人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤细胞B16的增殖抑制及对Bcl-2/Bax表达的影响

研究人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤细胞的增殖抑制作用及对Bcl-2/Bax表达的的影响:(1)MTT法测定人参水溶性总蛋白对黑色素瘤B16细胞株的增殖抑制率。(2)RT-PCR(Real-time PCR)法检测Bcl-2、Bax基因的mRNA表达情况。(3)Western blot测定凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:(1)人参水溶性总蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞株有明显的增殖抑制作用,其抑制率随着加药浓度的增加而升高;并与加药浓度呈现一定的量效关系。(2)随着人参水溶性总蛋白浓度的增高(0、100、500、1 000μg/m L),RT-PCR检测的Bcl-2 mRNA相对表达量逐渐降低,Bax mRNA相对表达量逐渐升高,当加药浓度为1 000μg/m L时,Bcl-2的相对表达量最低,为0.20±0.05;Bax的相对表达量最高,为16.83±0.07;与对照组相比,Bcl-2和Bax基因的相对表达量差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)经Western blot测定,各组Bcl-2蛋白的表达均低于对照组,各组Bax蛋白表达均高于对照组,且随着加药浓度的增加,Bcl-2蛋白表达量逐渐降低,Bax蛋白表达量逐渐升高。说明人参水溶性总蛋白可以抑制小鼠黑色素瘤B16细胞株增殖,其分子机制可能与调控Bcl-2/Bax凋亡蛋白的表达有关。

临江市中药资源调查研究

通过对临江市中药资源的系统调查,并走访调查当地中药传统知识的应用情况,研究临江中药资源种类、蕴藏量及药用价值,为当地野生中药资源开发利用提供指导。采用样地、样方定点调查,结合野踏非定点方式调查中药资源分布,同时统计相关数据。共调查野生药用植物86科331种。首次报道东北地区新物种菊科款冬,不仅掌握了临江市款冬的分布及发育状况,同时为《东北检索表》的完善提供重要依据。

人参水溶性总蛋白对BALB/3T3细胞增殖以及对COLⅠ和TGF-β1基因表达的影响

目的观察不同质量浓度的人参水溶性总蛋白对小鼠胚胎成纤维(BALB/3T3)细胞增殖以及对Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)和转化生长因子β1(TGF-β1)基因表达的影响。方法应用细胞培养技术,对BALB/3T3细胞进行培养,以不同质量浓度的人参水溶性总蛋白加入BALB/3T3细胞中,采用噻唑蓝(MTT)法检测人参水溶性总蛋白对BALB/3T3细胞的增殖影响,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测COLⅠ和TGF-β1 mRNA的表达,采用蛋白印迹(Western blot)法检测COLⅠ和TGF-β1的蛋白表达。结果 MTT法显示,人参水溶性总蛋白能够促进小鼠BALB/3T3细胞的增殖,并且随着人参水溶性总蛋白质量浓度的增加,细胞的增殖率逐渐增加;RT-PCR显示,与对照组比较,随着给药质量浓度的增加,COLⅠ和TGF-β1的mRNA表达逐渐增加;Western blot显示,经过处理的BALB/3T3细胞,随着给药质量浓度的增加,COLⅠ和TGF-β1的蛋白表达量逐渐增加。结论人参水溶性总蛋白能够促进小鼠BALB/3T3细胞的增殖,其增殖作用在分子水平上与可能与调控COLⅠ和TGF-β1蛋白的表达有关。

全氟磺酸树脂催化合成丁酮乙二醇缩酮的研究

以废弃的全氟磺酸树脂为催化剂,丁酮和乙二醇为原料合成了丁酮乙二醇缩酮。实验表明:当最佳醇酮摩尔比为2∶1,催化剂用量为0.5g,反应时间为2h,带水剂用量为9.7mL时丁酮乙二醇缩酮的最高产率可达到87.3%。该催化剂绿色环保且易于回收,重复使用五次产率仍可达到81.1%。

人参抗菌蛋白的研究进展

人参是驰名中外的名贵中药材,具有较高的药用和经济价值。人参病害成为人参应用的主要制约因素。现代分子生物学的发展为人参抗病研究提供了新的手段。目前已发现的人参抗菌蛋白有脂质转运蛋白、亲环素、防御素以及PR-4和PR-10等,对人参多种致病菌均有抑制作用,为人参病害防治提供了有价值的参考。

