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川崎病内皮细胞高表达IL-1β促进中性粒细胞活化和分泌Sema4D
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作者 黄君华 谢小娟 +1 位作者 赵传梅 张书婉 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第1期65-70,共6页
目的探讨川崎病(KD)冠状动脉内皮细胞(HCAECs)条件培养基对中性粒细胞生物学功能的影响及机制。方法2022年12月在西安市儿童医院收集KD患儿和健康儿童混合血清,分别刺激HCAECs作为KD组和HC组,RT-PCR检测两组细胞IL-1β表达。HCAECs分为s... 目的探讨川崎病(KD)冠状动脉内皮细胞(HCAECs)条件培养基对中性粒细胞生物学功能的影响及机制。方法2022年12月在西安市儿童医院收集KD患儿和健康儿童混合血清,分别刺激HCAECs作为KD组和HC组,RT-PCR检测两组细胞IL-1β表达。HCAECs分为si-IL-1β组和si-NC组,分别转染IL-1βsiRNA和无效siRNA,然后加入KD血清刺激,RT-PCR检测HCAECs中IL-1βmRNA表达。收集si-IL-1β组和si-NC组细胞的培养上清液,经离心和滤菌后分别得到两组细胞的条件培养基,ELISA检测两组条件培养基中IL-1β浓度,Transwell实验检测条件培养基对中性粒细胞迁移能力的影响,流式细胞术检测条件培养基对中性粒细胞凋亡和Sema4D表达的影响。中性粒细胞分为TAPI-1预处理+si-NC条件培养基组、DMSO预处理+si-NC条件培养基组、TAPI-1预处理+si-IL-1β条件培养基组和DMSO预处理+si-IL-1β条件培养基组,用si-IL-1β组或si-NC组条件培养基分别刺激已用金属蛋白酶ADAM17的抑制剂TAPI-1或DMSO预处理的中性粒细胞,流式细胞术检测中性粒细胞Sema4D表达。结果RT-PCR显示,KD组较HC组HCAECs中IL-1β明显高表达(P<0.01);si-IL-1β组IL-1βmRNA表达较si-NC组明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-IL-1β组条件培养基IL-1β含量明显降低(P<0.01),条件培养基处理的中性粒细胞迁移能力明显下降(P<0.01),而中性粒细胞凋亡和Sema4D表达均增加(P<0.01)。与DMSO预处理+si-NC条件培养基组比较,TAPI-1预处理+si-NC条件培养基组Sema4D+中性粒细胞百分比明显升高(P<0.05),而TAPI-1预处理+si-IL-1β条件培养基组和DMSO预处理+si-IL-1β条件培养基组中性粒细胞Sema4D无明显差异(P>0.05)。结论川崎病内皮细胞高表达IL-1β促进中性粒细胞迁移并抑制中性粒细胞凋亡,而且可能通过激活ADAM17促进中性粒细胞分泌Sema4D。 展开更多
关键词 IL-1Β Sema4D 川崎病 中性粒细胞 冠状动脉内皮细胞
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川崎病中性粒细胞高表达CD100促进冠状动脉内皮细胞迁移和炎症反应
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作者 黄君华 谢小娟 +1 位作者 赵传梅 张书婉 《标记免疫分析与临床》 CAS 2023年第11期1831-1835,共5页
目的探讨川崎病(KD)患者中性粒细胞条件培养基对冠状动脉内皮细胞(HCAECs)生物学功能的影响。方法以健康儿童(HC)外周血中性粒细胞为对照组,KD患儿外周血中性粒细胞为实验组,KD中性粒细胞通过siRNA沉默CD100为si-CD100组,无效siRNA转染... 目的探讨川崎病(KD)患者中性粒细胞条件培养基对冠状动脉内皮细胞(HCAECs)生物学功能的影响。方法以健康儿童(HC)外周血中性粒细胞为对照组,KD患儿外周血中性粒细胞为实验组,KD中性粒细胞通过siRNA沉默CD100为si-CD100组,无效siRNA转染为si-NC组,RT-PCR检测siRNA敲减效率及CD100 mRNA表达;体外培养各组中性粒细胞并收集条件培养基,ELISA法检测各组条件培养基中CD100的水平;Transwell实验检测各组中性粒细胞条件培养基对HCAECs迁移能力的影响;RT-PCR检测各组中性粒细胞条件培养基对HCAECs细胞因子IL-1β和IL-18表达水平的影响。结果RT-PCR显示KD中性粒细胞CD100 mRNA表达较HC组明显升高(t=11.92,P<0.05),验证si-CD100组CD100 mRNA的表达较si-NC组明显降低(t=13.40,P<0.05);ELISA实验结果显示,KD中性粒细胞条件培养基中CD100水平较HC组明显增高(t=12.01,P<0.05),si-CD100组较si-NC组明显降低(t=11.53,P<0.05);Transwell实验结果显示,与HC相比,经KD中性粒细胞条件培养基处理的HCAECs的迁移能力明显增加(t=12.63,P<0.05),而si-CD100组较si-NC组明显下降(t=4.09,P<0.05);RT-PCR实验结果显示,与HC相比,经KD中性粒细胞条件培养基处理的HCAECs中IL-1β和IL-18的mRNA表达明显升高(t=14.11和18.40,P<0.05),而si-CD100组较si-NC组明显减低(t=11.88和9.21,P<0.05)。结论川崎病患者中性粒细胞高表达并分泌CD100,CD100促进冠状动脉内皮细胞迁移和炎症反应。 展开更多
