冠突曲霉Ac-nsdD基因鉴定分析及抗盐胁迫功能分析

【目的】进一步探讨GATA转录因子Ac-nsdD在茯砖茶的冠突曲霉中的调控作用。【方法】根据基因组注释结果及构建系统进化对冠突曲霉Ac-NsdD蛋白序列分析。运用同源重组和根癌农杆菌介导的方法构建Ac-nsdD基因敲除的突变体,对突变体进行表型分析。【结果】根据基因组注释结果分析冠突曲霉Ac-nsdD编码一个假定的具有保守DNA结合结构域ZnF GATA的转录因子。系统进化分析表明,Ac-nsdD与其它真菌同源的NsdD有较为紧密的亲缘关系。进一步运用同源重组的方法,获得一个该基因敲除的突变体。与野生型菌株比较,突变体在M3Y培养基培养,表现为产闭囊壳量明显减少;然而在5%NaCl M3Y培养基培养,突变体表现产闭囊壳量变少,产分生孢子量显著变多,中间培养物黑色色素形成显著增加,生长速度变小;在17%NaCl M3Y培养基培养,突变体表现闭囊壳数目几乎为零,分生孢子量变少,生长速度变小。【结论】Ac-nsdD基因在无盐环境下可能激活有性发育。该基因在应答低渗透压盐胁迫条件下,可能激活有性发育和抑制无性发育,平衡有性和无性发育,且参与色素的生物合成;在应答高渗透压盐胁迫条件下,可能激活有性发育、无性发育和营养生长。本试验为进一步研究与Ac-nsdD基因相偶联的一些信号通路及其下游基因,为丝状真菌的有性及无性发育的一些共有的和独特的信号转导途径提供实验室数据。

一株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的分离鉴定及6-苄氨基嘌呤对其体外抑菌作用研究

目的:分离鉴定一株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)并研究6-苄氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)在体外对其抑菌效果。方法:通过细菌形态学、16S rDNA测序和药敏试验对临床分离株CRAB-1进行鉴定,通过倍比稀释法研究6-BA对CRAB的最低抑菌浓度,通过分析CRAB的细胞膜通透性和生长曲线,探究6-BA对CRAB的抑菌机制。结果:菌株CRAB-1为耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌,体外抑菌实验表明,6-BA对CRAB的最低抑菌浓度为256μg/mL,且随着浓度增大,抑菌作用增强。6-BA对CRAB的对数生长期和稳定期均有显著抑制作用,但对细胞膜通透性无显著影响。结论:6-BA对CRAB具有抑菌效果,为抗CRAB感染提供了新的思路。

神农架锶矿泉调查及成因分析

目的 探明神农架林区锶矿泉的分布,为资源开发提供进一步理论依据。方法 2018年5月实地走访和查看地图资料,确定采样点,至12月共采集来自林区8个乡镇的415份水样,包括地表水、浅层地下自然涌出的泉水和深层地下矿泉水厂水源水用原子吸收光谱法进行水样含锶量检测。结果 除2份水样外,其他均清澈透明、无肉眼可见杂质。检测结果显示,26.63%的水样含锶量≥0.1 mg/L,11.13%的水样含锶量≥0.2 mg/L,这些样品主要来源于九湖和红坪镇,大致呈东西走向。地表水和浅层地下水含锶量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 神农架地表及浅层地下水含锶量均处于安全范围,含锶量较高的水样可能与地质构造有关。神农架具有形成锶矿泉的可能性,但需进一步探查进行验证。