP-4和谷蛀虫AP-4推测的蛋白同源性分别为76%和54%,第45-99位氨基酸序列是一个典型的保守结构域。实时定量RT-PCR显示该基因在所检测家蚕的各发育时期中,除幼虫1龄和蛹期第4天无表达外,其它时期均有表达,其中幼虫3龄和4龄期的表达量较高。

生物类专业课程思政的教学探索与实践——以《微生物学》为例

微生物学课程是一门与人类日常生活密切相关的学科,同时也是医药类、食品、生物专业开设的一门专业基础课程。本文分析微生物学课程目前思政教育的现状和存在的问题,对课程思政理念融于微生物课程教学从教师素质、知识点与案列、历史人物及授课实践等几方面开展课程思政教育的途径和具体举措进行探索和实践,同时,为其他自然科学类课程课程思政教学提供借鉴和参考。

家蚕生物钟基因Bmtim2的克隆与序列分析

[目的]为进一步研究家蚕生物钟基因的功能提供依据。[方法]从家蚕品种p50未受精卵提取总RNA,利用快速扩增cDNA末端(RACE)技术克隆家蚕生物钟基因Bmtim2cDNA序列。最后运用实时定量RT-PCR对该基因在家蚕不同发育时期的表达情况进行初步分析。[结果]利用RACE扩增,获得长度为1867bp、包括完整3'非翻译区的家蚕生物钟基因timeless2(Bmtim2)cDNA序列。经推导,获得该基因序列编码的584个氨基酸残基的蛋白质序列。该蛋白序列具有TIM蛋白的C末端保守区,与黑腹果蝇、尖音库蚊的TIM2基因具有近缘进化关系。Bmtim2基因在家蚕生活周期各时点均有表达。[结论]该结果对研究Bmtim2基因在家蚕发育过程的时空表达差异及其与日周节律的关系具有参考价值。