关键词 CD100 川崎病 中性粒细胞 冠状动脉内皮细胞 儿童
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儿童肺炎链球菌感染流行病学及耐药分析 被引量:11
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作者 张书婉 王敏江 +2 位作者 余建华 曹三成 黄君华 《海南医学》 CAS 2015年第1期93-95,共3页
目的了解肺炎链球菌流行及耐药情况,为肺炎链球菌的预防及临床合理用药提供依据。方法收集西安市儿童医院2013年3月至2014年2月分离的肺炎链球菌菌株,综合分析各年龄段、季节的感染情况,获得儿童感染肺炎链球菌流行病学资料。采用E-tes... 目的了解肺炎链球菌流行及耐药情况,为肺炎链球菌的预防及临床合理用药提供依据。方法收集西安市儿童医院2013年3月至2014年2月分离的肺炎链球菌菌株,综合分析各年龄段、季节的感染情况,获得儿童感染肺炎链球菌流行病学资料。采用E-test法检测菌株对青霉素、头孢曲松、头孢噻肟的敏感性,采用纸片法检测菌株对克林霉素、红霉素、万古霉素的敏感性。结果共分离到206株肺炎链球菌,年龄分布:2岁以下儿童146株,2~5岁46株,5~14岁14株;季节分布:春季37株,夏季18株,秋季49株,冬季102株。对青霉素、克林霉素、红霉素、头孢曲松、头孢噻肟、万古霉素的敏感率分别为70.4%、3.9%、2.4%、80.1%、82.5%、100%。结论儿童肺炎链球菌感染以2岁以下婴幼儿为主,冬季最多。青霉素仍可作为治疗普通肺炎链球菌感染的首选药物;三代头孢菌素可用于青霉素非敏感的肺炎链球菌治疗;未发现万古霉素非敏感菌株;红霉素、克林霉素的耐药率极高,不适合肺链链球菌的治疗。 展开更多
关键词 儿童 肺炎链球菌 流行病学 抗生素 敏感试验
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儿童尿路感染细菌耐药情况及临床特征 被引量:5
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作者 余建华 张书婉 +6 位作者 贾凯 杨维娜 王璐 王娟 蔡慧君 刘家华 曹三成 《国际检验医学杂志》 CAS 2015年第5期633-635,共3页
目的分析儿童尿路感染(UTI)患者基本临床特征、辅助诊断指标、细菌感染谱及耐药情况,旨在为儿童UTI的预防、诊断、治疗提供依据。方法收集2012年1月至2014年3月在西安市儿童医院诊断为UTI或合并UTI的住院患者临床资料,剔除重复菌株,... 目的分析儿童尿路感染(UTI)患者基本临床特征、辅助诊断指标、细菌感染谱及耐药情况,旨在为儿童UTI的预防、诊断、治疗提供依据。方法收集2012年1月至2014年3月在西安市儿童医院诊断为UTI或合并UTI的住院患者临床资料,剔除重复菌株,综合分析复杂性UTI患者与非复杂性UTI患者致病菌的差异。结果儿童首次UTI发病高峰在0~0.5岁。大肠埃希菌、克雷伯菌属以及铜绿假单胞菌是儿童UTI的主要致病菌,其中大肠埃希菌110株,占52.9%。UTI肠杆菌科致病菌对碳青霉烯类抗菌药物有较高的敏感度,耐药率小于10%;其他所检测的抗菌药物耐药率均大于20%。结论该地区住院患儿UTI耐药率较高,在治疗儿童UTI时,应结合当地细菌耐药的情况及疾病的严重程度合理使用抗菌药物,避免细菌耐药加剧。 展开更多
关键词 尿路感染 病原菌 耐药性 儿童
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外周血NLR与PLR对儿童完全型川崎病冠状动脉损伤的预测分析 被引量:8
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作者 张书婉 黄君华 +3 位作者 吴文婧 祝撷英 杨立 曹三成 《现代检验医学杂志》 CAS 2020年第6期38-41,101,共5页