响应面法优化枸杞水溶性蛋白提取工艺

通过响应面法(RSM)确定枸杞水溶性蛋白最佳提取工艺。以枸杞蛋白提取率为指标,通过单因素试验考察各个影响因素对枸杞蛋白提取率的影响程度。在此基础上,应用响应面分析法(RSM)优化提取供工艺条件,确定最佳提取工艺。依据design expert8.0.6试验软件回归分析确定提取时间对枸杞水溶性蛋白提取率影响较大,分析得出枸杞水溶性蛋白提取的最佳工艺参数为p H8.60,液料比18.83∶1(m L/g),提取时间9.79 h。此条件下枸杞水溶性蛋白理论提取率7.82%。但考虑到此参数给实际操作带来了诸多不便,故把枸杞水溶性蛋白的提取最佳工艺条件修正为p H9.0,提取时间10 h,液料比20∶1(m L/g)。对修正参数进行3次重复验证试验得枸杞水溶性蛋白的实际提取率为7.69%,与预测值接近。

响应面法优化莲子蛋白提取工艺研究

目的:研究莲子蛋白质水提取的最佳条件。方法:在单因素试验分析的基础上,采用合理的实验设计方案,通过响应面法优化莲子蛋白的提取条件。结果:提取莲子蛋白的最佳工艺参数为提取p H值8.0,料液比1∶15,提取时间7 h,蛋白提取率为14.53%。结论:响应面法优化的莲子蛋白提取条件简便易行,准确性和重现性好,具有实际应用价值。

国产头孢替唑钠用于临床急性呼吸道及泌尿道感染治疗的疗效观察

目的评价国产头孢替唑钠用于急性呼吸道及泌尿道感染治疗的有效性及安全性。方法以进口注射用头孢替唑钠(特子社复)为对照,136例急性呼吸道及泌尿道感染患者随机分为观察组(n=70)和对照组(n=66),分别接受国产和进口注射用头孢替唑钠治疗,疗程均为7～14d。以临床有效率和细菌清除率评价药物疗效,以不良反应发生率评价其安全性。结果观察组和对照组临床有效率和细菌清除率分别为94.3%对92.5%,89.7%对87.0%;不良反应发生率分别为5.7%对6.1%,组间相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论国产头孢替唑钠用于急性呼吸道及泌尿道感染疗效及安全性与进口头孢替唑钠相当。

siRNA沉默胸腺素β_4对鹿茸间充质干细胞增殖的影响

目的利用siRNA干扰技术研究胸腺素β_4(Tβ_4)基因沉默对鹿茸间充质干细胞(MSC)增殖的影响。方法鹿茸MCS分为阴性对照组、siRNA-Tβ_4转染组2组。MTT检测MSC增殖的变化,Real-time PCR检测ILK、AKT及Cyclin D1 mRNA表达量差异变化,Western blot检测AKT及P-AKT蛋白含量变化。结果 siRNA-Tβ_4转染组MSC增殖受到显著抑制(P<0.01);siRNA-Tβ_4转染组ILK、Cyclin D1 mRNA表达量下调,AKT mRNA表达量不变;siRNA-Tβ_4转染组总AKT蛋白含量无变化,P-AKT蛋白含量减少。结论 Tβ_4基因沉默能显著抑制MSC增殖,并可能通过下调ILK、P-AKT及细胞周期相关蛋白CyclinD1从而抑制MSC细胞增殖。

注射用维生素C的质量研究

目的:进行注射用维生素C的质量研究,为临床用药提供参考。方法:采用高效液相色谱法测定注射用维生素C的有关物质,并对此方法进行验证。结果:有关物质的HPLC测定方法分离度良好,辅料及降解物对测定没有影响。结论:该质量控制方法可靠,本公司和国内首研产品质量指标无显著差异。

