流式细胞仪共享平台建设与标准化管理探索

生物学国家级实验教学示范中心利用现代化预约管理系统,将学院的流式细胞仪纳入统一管理,探讨流式细胞仪共享平台建设及其标准化管理。实践表明,流式细胞仪数据的准确性和可重复性得到有力保障,仪器利用率提升和使用寿命延长,有助于学生掌握流式技术和研究方法,充分发挥了流式细胞仪对科研和教学的支撑作用。

无线智能显微互动系统在高校动物学实验教学中的应用

动物学是高校生命科学非常重要的基础学科,动物学实验课程是与该学科紧密相联的一门必修课程,是验证理论和锻炼学生实践能力的重要保证。传统的动物学实验课基本上是借助于教师的手口相传,有很多局限性。而现代动物学实验秉承科技发展的要求,同许多学科一样与时俱进。特别是显微数码互动系统的引入,使得动物学实验课发挥出更多的教学优势。

荔枝败育胚S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的全长扩增和序列分析

从荔枝‘桂味’的败育胚中提取总RNA,利用GeneRacerTMKit将RNA经去磷酸化反应、去mRNA的帽子结构及RNA Oligo连接,反转录合成cDNA,以cDNA为模板,分别用SSH分离得到的胚败育相关差异表达S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的部分cDNA序列(599 bp)设计出3’和5’端基因特异引物,进行PCR末端扩增。荔枝败育胚的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因序列全长为1515 bp,编码393个氨基酸,与其它物种的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的核苷酸序列同源性在79％-82％之间,氨基酸序列同源性在88％-91％之间。结果表明所获得的基因为与荔枝胚败育相关的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因。

荔枝胚败育差异表达基因cDNA片段的克隆及序列分析

利用抑制消减杂交 (Suppressivesubtractionhybridization ,SSH)克隆荔枝败育胚的差异表达基因cDNA片段。分别以荔枝‘桂味’正常发育胚为driver (驱赶子 ) ,败育胚为tester (检测子 ) ,建立差异表达cDNA文库 ,代表桂味败育胚特异表达的cDNA。经VirtualNorthern检测 ,在桂味正常发育胚 /败育胚差异表达cDNA文库中得到 3个阳性克隆 ,序列分析表明这

一种提取荔枝胚中总RNA的方法

用改良的Tris-硼酸法和3S柱式细胞及组织总RNA抽提试剂盒V2.0提取3个荔枝品种胚中的总RNA,经纯度和甲醛变性胶分析,其A260/A280值在1.91～2.02之间,基本完整,未检出明显降解.

荔枝胚败育过程中内源激素与蛋白质含量的变化

连续 3年 (1999～ 2 0 0 1年 )对典型的荔枝焦核品种桂味、糯米糍和大核品种黑叶、怀枝花后 10～ 4 0d的幼胚和胚乳内源激素、多酚含量及蛋白质动态变化进行研究。结果表明 ,焦核品种幼胚及胚乳中的IAA、GAs和ABA含量低于大核品种 ;多酚类物质含量在胚中低于大核品种 ,胚乳中则高于大核品种 ;胚和胚乳中的蛋白质含量均低于大核品种。蛋白质电泳结果显示 ,2 2 .5、2 8.5和 4 5kD这 3类蛋白质在怀枝和黑叶的胚蛋白质代谢过程中表现出较高的稳定性 ,桂味和糯米糍胚蛋白质中的 2 8.5kD蛋白质也有相似的特性。

荔枝胚蛋白质的提取方法

以不同体积的Tris-HCl(0.1mol/L,pH8.8)为提取液,结合不同含量(以胚鲜重计)的PVP40,对怀枝、黑叶和桂味等荔枝(Litchichinensis)品种的胚蛋白质进行提取。结果表明,提取液体积为胚鲜重的5倍(mlg-1 FW),并加入15%的PVP40时,提取蛋白质的效果最好,可用于荔枝胚可溶性蛋白质含量的测定;胚乳蛋白质的提取则以等体积的提取液(内含2%的PVP40)为佳。加入10%PVP40的胚蛋白提取液可直接进行SDS-PAGE电泳,用10倍于蛋白质提取液体积的乙醇沉淀胚和胚乳的蛋白提取液,可得到最佳的SDS-PAGE电泳效果。