目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)和血小板与淋巴细胞比值(PLR)预测完全型川崎病(CKD)患儿冠状动脉损伤(CAL)的价值。方法回顾性分析2018年1月1日~12月31日在西安市儿童医院和西安交通大学第一附属医院确诊为CKD的185例患儿的临... 目的探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)和血小板与淋巴细胞比值(PLR)预测完全型川崎病(CKD)患儿冠状动脉损伤(CAL)的价值。方法回顾性分析2018年1月1日~12月31日在西安市儿童医院和西安交通大学第一附属医院确诊为CKD的185例患儿的临床资料,其中发生CAL者37例,未发生CAL者148例;选取同时期93例上呼吸道病毒感染儿童为发热对照组,60例健康体检儿童为健康对照组。收集所有纳入对象的血细胞检测结果并进行统计学分析。结果CKD患儿中发生CAL者NLR和PLR均高于未发生CAL者,差异有统计学意义(χ2=3.69,4.13,均P<0.01);NLR和PLR预测川崎病CAL的cut-off值分别为4.13和126.82,敏感度和特异度分别为83.8%和76.1%(NLR)及81.1%和67.0%(PLR);NLR与PLR联合预测CAL的敏感度和特异度分别为86.5%和80.7%,ROC曲线下面积0.874。结论CKD急性期NLR与PLR对预测患儿是否发生CAL具有一定的价值。 展开更多
关键词 川崎病 冠状动脉损伤 中性粒细胞与淋巴细胞比值 血小板与淋巴细胞比值
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沈阳市2011-2014年儿童手足口病主要病原体分布特征分析 被引量:3
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作者 张立丰 张书婉 +2 位作者 白春玉 张迪 于维君 《中国卫生统计》 CSCD 北大核心 2015年第6期975-976,共2页
目的 探讨儿童手足口病病原分布和变化规律,为制定针对性防制策略提供依据。方法 采集2011-2014年沈阳市0~14岁儿童手足口病标本,RT-PCR检测病毒特异性核酸和型别鉴定,描述不同病例类型病原分布特点。结果 2011-2014年沈阳市手足口病患... 目的 探讨儿童手足口病病原分布和变化规律,为制定针对性防制策略提供依据。方法 采集2011-2014年沈阳市0~14岁儿童手足口病标本,RT-PCR检测病毒特异性核酸和型别鉴定,描述不同病例类型病原分布特点。结果 2011-2014年沈阳市手足口病患儿34828例,重症97例,死亡2例。近四年,儿童发病率均高于同期全人群并逐年升高;实验室检测1156例,Cox A16阳性率最高。EV71和Cox A16交替流行。死亡病例均为EV71感染,重症病例EV71占比例较高,普通病例以Cox A16感染为主。结论 沈阳市儿童手足口病疫情不容忽视,应提高实验室检测率和分型检出率。2015年春季应更多关注EV71毒株引起的重患,杜绝儿童死亡。 展开更多
关键词 儿童 手足口病 病原学
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RNA-SAT在儿童肺炎支原体肺炎诊断中的价值 被引量:7
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作者 张书婉 徐蓓 +1 位作者 吴爽 黄君华 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第7期836-838,共3页
目的探讨RNA实时荧光恒温扩增技术(RNA-SAT)在诊断儿童肺炎支原体肺炎(MPP)中的作用。方法选取221例临床诊断为社区获得性肺炎(CAP)的患儿为研究对象,其中MPP患儿75例,非MPP患儿146例,分别检测咽拭子肺炎支原体(MP)RNA和血清MP抗体(MP-A... 目的探讨RNA实时荧光恒温扩增技术(RNA-SAT)在诊断儿童肺炎支原体肺炎(MPP)中的作用。方法选取221例临床诊断为社区获得性肺炎(CAP)的患儿为研究对象,其中MPP患儿75例,非MPP患儿146例,分别检测咽拭子肺炎支原体(MP)RNA和血清MP抗体(MP-Ab),对两种方法的检测结果进行统计学分析。结果以临床诊断为标准,RNASAT与MP-Ab检测法二者的敏感性分别为65.3%和64.0%(χ~2=0.02,P>0.01),特异性分别为97.9%和82.9%(χ~2=15.75,P<0.01);阳性预测值分别为94.2%和65.8%(χ~2=26.43,P<0.01),阴性预测值分别为84.6%和81.8%(χ~2=1.16,P>0.01)。结论 RNA-SAT作为一种无创的检测技术在儿童MPP的早期诊断中有较高的价值,结合MP-Ab检测可以有效提高MPP的诊断效率。 展开更多
关键词 肺炎支原体 恒温扩增技术 社区获得性肺炎 儿童
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PCR-DGGE结合测序在检测混合细菌感染中的价值 被引量:3
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作者 黄君华 张书婉 张宁 《海南医学》 CAS 2014年第8期1154-1156,共3页
