甲基对硫磷水解酶纯化与保存

对带有重组表达质粒E.coli菌种进行了扩大培养,在IPTG的诱导下大量表达,获得了C-末端含有6个寡聚组氨酸的甲基对硫磷水解酶。经Ni-NTA亲和层析获得了具有较高生物活性的甲基对硫磷水解酶。本文对该酶纯化的梯度洗脱条件和酶动力学进行了考察,并通过环境对酶活性的影响检测,确定了将酶制备成冻干粉,更利于保存。

甲基对硫磷水解酶分离条件的量热学优化

运用酶热分析方法,以甲基对硫磷水解酶(MPH)作为目标蛋白,牛血红蛋白(BHb)、肌红蛋白(Mb)和牛血清白蛋白(BSA)作为杂蛋白,通过溶液pH以及流动相中NaCl浓度的考察,确定了甲基对硫磷水解酶的最佳分离条件。实验结果表明,在pH为8.0,NaCl浓度为0.8 mol/L时,甲基对硫磷水解酶的分离效果最佳。

浅析汽车轴承异常损坏的原因及预防措施

阐述了轴承的失效形式，分析了轴承异常损坏的原因，提出了预测、预防措施。

60例经胆囊管行胆总管探查的临床分析

目的探讨经胆囊管行胆总管探查的临床价值。方法对60例胆囊结石合并胆总管继发性结石病变者．采用胆囊切除后经胆囊管行胆总管探查取石治疗。结果58例结石经胆囊管取出，2例胆总管结石被推入十二指肠。全组病例均未置管，术后恢复顺利．术后随访半年无残余结石。结论经胆囊管探查取石避免了常规的胆总管切开T形管引流，尤其术中经胆囊管胆道镜取石的应用，减少了术后并发症的发生及留置管的痛苦与不便，具有操作简单、创伤小及术后常规住院日缩短等优点，有一定的临床应用价值．

氢燃料电池零部件研究进展综述

世界正面临能源危机与环境危机,氢燃料电池因其高能量转化比和排放物只有水而受到追捧。近年来,氢燃料电池的安全性问题成为研究的重点。文章从氢燃料电池的主要部件研究进展及商业化情况、氢燃料与其他燃料的安全性对比进行介绍,重点论述了氢燃料电池的质子交换膜、双极板和催化剂等主要零部件的不同种类、优劣势以及最新的研究进展,分析国内外氢燃料电池发展的重点以及安全性,在使用成本及研究技术上对国家未来氢能发展提出一定的建议。

小型水库雨水情测报和大坝安全监测设施建设应用技术探讨

结合辽宁省小型水库实际,因地制宜地从雨量监测、水位监测、视频监控、渗流监测,以及变形观测等方面,对点位布设、系统架构、平台功能等进行系统设计,构建辽宁省小型水库雨水情测报和大坝安全监测平台,采用非工程措施切实提高小水库防汛预警和安全监测能力,推进小型水库防御体系和治理能力现代化。

运用UPLC-BCD方法快速筛选中草药中凝血酶抑制剂

目的:建立超高相液相色谱-生物化学检测(UPLC-BCD)分析方法快速筛选丹参、远志、蕲艾药材中凝血酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的辨识提供一种便捷的技术手段。方法:运用UPLC分析技术,采用Xtimate UHPLC C;色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.8μm),柱温30℃,流动相为甲醇(B)-0.1%甲酸水溶液(A),梯度洗脱,检测波长256 nm,体积流量0.2 mL·min^(-1)。以比伐卢定作为阳性对照,考察酶反应条件,建立UPLC-BCD分析方法检测3种药材提取物与凝血酶反应前后色谱特征图谱及酶反应产物的差异,评价3种药材凝血酶抑制作用、快速筛选所含酶抑制剂,采用超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UHPLC-LTQ/Orbitrap MS)方法鉴定酶抑成分。结果:丹参、远志和蕲艾均具有较好的凝血酶抑制作用,检出丹参和远志中7种酶抑制剂,初步鉴定为丹酚酸A、迷迭香酸、丹酚酸B、西伯利亚远志呫吨酮B、远志山酮Ⅲ、3,6’-二芥子酰基蔗糖、细叶远志苷A。蕲艾色谱峰在反应前后无明显变化,其酶抑制活性可能来源于色谱图未显示的其他成分。结论:建立的UPLC-BCD方法能够快速辨别复杂基质的酶抑制作用及酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的快速筛选提供了快速、便捷的分析手段。