5-氟尿嘧啶诱导结肠癌细胞系SW620凋亡的傅里叶变换红外光谱研究

探索红外光谱监测肿瘤细胞凋亡的可行性及初步分析。采用结肠癌细胞系SW620作为诱导细胞模型,MTT法确定最优5-FU诱导浓度,无血清饥饿培养协同细胞周期阻滞在G1和S期,傅里叶显微红外光谱仪(FTIR)联合流式细胞仪(FCM)对SW 620细胞和凋亡的SW 620细胞12 h、早期凋亡(24 h)和晚期凋亡(48 h)的峰位、相对峰强等指标进行比较分析。光谱分析结果显示SW 620对比凋亡细胞有以下特征:(1)与脂类相关谱带1 740 cm^(-1)相对峰强比I_(1740)/I_(1460)明显降低(p<0.05),表明凋亡细胞中脂类相对含量增多。(2)与氨基酸残基相关谱带1 410 cm^(-1),I_(1460)/I_(1460)在凋亡早期和晚期明显升高(p<0.05),与丝、苏氨基酸相关谱带1 120 cm^(-1)向高波数移动,I_(1120)/I_(1460)明显升高(P<0.05),表明凋亡细胞中DNA双螺旋解链,氨基酸残基增多。(3)DNA的反对称伸缩1 240 cm^(-1)向高波数移动,表明凋亡细胞中核酸分子构象发生改变。(4)与核酸多糖1 040 cm^(-1)相关谱带在凋亡的24和48 h出现,向高波数移动,I_(1040)/I_(1460)在凋亡晚期降低(P<0.05)。初步研究结果表明傅里叶变换红外光谱分析可能成为实时无创监测肿瘤化疗的有效方法。

腹腔镜经腹腹膜前腹股沟疝修补术的术后疼痛分析

目的:探讨腹腔镜经腹腹膜前疝修补术(transabdominal preperitoneal,TAPP)治疗腹股沟疝术后疼痛的原因及治疗方法。方法:回顾分析2009年5月至2015年2月为1 036例患者行TAPP的临床资料,总结分析患者年龄、手术时期、钉枪固定等指标。结果:1 036例均顺利完成TAPP,无一例中转开腹。术后发生疼痛89例,发生率8.6%。不同手术时期、应用钉枪钉合与免钉合术后疼痛差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄、U形钉与螺旋钉固定TAPP术后疼痛差异无统计学意义(P>0.05)。结论:手术标准化是减少或避免TAPP术后疼痛的根本方法,必要的心理安慰、合适的治疗方式是治疗的关键。

血栓弹力图在成人心脏瓣膜置换术后监测凝血功能及指导临床输血的应用价值研究

目的 观察分析血栓弹力图（TEG）在成人心脏瓣膜置换术后凝血功能的监测和指导输血的应用价值.方法 选取63例行心脏瓣膜置换术的成人患者为研究对象,根据患者术后在ICU凝血功能监测方式的不同将63例患者分为TGE组和标准凝血试验组（即SCT组）.比较两组术前凝血功能,记录术中血液出血量及输血量,分析比较两组在ICU期间的血液输注情况、引流量、气管插管情况,以及入住ICU时间.结果 比较两组患者术前血液检查结果,两组各项指标比较未见统计学差异（P＞0.05）.SCT组ICU期间输FFP量为（244±184）ml、转出ICU 2 h前APTT为（31.1±5.8）s、FIB为（5.43±1.97）g/L、D-二聚体为（7.31±6.91）mg/L、AT-Ⅲ为（104.0±19.5）％;TEG组ICU期间输FFP量为（134±174）ml、转出ICU2 h前APTT为（34.7±5.6）s、FIB为（3.57±1.17）g/L、D-二聚体为（3.71±3.31）mg/L、AT-Ⅲ为（94.1±14.7）％,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,其他指标比较未见统计学差异（P＞0.05）.SCT组的手术时间、体外循环时间、短期转归指标与TEG组比较未见统计学差异（P＞0.05）.结论 TEG可用于成人心脏瓣膜置换术后凝血功能的监测及输血的指导,不仅可以减少FFP、PLT的用量和精确输血,还不影响转归.