目的探讨变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)结合测序在检测混合细菌感染中的作用,为细菌多重感染的诊断提供新的思路。方法以3份临床培养鉴定为混合感染的胆囊穿刺引流液为对象,提取细菌总DNA并扩增16S r... 目的探讨变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)结合测序在检测混合细菌感染中的作用,为细菌多重感染的诊断提供新的思路。方法以3份临床培养鉴定为混合感染的胆囊穿刺引流液为对象,提取细菌总DNA并扩增16S rDNA-V3区,后进行DGGE分析,将所得条带切胶纯化再扩增,扩增产物进行测序及BLAST比对,比较比对结果与临床培养结果的一致性。结果 DGGE可以很好地分离16S rDNA-V3区混合PCR产物,每一个扩增子的测序比对结果与临床培养结果一致。结论 PCR-DGGE结合测序的方法可以很好地鉴定临床混合感染标本中的病原菌,可作为快速检测方法在临床应用。 展开更多
关键词 混合细菌感染 通用引物PCR 变性梯度凝胶电泳 测序 快速检测
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穿刺引流液中病原性真菌的ITS测序研究 被引量:2
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作者 黄君华 张书婉 张宁 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第12期1580-1582,共3页
目的探讨内部转录间隔区(ITS)测序用于快速检测穿刺引流液中病原性真菌的价值。方法采用临床常见的14种细菌和4种真菌及人类基因组DNA验证真菌通用引物(ITS1/ITS4和ITS3/ITS4)的特异性和敏感性;采集90例临床疑似真菌感染患者的穿刺引流... 目的探讨内部转录间隔区(ITS)测序用于快速检测穿刺引流液中病原性真菌的价值。方法采用临床常见的14种细菌和4种真菌及人类基因组DNA验证真菌通用引物(ITS1/ITS4和ITS3/ITS4)的特异性和敏感性;采集90例临床疑似真菌感染患者的穿刺引流液标本10mL,其中8mL用于常规真菌培养,剩余2mL用于提取真菌DNA并分别用ITS1/ITS4和ITS3/ITS4作为引物进行扩增,将阳性扩增产物测序并与BLAST比对,将测序法与培养法的阳性率结果进行统计学比较。结果14种细菌及人类基因组扩增产物均为阴性,4种真菌扩增产物为阳性。ITS3/ITS4和ITS1/ITS4的最低检测限分别为102CFU/mL和103 CFU/mL。90例标本培养阳性率为4.44%(4/90),测序法阳性率为12.22%(11/90),二者差异具有统计学意义(P<0.05)。结论引物ITS1/ITS4和ITS3/ITS4的特异性良好,后者较前者扩增敏感性更高;测序真菌ITS区可作为临床快速检测穿刺引流液中病原性真菌感染的方法。 展开更多
关键词 穿刺引流液 病原性真菌 内部转录间隔区 测序 快速检测
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PCR检测在血液病患儿血流感染细菌谱分析中的应用 被引量:6
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作者 黄君华 张书婉 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第17期2307-2308,共2页
目的探讨聚合酶链式反应(PCR)技术在分析血流感染细菌菌谱中的应用,为血液病患儿细菌性血流感染的流行病学调查提供新的思路。方法从西安市儿童医院血液内科收集80例疑似血流感染患儿的外周静脉血标本进行血培养,同时扩增并测序细菌16Sr... 目的探讨聚合酶链式反应(PCR)技术在分析血流感染细菌菌谱中的应用,为血液病患儿细菌性血流感染的流行病学调查提供新的思路。方法从西安市儿童医院血液内科收集80例疑似血流感染患儿的外周静脉血标本进行血培养,同时扩增并测序细菌16SrDNA,对血培养和PCR结果进行比较。结果 80例血液标本中7例细菌培养阳性,阳性率为8.8%;PCR检测出16例阳性,阳性率为20.0%,二者差异有统计学意义(χ2=5.82,P<0.05);在16例PCR阳性标本中,革兰阳性菌占68.7%,其中表皮葡萄球菌最多[占31.3%(5/16)],革兰阴性菌占31.3%,以非发酵菌为主[占18.7%(3/16)]。结论 16SrDNA-PCR结合测序的方法可以很好地鉴定血流感染病原菌,可作为一种新的流行病学方法在临床应用;血液病儿童血流感染病原菌以革兰阳性球菌为主,尤以表皮葡萄球菌最常见。 展开更多
关键词 聚合酶链式反应 血流感染 细菌培养 血液病 儿童
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16S rDNA测序在儿童血流感染细菌性病原菌分布中的应用 被引量:9
11