梅花鹿基质金属蛋白酶-13催化域的原核表达和活性分析

目的利用基因工程技术体外表达梅花鹿基质金属蛋白酶-13(MMP-13)催化域并初步探讨其活性,为进一步研究鹿茸再生和快速增长机制奠定基础。方法从梅花鹿鹿茸转录组数据中获得cd MMP-13基因序列,通过运用PCR方法获得了编码催化域(cd MMP-13)的c DNA序列,构建重组质粒p ET28a-cd MMP-13后,转化大肠杆菌,利用IPTG诱导蛋白表达并纯化蛋白,表达产物经复性后鉴定酶活性。结果表达产物为21 KDa的融合蛋白且具有明显明胶酶活性。结论体外表达的具有催化活性的融合蛋白可为研究鹿茸快速生长和再生机制提供材料和基础。

顺行腓肠神经营养血管皮瓣修复小腿上段胫骨外露创面的临床应用

目的探讨顺行腓肠神经营养血管皮瓣修复小腿上段胫骨外露创面的疗效。方法回顾性分析2017年11月—2019年12月苏州大学附属第一医院烧伤整形外科收治小腿上段胫骨外露患者12例,男性9例,女性3例;年龄20~64岁,平均41.5岁;道路交通伤4例,机械伤3例,碾压伤2例,撕脱伤3例。创面面积5cm×4cm~9cm×3cm。合并胫骨骨折6例,创面均采用顺行腓肠神经营养血管皮瓣修复。结果皮瓣全部成活10例,皮瓣切取面积6cm×5cm~19cm×7cm;皮瓣远端边缘部分坏死2例,经换药后愈合。术后随访2~8个月,平均4.5个月。皮瓣外形满意,痛觉、触觉恢复较满意。结论顺行腓肠神经营养血管皮瓣修复小腿上段胫骨外露创面手术操作简单、不牺牲知名血管腓动脉,疗效满意,值得临床推广应用。

分泌型卷曲相关蛋白在女性恶性肿瘤中的研究进展

经典Wnt信号通路受体抑制剂由分泌型卷曲相关蛋白家族(secreted frizzled related proteins,SFRPs)和DKK家族(the Dickkopf family,Dkk)构成。SFRPs通过将Wnt与活性受体复合物分离而抑制Wnt/β-catenin信号。SFRPs启动子超甲基化表观遗传沉默似乎发生在所有类型肿瘤进展中。作为Wnt信号转导通路抑制剂,SFRPs与女性恶性肿瘤的病理进展及预后密切相关。为了攻坚其靶向治疗难题,深入研究SFRPs影响女性恶性肿瘤机理具有重要的意义。本文就Wnt信号通路及其重要拮抗剂SFRPs家族在女性恶性肿瘤中的作用进行简要综述。

微小RNA对肿瘤微环境T细胞免疫调节作用研究的新进展

微小RNA(miRNA)是一类新近发现的小的、内源性的、进化上高度保守的单链非编码RNA,主要在基因表达的转录后水平起作用。自第1个miRNA被发现以来,至今已发现并通过实验验证的与人类遗传信息相关的miRNAs超过500个,这些miRNAs涉及多种细胞的生理病理过程。尤其是miRNAs对肿瘤微环境中T细胞介导的抗肿瘤免疫应答的调控作用,已成为近年来研究者们关注的焦点。miRNAs的靶网络是庞大且复杂的,涉及多种信号分子和信号通路。本文分别从调节/抑制T细胞、辅助T细胞及细胞毒性T细胞3个T细胞亚群综述了miRNAs对肿瘤微环境中T细胞的免疫调节作用。

中药复方提取液对促进拟南芥植物生长的影响

研究《景岳全书》中"五柴胡饮"提取液对在不同培养条件下拟南芥的生长指标的影响。以模式植物拟南芥为研究对象,比较在不同给药体积、不同给药方式、不同给药次数及不同给药浓度提取液的培养条件下拟南芥的各项生长指标,主要包括根长、株高、生物量、叶片个数及叶绿素含量的检测。当在培养基培养时,50 m L培养基中加入提取液0.2 m L时,其促进生长作用最大;当在土壤中培养时,以喷洒叶片为给药方式时,提取液与水比例为1∶50,给药两次,其促进生长作用最大。在一定的给药条件下,提取液对拟南芥的生长有促进作用。