高原脱适应人群肝肾功能监测及结果分析

目的了解移居高原低氧环境人群返回平原后肝肾功能的变化,探讨高原脱适应对健康人肝肾功能的影响。方法选择初次进入高原地区驻训7个月的健康官兵作为观察对象,分别于驻训结束后返回平原当日及1个月后进行尿常规分析和血清肝肾功能检测,比较两个时间点的结果差异。结果受检者脱适应当日,尿常规分析和血清肝肾功能均出现异常,其中以总胆红素增高(44.19%)、尿微量清蛋白异常(32.10%)、尿酸增高(26.74%)最为常见;返回平原1个月后尿常规各项检测指标均得到明显改善,但是丙氨酸氨基转移酶和尿酸反而出现升高(P<0.05)。结论高原低氧环境对健康人的肝肾功能有一定损伤,返回平原后部分个体不能自行恢复,其脱适应过程中需要一定的药物干预。

胃肠道重建手术治疗2型糖尿病的实验研究进展

糖尿病中90％以上患者是2型糖尿病（type2diabetesmellitus，T2DM）。目前T2DM以饮食控制、运动与生活方式干预、口服各种降糖药物及注射胰岛素等内科治疗为主，但效果不理想，晚期并发症频发，易致生活质量下降。

胃袖带切除术对GK大鼠2型糖尿病的影响及其机理

目的研究胃袖带切除术(sleeve gastrectomy,SG)对GK大鼠2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的治疗作用及其可能机理。方法将13只12周龄的GK大鼠随机分为2组:SG组7只和假手术组(SO组)6只,分别行SG术和假手术。于术前及术后1、4、10和26周测量2组大鼠的体质量、24 h进食量、空腹血糖值、血清胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)和血清生长激素释放肽(Ghrelin)浓度;于术后10周检测2组大鼠的粪便能量含量,并进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)和胰岛素耐受性实验(ITT)。结果①体质量:各时点2组大鼠的体质量比较差异均无统计学意义(P>0.05);与术前比较,术后1周2组大鼠的体质量均降低(P<0.01),术后10和26周的体质量均增加(P<0.01)。②24 h进食量:与SO组比较,术后4和10周SG组大鼠的24 h进食量均较低(P<0.05)。与术前比较,SG组大鼠术后1、4及10周的进食量均较低(P<0.05),SO组大鼠术后1周的进食量低于术前(P<0.05)。③空腹血糖值:与SO组比较,术后各时点SG组大鼠的空腹血糖值均较低(P<0.01)。与术前比较,SG组大鼠术后各时点的空腹血糖值均较低(P<0.01),而SO组大鼠仅术后1周明显低于术前(P<0.01)。④血清GLP-1水平:与SO组比较,术后4、10及26周SG组大鼠的血清GLP-1水平均较高(P<0.05)。与术前比较,术后4、10及26周SG组大鼠的血清GLP-1水平较高(P<0.05),而术后SO组大鼠的血清GLP-1水平无明显变化(P>0.05)。⑤血清Ghrelin水平:与SO组比较,术后各时点SG组大鼠的血清Ghrelin水平均较低(P<0.01)。与术前比较,术后各时点SG组大鼠的血清Ghrelin水平均较低(P<0.001),而SO组大鼠的血清Ghrelin水平无明显变化(P>0.05)。⑥曲线下面积(AUC):SG组大鼠的AUC(OGTT和ITT)均较SO组低(P<0.01)。结论 SG术可以明显降低GK大鼠的空腹血糖值,改善葡萄糖耐量及增强胰岛素敏感性,该作用可能是GLP-1、Grelin等多种胃肠道激素共同作用的结果。SG术可能是潜在的非肥胖型T2DM的治疗方法。