作者 黄君华 张书婉 《海南医学》 CAS 2014年第10期1467-1469,共3页
目的探讨PCR方法在分析血流感染病原菌分布中的作用,为儿童细菌性血流感染的流行病学调查提供新的思路。方法从儿科重症监护病房(PICU)收集100份疑似血流感染患儿的外周静脉血进行血培养,同时扩增并测序细菌16S rDNA,比较培养结果与PCR... 目的探讨PCR方法在分析血流感染病原菌分布中的作用,为儿童细菌性血流感染的流行病学调查提供新的思路。方法从儿科重症监护病房(PICU)收集100份疑似血流感染患儿的外周静脉血进行血培养,同时扩增并测序细菌16S rDNA,比较培养结果与PCR结果。结果 100份血液标本中11份细菌培养阳性,阳性率为11%;PCR法23份阳性,阳性率为23%,二者比较差异具有统计学意义(χ2=10.08,P<0.05);在23例PCR阳性标本中,革兰氏阳性球菌占65.2%,其中表皮葡萄球菌最多(6例,26.1%),革兰氏阴性菌占34.8%,以大肠埃希菌为主(4例,17.4%)。结论 16S rDNA-PCR结合测序的方法可以很好地鉴定血流感染病原菌,与血培养相比能更客观地反映病原菌分布,可作为一种新的流行病学方法在临床应用;儿科重症监护病房血流感染病原菌以革兰氏阳性球菌为主,尤以表皮葡萄球菌最常见。 展开更多
关键词 血流感染 16S核糖体核糖核酸 细菌 测序 儿童
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儿童传染性单核细胞增多症不同抗体模式下血浆EB病毒核酸检出率和载量的研究 被引量:14
12
作者 张书婉 吴爽 +1 位作者 徐蓓 黄君华 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第12期1513-1516,共4页
目的探讨传染性单核细胞增多症(IM)患儿血浆EB病毒(EBV)抗体的主要模式以及不同抗体模式下血浆EBV核酸(EBV-DNA)检出率和载量的异同。方法选取267例诊断为IM的患儿为研究对象,采集血液标本并应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)和酶联免疫吸附... 目的探讨传染性单核细胞增多症(IM)患儿血浆EB病毒(EBV)抗体的主要模式以及不同抗体模式下血浆EBV核酸(EBV-DNA)检出率和载量的异同。方法选取267例诊断为IM的患儿为研究对象,采集血液标本并应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测血浆EBV-DNA和4项抗体(抗衣壳抗原Ig M抗体VCA-IgM,抗衣壳抗原Ig G抗体VCA-IgG,抗早期抗原Ig G抗体EBEA-IgG,抗核抗原Ig G抗体EBNA-IgG),并对结果进行统计学分析。结果 267份标本EBV-DNA检测阳性240份(阳性率89. 9%),VCA-IgM阳性222份(阳性率83. 2%),DNA检测阳性率与VCA-IgM抗体检测阳性率间的比较差异有统计学意义(χ~2=6. 88,P <0. 01)。IM最常见的血清学抗体模式为"VCA-IgM和VCA-IgG阳性"(占32. 2%)和"VCA-IgM,VCA-IgG和EBEA-IgG阳性"(占27. 7%)。不同抗体模式下血浆EBV-DNA检出率的差异无统计学意义(χ~2=9. 52,P> 0. 01),但DNA载量的差异有统计学意义(χ~2=27. 71,P <0. 01)。结论血浆EBV-DNA定量检测较抗体检测的灵敏度高; IM抗体模式多样,主要表现为"VCA-IgM和VCA-IgG阳性"和"VCA-IgM,VCA-IgG和EBEA-IgG阳性";不同抗体模式下血浆EBV-DNA检出率的差异无统计学意义,但急性感染时病毒载量较高。 展开更多
关键词 EB病毒 荧光定量PCR 病毒载量 传染性单核细胞增多症
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16SrDNA测序在儿童自发性细菌性腹膜炎病原学诊断中的作用 被引量:1
13
作者 黄君华 黄凤霞 +1 位作者 张书婉 余建华 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第8期764-767,共4页
目的探讨Sanger法测序用于快速鉴定儿童自发性细菌性腹膜炎病原菌的价值。方法用临床常见的16种细菌和3种真菌及人类基因组DNA验证一对新的16S rDNA通用引物PSL/P13P的特异性和敏感性;收集86例疑似自发性细菌性腹膜炎儿童的腹水标本5 ml... 目的探讨Sanger法测序用于快速鉴定儿童自发性细菌性腹膜炎病原菌的价值。方法用临床常见的16种细菌和3种真菌及人类基因组DNA验证一对新的16S rDNA通用引物PSL/P13P的特异性和敏感性;收集86例疑似自发性细菌性腹膜炎儿童的腹水标本5 ml,其中4 ml常规细菌培养,剩余1 ml用于提取细菌DNA进行16S rDNA-PCR;对阳性扩增产物进行测序并通过BLAST比对鉴定菌种,与培养鉴定结果进行比较。