种子中的棉子糖半乳糖苷系列寡糖研究进展

棉子糖半乳糖苷系列寡糖广泛分布在许多种植物种子中 ,并存在于干燥后仍能保持活力的组织内 ,如禾谷类种子的胚及糊粉层 ,豆类及其他双子叶植物的子叶和胚轴组织等。棉子糖半乳糖苷系列寡糖在禾谷类种子的非自溶性中央胚乳中不合成 ,但存在于蓖麻种子的自溶性胚乳细胞中。棉子糖半乳糖苷系列寡糖在种子发育后期累积 ,并持续到种子大量成熟直到脱水阶段。棉子糖半乳糖苷系列寡糖主要包括棉子糖、水苏糖和毛蕊花糖 ,是种子中最广泛的低分子量α_半乳糖苷。许多植物正常性种子的发育伴随着棉子糖半乳糖苷系列寡糖的累积 ,这些糖的累积已被认为在种子脱水耐性获得、种子活力、糖的运输及植物的抗冷驯化等过程中起重要作用。本文从种子的脱水耐性获得、植物的冷驯化、细胞内定位及生物合成等方面综述了棉子糖半乳糖苷系列寡糖的研究进展。

植物生理学实验研究型教学模式探索与实践

根据传统植物生理学研究需要的理念和现代植物生理学前沿研究发展趋势,对课程实验项目进行了整合,围绕"缺素对植物生长发育的影响"研究课题开展研究型教学模式探索与实践,加深了学生对植物生理学研究的认识,培养和提高了学生的创新能力、研究型思维等综合素质。

实验教学示范中心大型设备共享平台建设探索与实践

介绍了中山大学生物学实验教学示范中心从直接管理的中小型教学设备着手,利用现代化预约管理系统,通过建设使用公平公正的开放式本科实验教学共享平台示范效应,在逐步凝聚共识的基础上,将学院大部分大型科研设备纳入统一管理,实现学院绝大部分大型设备充分共享,并就实验教学示范中心如何推进大型设备共享平台建设及其管理模式等进行交流和探讨。

实验教学示范中心专职实验队伍建设

高水平实验教学示范中心建设离不开高素质专职实验技术队伍建设。中心通过尊重事实、树立信心,明确实验队伍建设目标、严把准入关,明晰岗位职责、建立合理的考核与激励机制,以及积极拓展实验队伍工作空间等举措,促进队伍凝聚工作共识,建立了一支实验技能过硬、人员整体素质高、服务意识强、乐于奉献、结构合理、人心稳定的实验技术队伍,成为学院教学科研不可或缺的重要技术力量。

高校本科实验课程研究性项目教学实践与探索

实验教学是课程教学的重要组成和辅助部分。通过建立以研究性目标为导向的项目教学课程设计方案,对实验教学实施了一系列的改革实践与探索。课堂实践和教学效果的评估表明,实验课程的研究性项目设计和教学方法对于提高学生主动学习的兴趣、综合运用理论知识的能力,以及培养学生的科学研究思维起到了积极有效的促进作用。

硅营养抑制钠盐及铜盐毒害水稻秧苗的研究

营养液培养水稻ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．秧苗２周后发现［ＮａＣｌ］超过０．１０３ｍｏｌ／Ｌ和［Ｃｕ－ＳＯ４］超过０．０９４ｍｍｏｌ／Ｌ时，秧苗地上部和根受毒害、致死．［ＣｕＳＯ４］达０．０３１ｍｍｏｌ／Ｌ时亦使根受伤害严重．加入硅酸盐使［ＳｉＯ２］达到１３．０４ｍｍｏｌ／Ｌ有抑制毒害作用，苗地上部鲜重增重率及根／苗干重比率高，而非毒害钠盐。

ZEISS LSM 780激光扫描共聚焦显微镜的三维成像及分析

针对ZEISS LSM 780激光扫描共聚焦显微镜的三维图像获取步骤做了系统的介绍,详述了光学切片的设置和获取过程,后期应用Zen2011 black和blue软件进行三维重构的渲染及图像分析、数据采集。列举出三维成像中常见问题及解决办法,使仪器为教学和科研工作提供更优质的服务。

强化共享平台建设 促进教学与科研相互转化

本科教学与科学研究是高校的两个中心。但由于"科研效应"强于"教学效应",导致教学与科研的误区。强化实验教学中心共享平台建设,不仅可以促进教学与科研的相互转化,提高大型设备的利用率,更重要的是促进了本科教学质量的提高,构建和谐校园。