肠系膜上动脉压迫综合征的诊断与治疗

目的探讨肠系膜上动脉压迫综合征的诊断和治疗方法。方法对笔者所在医院2003年8月至2010年8月期间收治的16例肠系膜上动脉压迫综合征患者的临床资料进行回顾性分析。结果 16例肠系膜上动脉压迫综合征患者的临床表现主要为反复发作性进食后上腹部胀痛或隐痛、呕吐且呕吐后症状可缓解(12例),恶心、反酸及嗳气(13例),饭后饱胀感或腹胀(16例),以及食欲不振(13例)。16例患者均行上消化道造影检查明确诊断;3例行腹部彩色多普勒超声检查符合诊断;4例行CT检查排除十二指肠周围占位性病变。16例患者均先行非手术治疗,其中10例患者的腹痛缓解,呕吐消失,好转出院;另6例因治疗无效而行手术治疗,其中行Treitz韧带松解加十二指肠空肠侧侧吻合术2例,行十二指肠空肠Roux-en-Y吻合术3例,行胃大部分切除、胃空肠吻合术(BillrothⅡ式)1例。术后除1例行Treitz韧带松解加十二指肠空肠侧侧吻合术的患者仍有间断腹胀伴恶心外,其余患者均痊愈。结论肠系膜上动脉压迫综合征主要表现为上腹部胀痛、呕吐、食欲不振及消瘦,确诊依赖于上消化道造影。对其治疗首选非手术治疗,对非手术治疗无效者可采用手术治疗,其中十二指肠空肠Roux-en-Y吻合术是一种有效、易行的手术方式。

双靶向调控CDX2基因慢病毒表达载体的构建及鉴定

目的构建5个拷贝的HRE和hTERTp双靶向调控表达CDX2基因的慢病毒表达载体,并在结肠癌LoVo细胞中检测其启动活性。方法设计引物应用PCR法从人结肠癌基因组中克隆获得hTERT启动子,用双酶切和PCR法切除笔者所在课题组已构建的载体pLEGFP-5HRE-CEAp中的CEA启动子后,将hTERT启动子与该载体重组,构建出pLEGFP-5HRE-hTERTp;提取5HRE-hTERTp基因序列,同时双酶切切除pLVX-EGFP-3FLAG载体中的CMV启动子,同源重组构建获得pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG载体。设计引物应用PCR法从笔者所在课题组已构建的GV230-CDX2-EGFP载体中克隆获得CDX2基因序列,用双酶切和PCR法切除载体pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG中的EGFP后,将CDX2基因序列与该载体重组,构建出pLVX-5HREhTERTp-CDX2-3FLAG。应用pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG载体瞬时转染体外培养的人结肠癌LoVo细胞,通过观察绿色荧光蛋白EGFP的表达,鉴定hTERTp的启动活性。结果经PCR和测序分析,pLEGFP-5HREhTERTp、pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG和pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG 3组质粒与设计一致,测序正确。将pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG载体瞬时转染体外培养的人结肠癌LoVo细胞,有绿色荧光表达,提示hTERT启动子能够有效启动下游基因的表达。结论成功构建了pLVX-5HRE-hTERTp-EGFP-3FLAG及pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG载体,为后续的体外和体内研究打下了基础。