结果 3种真菌及人类基因组PCR均为阴性,16种细菌PCR阳性,PSL/P13P的检测下限为102CFU/ml。86例标本培养阳性率26.7%(23/86),PCR阳性率45.3%(39/86),二者差异具有统计学意义(χ~2=14.06,P〈0.05)。在37例PCR及测序阳性标本中,革兰阴性杆菌占73.0%(27/37),以大肠埃希菌为主(14/37,占37.8%),革兰阳性球菌占27.0%(10/37),其中肠球菌最多(7/37,占18.9%)。结论通用引物PSL/P13P具有良好的特异性和敏感性,检出率较常规培养方法高,结合测序能很好地鉴定自发性细菌性腹膜炎病原菌,可作为一种新的检测技术和流行病学方法在临床应用;儿童自发性细菌性腹膜炎病原菌以革兰阴性杆菌为主,尤以大肠埃希菌最常见。 展开更多
关键词 自发性细菌性腹膜炎 16S核糖体核糖核酸 细菌 测序 儿童
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多重PCR系统快速检测儿童血流感染7种常见病原菌 被引量:4
14
作者 黄君华 张书婉 《检验医学》 CAS 2016年第2期114-118,共5页
目的建立快速检测儿童血流感染常见病原菌的多重聚合酶链反应(PCR)系统。方法在16S r DNA-PCR结合测序鉴定血流感染病原菌的基础上筛选出7种儿童血流感染常见病原菌,针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,用临床常见的15种... 目的建立快速检测儿童血流感染常见病原菌的多重聚合酶链反应(PCR)系统。方法在16S r DNA-PCR结合测序鉴定血流感染病原菌的基础上筛选出7种儿童血流感染常见病原菌,针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,用临床常见的15种细菌、4种真菌及人类细胞检测该系统的检测性能,并将该系统与血培养法及16S r DNA-PCR进行比较。结果 180例血液样本中血培养法阳性14例,阳性率为7.8%;16S r DNA-PCR阳性28例,阳性率为15.6%;多重PCR系统阳性25例,阳性率为13.9%。多重PCR系统病原菌检出率高于血培养法(P〈0.05),与16S r DNA-PCR比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论所建立的多重PCR系统能够快速、准确地检测引起儿童血流感染的7种常见病原菌,比常规血培养法提早3~5 d将病原菌鉴定到种,对临床及时合理用药具有指导意义。 展开更多
关键词 多重聚合酶链反应 血流感染 细菌 儿童
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儿童血流感染多重PCR检测方法的建立 被引量:1
15
作者 黄君华 张书婉 张宁 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第3期412-415,共4页
目的探索建立一种可快速鉴定儿童血流感染常见病原菌的多重PCR体系。方法通过16S r DNA-PCR筛选出7种引起血流感染的常见病原菌,并针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,检测该系统的特异性和敏感性;将该体系的检测结果与血... 目的探索建立一种可快速鉴定儿童血流感染常见病原菌的多重PCR体系。方法通过16S r DNA-PCR筛选出7种引起血流感染的常见病原菌,并针对这些病原菌设计特异性引物组合成多重PCR系统,检测该系统的特异性和敏感性;将该体系的检测结果与血培养及16S r DNA-PCR比较。结果该体系可以扩增出7种病原菌的特异性基因片段,病原菌检出率高于血培养且与16S r DNA-PCR差异无统计学意义,敏感性和特异性良好。结论本研究建立的多重PCR方法可快速、准确地鉴定引起儿童血流感染的常见病原菌,可作为快速检测方法在临床实验室中应用。 展开更多
关键词 血流感染 多重PCR 细菌 儿童
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PCR-变性梯度凝胶电泳技术分析肺炎儿童下呼吸道菌群多样性 被引量:1
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作者 黄君华 武永红 张书婉 《海南医学》 CAS 2016年第10期1585-1586,1587,共3页