热激对水稻幼苗耐冷性及热激蛋白合成的诱导

萌发的水稻种子经42℃热激处理后其幼苗的耐冷性明显增强,膜伤害程度降低,脯氨酸含量增加,超氧物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性和抗氧化物质抗坏血酸含量增加,而膜脂过氧化的关键酶脂氧合酶(LOX)活性及其产物丙二醛(MDA)含量下降。并且热激诱导萌发的水稻胚合成78、70、64、60、46、38、24、17、16 kD的热激蛋白(HSP),其中属于HSP70的内质网结合蛋白(BiP)的合成与水稻幼苗耐寒性的提高有关。

与芒果子叶切段不定根形成相关基因的cDNA片段的克隆

在研究芒果子叶横切所形成的远轴面和近轴面的不定根形成时发现,只在近轴面形成不定根。该研究利用抑制性扣除杂交(suppressive subtractivehybridization,SSH)方法,以子叶切段远轴切面作为参照样品,近轴切面作为检测样品,构建正向差异cDNA文库,分离与芒果子叶切段不定根形成相关基因的cDNA片段。经Virtual Northern杂交分析,获得6个阳性克隆。序列分析和同源性比较结果表明这些cDNA片段均为首次报告,它们分别与转运蛋白、转录调控因子及酶基因的DNA序列同源。

鞍带石斑鱼肌肉营养成分及氨基酸含量分析

采用常规营养物质测定方法对鞍带石斑鱼Epinephelus lanceol肌肉营养成分及氨基酸含量进行了定量分析,并开展了相关营养分析。结果表明,鞍带石斑鱼新鲜肌肉中粗蛋白含量19.5%、粗脂肪含量7.69%、水分含量70.5%、粗灰分含量1.01%,氨基酸种类有18种,其中8种必需氨基酸含量为43.43%。鞍带石斑鱼作为一种高蛋白、氨基酸含量丰富的养殖鱼类,具有较高的食用和营养价值。

三种苔藓植物对模拟N沉降的生理响应

该文研究了华南地区常见的3种苔藓植物大灰藓（Hypnum plumaeforme）、刺边小金发藓拟刺亚种（Pogonatum cirratum subsp．fuscatum）和石地钱（Reboulia hemisphaerica）在模拟N沉降条件下碳氮代谢的响应特征，探讨了N沉降对这3种苔藓植物生长的影响。结果表明：3种植物对N沉降的响应存在差异。大灰藓在加氮浓度为0～60kg N·hm^-2的范围内，光合速率、淀粉、可溶性糖、总氮及可溶性蛋白的含量均随加氮浓度的升高而上升；对照条件下NR（硝酸还原酶）可诱导活性很高，表明其对氮的需求强烈；膜心渗漏在加氮浓度为20kg N·hm^-2时高于对照，但更高的加氮浓度下并未使其进一步上升。刺边小金发藓拟刺亚种在加氮浓度为0-40kg N·hm^-2的范围内，碳氮代谢的多数指标的变化趋势与大灰藓相似，但当N沉降高于40kg N·hm^-2时，呈现相反的变化趋势；在对照条件下具一定的NR可诱导活性，但人工加氮使其可诱导活性急剧下降。石地钱的可溶性糖及可溶性蛋白含量在不同处理条件下变化不明显，但光合速率和淀粉含量在加氮浓度为20和40kg N·hm^-2时低于对照及加氮浓度为60kg N·hm^-2时，而植物总氮含量的变化趋势刚好相反；NR固有活性及可诱导活性在各种N处理条件下均极低，显示其对NO3^-利用率低。刺边小金发藓拟刺亚种和石地钱的膜K^＋渗漏仅在60kg N·hm^-2处理时显著上升。

蔡司LSM 7DUO NLO激光共聚焦显微镜的应用和管理

介绍了蔡司LSM7DUO NLO激光扫描共聚焦显微镜三个组成部分单光子、双光子和快速扫描的硬件配置和软件功能以及成像和图像分析的应用,例如单、双光子图像叠加,多视野拼接拍摄、三维重构等功能在生命科学研究中的应用。介绍管理该仪器的一些方法和心得,保障仪器为教学和科研工作提供更好的服务。