胆胰转流术对GK大鼠2型糖尿病的影响及其机制的研究

目的探讨胆胰转流术（BPD）对GK大鼠2型糖尿病的治疗作用及其机制。方法将16只GK大鼠随机分为2组，BPD组10只，假手术（sham-BPD）组6只。检测术前1周及术后1、4、10、26周2组大鼠空腹血糖、血清胰岛素、胰高血糖素样肽-1（GLP-1）和抑胃肽（GIP）浓度；术后10周检测2组大鼠糖耐量及胰岛素敏感性。结果术前2组空腹血糖、血清胰岛素、GLP-1和GIP差异均无统计学意义；与sham—BPD组相比，BPD组空腹血糖水平显著降低（P〈0．05）、血清胰岛素水平差异无统计学意义、糖耐量明显提高、胰岛素敏感性增强；BPD组较术前及sham-BPD组血清GLP-1水平显著上升（较术前，术后1周P=0．0337，术后4周P=0．0002，术后10周P〈0．0001，术后26周P〈0．0001，较sham—BPD组，术后1周P=0．0354，术后4周P=0．0032，术后10周P=0．0001，术后26周P〈0．0001）、GIP水平显著下降（较术前，术后1周P=0．0189，术后4周P=0．0007，术后10周P=0．0003，术后26周P〈0．0001；较sham-BPD组，术后1周P=0．0089，术后4周P=0．0002，术后10周t9=0．0006，术后26周P〈0．0001），差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论BPD手术对GK大鼠具有降低血糖、改善糖耐量及增强胰岛素敏感性的作用；GLP．1和GIP可能是BPD降低GK大鼠血糖、改善糖尿病相关代谢综合征的原因。

BP1基因在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义

目的检测BP1在甲状腺癌组织中的表达，探讨其与甲状腺癌临床病理因素的关系。方法运用原位杂交及免疫组化方法检测60例甲状腺癌组织（研究组）和20例正常甲状腺组织（对照组）中的BP1表达。结果原位杂交方法检测BP1mRNA阳性率在研究组中为78．3％（47／60），对照组中为20％（4／20），BP1基因在2组的表达差异有统计学意义（x。=22．09，P〈0．05）；甲状腺癌各病理类型的阳性表达率分别为乳头状癌81．7％（40／49）、滤泡状癌85．7％（6／7）、髓样癌25．0％（1／4）；髓样癌分别与乳头状癌、滤泡状癌之间BP1mRNA的表达差异有统计学意义（，=4．21，P〈0．05）；免疫组化检测研究组中BP1蛋白阳性率为93．3％（56／60），对照组中BP1蛋白阳性率为10．0％（2／20），2组间BP1的表达差异有统计学意义（χ2=52．25，P〈0．05）。国际抗癌联盟（UICC）Ⅰ～Ⅱ期BP1mRNA阳性率90．9％（40／44），Ⅲ～Ⅳ期43．8％（7／16），差异有统计学意义（χ2=12．72，P〈0．05）。但BP1mRNA表达与性别、年龄及淋巴结转移无相关性。结论BP1在甲状腺癌组织中的表达显著上调；BP1基因的表达与其UICC分期、病理学类型有关，而与年龄、性别及淋巴转移无关。

高原适应者返回平原后肺通气功能血象及心肌酶学的变化

目的观察高原适应者返回平原后120d内肺通气功能、血象、心肌酶学的变化,探讨高原脱适应症的变化规律。方法 20例年龄18～25岁,健康男性,在西藏日喀则(海拔3650m)驻训7个月后,返回重庆(海拔300m)驻地,并分别检测受试者返回第2天(baseline)、返回第30天(D30)和返回第120天(D120)时肺通气功能、血象、心肌酶学变化情况;检测20例重庆驻地18～25岁健康男性血象、心肌酶学和心功能,设为健康对照组。结果 受试者返回第2天,用力肺活量(FVC)、第1s用力肺活量(FEV1)、血象、心肌酶学均高于健康对照组;返回第30天,中性粒百分比(Neu%)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞压积(Hct)、血小板压积(PLT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)仍高于健康对照组;但红细胞数目(RBC)、血红蛋白(Hb)、Hct、CK-MB、LDH显著低于返回第2天;返回第120天Hct、PLT以及CK-MB、LDH显著高于健康对照组,除PLT外,其余各项指标均显著低于返回第2天,除RBC和PLT外,其余各项指标均显著低于返回第30天。结论 高原适应者返回平原后,肺通气功能血常规,心功能均有所恢复,肺通气功能恢复较快,而心功能恢复较为缓慢,其机制尚需进一步研究。