目的初步探讨PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)检测肺炎儿童下呼吸道菌群多样性的作用。方法收集10份培养阳性的患儿肺泡灌洗液2~5 m L,经细菌DNA提取、16S r DNA-PCR后进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析,对优势条带进行测序。结果经培养1... 目的初步探讨PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)检测肺炎儿童下呼吸道菌群多样性的作用。方法收集10份培养阳性的患儿肺泡灌洗液2~5 m L,经细菌DNA提取、16S r DNA-PCR后进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析,对优势条带进行测序。结果经培养10份标本中7份鉴定为一种菌感染,3份培养出两种病原菌;经PCR-DGGE分析8份标本出现多条明显条带,2份得到一条条带,共筛选出12个优势条带;DGGE法得到的细菌种类多于培养法。结论 PCR-DGGE可较好地鉴定混合细菌感染性肺炎病原菌并能检测到培养法没有检出的细菌;儿童肺炎主要以肺炎链球菌、大肠埃希菌、草绿色链球菌等病原菌为主。 展开更多
关键词 肺炎 变性梯度凝胶电泳 菌群多样性 儿童
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实时荧光定量PCR在儿童继发性血流感染中的应用 被引量:4
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作者 黄君华 张书婉 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第3期276-279,共4页
目的探讨荧光定量PCR(fluorescence real-time quantitative PCR,FQ-PCR)在检测儿童血流感染病原菌中的作用,探究原发感染部位细菌载量与继发性血流感染及培养阳性率之间的关系。方法收集14例原发感染部位培养鉴定为鲍曼不动杆菌且怀疑... 目的探讨荧光定量PCR(fluorescence real-time quantitative PCR,FQ-PCR)在检测儿童血流感染病原菌中的作用,探究原发感染部位细菌载量与继发性血流感染及培养阳性率之间的关系。方法收集14例原发感染部位培养鉴定为鲍曼不动杆菌且怀疑有继发性血流感染的患儿标本,提取细菌DNA并进行16S rDNA-PCR和SYBR Green荧光定量PCR,对原发部位标本和血液标本的定量结果及血培养结果进行统计学分析。结果 14例原发部位标本(9例肺泡灌洗液标本,5例腹水标本)荧光定量PCR均有结果,细菌载量的中位数(四分位数)为5.64×10~6(3.15×10~5,4.345×10~7)CFU/ml,相对应的14例血液标本也均得到PCR结果,细菌载量的中位数(四分位数)为1.585×10~5(2.315×10~3,5.817×10~5)CFU/ml,二者差异具有统计学意义(Z=-2.941,P<0.01);血培养10~份阳性,细菌载量的中位数(四分位数)为2.90×10~5(1.058×10~5,1.057×10~6)CFU/ml,4份培养阴性,细菌载量的中位数(四分位数)为1.79×10~3(8.60×10~2,2.315×10~3)CFU/ml,二者差异也具有统计学意义(Z=-2.828,P<0.01)。结论儿童继发性血流感染原发部位的细菌载量比血液中高,血液中细菌载量在10~5CFU/ml上时可使血培养阳性。 展开更多
关键词 继发性血流感染 荧光定量PCR 细菌载量 血培养
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16S rDNA测序在儿童细菌性脑膜炎病原菌鉴定中的应用 被引量:2
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作者 黄君华 张书婉 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第17期2092-2094,共3页
目的探讨16S rDNA-PCR结合测序快速检测儿童细菌性脑膜炎病原菌的价值。方法收集2013年1月至2016年12月西安市儿童医院4 016例儿童脑脊液标本进行16S rDNA-PCR;测序阳性扩增产物并BLAST比对,与培养结果比较。结果 4 016例脑脊液标本16S ... 目的探讨16S rDNA-PCR结合测序快速检测儿童细菌性脑膜炎病原菌的价值。方法收集2013年1月至2016年12月西安市儿童医院4 016例儿童脑脊液标本进行16S rDNA-PCR;测序阳性扩增产物并BLAST比对,与培养结果比较。结果 4 016例脑脊液标本16S rDNA-PCR阳性161例(阳性率4.0%),培养阳性104株(阳性率2.6%),二者比较差异具有统计学意义(χ~2=57,P<0.05);从测序结果看,革兰阳性菌101株(62.7%),革兰阴性菌60株(37.3%);最常见的5种病原菌依次为表皮葡萄球菌41株(25.5%),肺炎链球菌22株(13.7%),大肠埃希菌21株(13.0%),流感嗜血杆菌15株(9.3%)和金黄色葡萄球菌13株(8.1%)。结论 16S rDNA-PCR结合测序能够很好地鉴定细菌性脑膜炎病原菌,比培养法检测时间更短、菌谱分布更宽,可作为一种新的检测方法和流行病学方法在临床应用;儿童细菌性脑膜炎病原菌以革兰阳性球菌为主。 展开更多