化学诱导趋向性受体拮抗药治疗哮喘的临床研究进展

前列腺素D2(PGD2)是导致哮喘发生的一种重要细胞因子,PGD2通过与表达于Th2细胞上的化学诱导趋向性受体(CRTH2)的结合,产生强有力的嗜酸粒细胞趋化效应,导致哮喘等过敏性炎症反应,因此CRTH2拮抗药有望开发成为新的哮喘治疗药物。目前临床研究活跃的6种CRTH2拮抗药进行了综述,虽然已取得的临床试验数据能证明CRTH2拮抗药具有较好的治疗哮喘作用和较好的耐受性,但其是否比现有治疗药物具有明显优势,还需要更多的临床试验数据来支持。

高选择性吸附树脂结构设计及在天然产物提取分离中的应用

大孔吸附树脂因其结构易于调控、吸附选择性高、可再生使用等诸多优点,在天然植物有效成分的提取分离中发挥了重要作用。本文介绍了近年来在高选择性吸附树脂结构设计方面的研究进展,主要分为两个方面:(1)基于多重弱相互作用的协同效应设计树脂骨架结构,针对吸附质分子结构特点,在树脂骨架上引入能发生氢键、静电、偶极作用的特殊功能基团,并有目的地调控树脂的疏水骨架,可用于天然植物中每一类有效成分的高纯度提取,甚至每一类有效成分的单体组分的分离;(2)树脂孔结构的调控,主要集中在改变传统的非良溶剂致孔的方法,利用聚付氏烷基化反应在树脂初始聚苯乙烯结构之间引入亚甲基刚性交联桥,得到孔径均匀的吸附树脂,使得此类树脂兼具了吸附和筛分的双重功能。

固载胍基的强碱树脂合成与表征及其在Knoevenagel缩合反应中的催化作用

利用一步原位反应由大孔聚苯乙烯苄胺树脂和单氰胺合成含有胍基官能团的强碱阴离子交换树脂（PG）,通过傅立叶红外、酸碱滴定、元素分析、SEM对胍基树脂进行了表征,同时考察了体系中pH值、投料比、温度对原位反应的影响,实验结果表明,在pH值为2的溶液中,大孔树脂氨基交换量与单氰胺的摩尔比为1∶3时,110℃反应5 h,树脂的强碱交换量达3.54 mmol/g.以胍基强碱树脂为非均相催化剂,催化Knoevenagel缩合反应,探讨了催化剂用量、反应溶剂、反应时间、树脂重复使用等因素对产率的影响,确定了反应的最佳条件.实验结果表明,该树脂具有良好的催化活性,在以乙醇为溶剂,反应时间为5 h,强碱树脂固载胍基含量与反应底物的摩尔比为1∶5时,胍基强碱树脂催化Knoevenagel缩合的反应产率达到83.1%~95.3%,胍基强碱树脂可循环使用,在5次重复实验中,其催化活性基本保持.

人参PgMYB4基因表达载体构建及其对拟南芥的抗旱性分析

目的构建人参Pg MYB4基因表达载体,并研究该基因对拟南芥的抗旱功能。方法采用RT-PCR技术克隆人参Pg MYB4基因,构建表达载体,通过农杆菌介导的花序浸蘸法将其转化到拟南芥中,获得转基因拟南芥,以野生型拟南芥作对照,检测植株与抗旱相关的生理指标。结果获得的人参Pg MYB4基因全长为735 bp,编码245个氨基酸,预测其相对分子质量为27 914;在干旱胁迫条件下,转基因拟南芥的生长状态明显优于野生型拟南芥,与野生型相比,转基因拟南芥叶片相对叶绿素量降低幅度小、脯氨酸量显著升高、水丢失率较低。结论人参Pg MYB4基因具有抗干旱胁迫的能力。

阴道微生态与围产期不良结局的研究进展

阴道微生态对围产期结局的影响已成为近期医学研究的焦点。阴道内定植有多种微生物,其中优势菌为乳杆菌,维持着阴道内正常pH。当机体免疫防御能力降低或者内分泌系统紊乱时,机会致病菌占据优势,极易诱发阴道炎性病变,严重影响妊娠期女性正常生活,并且对胎儿的发育及健康成长造成威胁,导致早产和胎膜早破等不良妊娠结局的发生。由于阴道菌群毒力强弱具有差异性,感染所致的阴道炎性疾病容易复发且不易根除,因此在治疗方面,临床医师需要根据个体化原则指导用药。本文对近年来阴道微生态与妊娠不良结局的相关性研究进行简要综述。