应用猪瘟抗体免疫金标试纸检测猪瘟抗体的比较试验和改进试验

目前国内对猪瘟抗体水平检测方法有ELISA检测法,DOT—ELISA检测法、单抗ELISA检测法和猪瘟正向间接血凝法。这些方法虽然都具有微量、特异、准确的优点，但需要比较完备的实验仪器和经验丰富的技术人员，一次检测至少需要4h，对于基层兽医站、兽医诊所和养猪场不适用。猪瘟抗体免疫金标试纸的研制成功开创了猪瘟抗体水平检测的新方法，该方法操作简便，不需要任何仪器设备及复杂的样品处理，检测一个样品只需5～10min，操作简便、快速、准确、灵敏度高、直观、结果容易判定，非常适应于基层兽医站和各养猪场使用。基层兽医站和各养猪场（户）可应用猪瘟抗体免疫金标试纸进行猪瘟抗体监测。但金标试纸条是新开发的一种全新猪瘟抗体检测方法，其应用有待于继续研究，针对这种情况，试验对三种检测方法进行了比较研究，并对金标试纸条法进行了改进研究，使金标试纸条法的检测结果与其他方法的符合率达到了无显著差异的水平。

鸡传染性支气管炎病毒一步法RT-qPCR检测方法的建立

研究旨在建立一种快速、高效、敏感、特异性强的方法以检测鸡传染性支气管炎病毒。通过比对鸡源传染性支气管炎病毒M基因的保守序列,设计并合成1对特异性引物和1条特异性TaqMan探针;通过优化反应条件,建立检测鸡传染性支气管炎病毒的一步法实时定量RT-qPCR方法。以重组质粒为模板制作标准曲线,并对方法各项指标进行评价。结果显示,该曲线标准曲线方程为:y=-3.442logx+37.614,相关系数R^(2)=0.991;此方法灵敏度较高,最低可检测到1.0×10^(2)copies/μL,比普通PCR灵敏100倍;特异性强,与4种常见鸡病毒病无交叉反应,重复性试验组间以及组内变异系数均小于2%。研究表明,此方法操作简便,可直接用作粗提RNA的模板检测,灵敏度高、特异性强、重复性好,可应用于鸡传染性支气管炎病毒早期检测。