关键词 细菌性脑膜炎 16S核糖体核糖核酸 测序 新生儿 儿童
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血清S100B蛋白在判断手足口病病情和治疗效果中的价值 被引量:1
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作者 张书婉 黄君华 +2 位作者 吴爽 徐蓓 曹三成 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第5期676-679,共4页
目的探讨血清S100B蛋白在判断手足口病(HFMD)患儿病情严重程度和治疗效果中的价值。方法根据《手足口病诊疗指南(2018年版)》将232例确诊为HFMD的患儿分为普通型组(n=158)、重型组(n=52)和危重型组(n=22),收集治疗前后血清S100B的检测结... 目的探讨血清S100B蛋白在判断手足口病(HFMD)患儿病情严重程度和治疗效果中的价值。方法根据《手足口病诊疗指南(2018年版)》将232例确诊为HFMD的患儿分为普通型组(n=158)、重型组(n=52)和危重型组(n=22),收集治疗前后血清S100B的检测结果;以门诊号末尾数随机选取同时期100例健康体检儿童为对照组,应用金磁纳米颗粒法检测血清S100B蛋白;将结果进行统计学分析并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线);另对不同病原体引起的HFMD血清S100B蛋白水平进行比较。结果治疗前对照组、普通型组、重型组和危重型组之间血清S100B蛋白水平差异有统计学意义(P <0. 001),危重型组高于其他三组(P <0. 001),重型组高于普通型组和对照组(P <0. 001),普通型组高于对照组(P <0. 001)。血清S100B蛋白在344. 55 pg/ml时尤登指数最大(0. 509),此时其检测灵敏度和特异度分别为78. 9%和72. 0%。与治疗前相比,普通型组、重型组和危重型组治疗后血清S100B蛋白水平明显下降(P <0. 001),但与对照组差异无统计学意义(P>0. 05)。不同病原体引起的HFMD血清S100B蛋白水平差异有统计学意义(P <0. 001),Cox A16感染引起的HFMD患儿血清S100B高于EV71和其他肠道病毒;普通型组、重型组和危重型组内病原体分布不同(P <0. 001),重症HFMD多由EV71和Cox A16引起。结论血清S100B蛋白的定量检测有助于判断HFMD是否发生及其严重程度,并对治疗效果和相关病原体有一定的提示作用。 展开更多
关键词 S100B蛋白 手足口病 儿童
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环介导等温扩增技术诊断儿童肺炎支原体肺炎准确性的Meta分析 被引量:2
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作者 张书婉 吴爽 +1 位作者 黄君华 曹三成 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第7期996-1002,共7页
目的通过Meta分析对环介导等温扩增技术(LAMP)诊断儿童肺炎支原体肺炎(MPP)的准确性进行评价。方法检索中英文数据库中关于LAMP诊断儿童MPP的相关文献并应用诊断准确性研究质量评价系统(QUADAS-2)评价文献质量;应用Stata/SE15.0软件分... 目的通过Meta分析对环介导等温扩增技术(LAMP)诊断儿童肺炎支原体肺炎(MPP)的准确性进行评价。方法检索中英文数据库中关于LAMP诊断儿童MPP的相关文献并应用诊断准确性研究质量评价系统(QUADAS-2)评价文献质量;应用Stata/SE15.0软件分析纳入研究的合并敏感度、特异度、阳性似然比(PLR)、阴性似然比(NLR)和诊断比值比(DOR)及95%可信区间;用综合受试者工作特征曲线(SROC)展现LAMP诊断儿童MPP的总效果。结果共有7篇文献(包括8组数据)纳入Meta分析。应用随机效应模型得到合并敏感度、特异度、PLR、NLR和DOR,分别为0.94[95%CI(0.84,0.98)]、0.99[95%CI(0.94,1.00)]、138.01[95%CI(15.38,1238.65)]、0.06[95%CI(0.02,0.17)]和2200.68[95%CI(181.38,26701.19)]。SROC曲线显示曲线下面积(AUC)为0.99[95%CI(0.98,1.00)];各研究间的异质性主要来源于纳入人群的疾病种类、研究类型、参考试验和LAMP试验方法。结论已有的数据表明LAMP具有很好的敏感性和特异性,是一种具有临床实用性的儿童MPP检测技术。 展开更多
关键词 肺炎支原体 环介导等温扩增技术 肺炎 儿童 META分析
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