后适应缺血时间窗的选择对小鼠心肌再灌注损伤的影响

目的探讨后适应对小鼠心肌再灌注损伤的影响以及不同缺血时间窗的后适应心脏保护作用的差异。方法96只成年C57/BL小鼠随机分为缺血时间30、45min和60min的三组,每组又分为后适应和缺血再灌注两种处理。通过开胸结扎左冠状动脉造成急性心肌梗死,在完全再灌注早期给予反复短暂再通/闭塞的缺血后适应。采用Evansblue和TTC染色的方法确定缺血心肌和梗死心肌面积,并测定血清的心肌酶含量、心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)水平以及血流动力学指标。结果缺血30min后适应组、缺血45min后适应组心肌梗死面积分别比相同缺血时间的再灌注对照组减少53.1%和31.2%,差异均具有统计学意义(P<0.01),缺血后适应可明显降低血清心肌酶、提高心肌SOD的活性以及改善血流动力学的恶化;缺血60min后适应组梗死心肌面积无明显降低,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小鼠心肌处于轻中度水平的缺血损伤,在恢复冠脉血流的早期施行缺血后适应可以有效地减少心肌再灌注损伤,但随着缺血时间的延长,心肌保护作用就明显减弱或消失。

缺血后适应对再灌注小鼠心肌梗死面积、心肌酶以及血流动力学的影响

目的:探讨缺血后适应对小鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的影响,为临床急性心肌缺血事件发生后的心肌保护措施提供可靠的实验依据。方法:成年60只雄性KM小鼠随机分为缺血后适应、I/R、假手术3组,每组20只。后适应组采用开胸手术结扎左冠状动脉缺血45min,建立急性心肌梗死模型,在完全再灌注早期给予反复短暂再通/闭塞的后适应;I/R组为同期开胸完成I/R,在结扎冠状动脉前后不做任何特殊处理;假手术组开胸不结扎冠状动脉。采用伊文思蓝(Evans blue)和三苯基氯化四氮唑(TTC)染色的方法确定缺血心肌范围[缺血心肌重量(AI)/左室重量(LV)]以及梗死心肌范围[梗死心肌重量(AN)/AI],并测定血清磷酸肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平以及血流动力学指标主动脉平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)及左心室压力变化最大、最小速率(dp/dtmax、dp/dtmin)。结果:缺血后适应组与I/R组小鼠AI/LV、AN/AI均大于假手术组(P<0.05),缺血后适应组AN/AI明显小于I/R组(P<0.05);缺血后适应组血清CK、LDH、AST水平均明显低于I/R组(P<0.05);与I/R组比较,缺血后适应组MAP、LVSP、dp/dtmax、dp/dtmin明显升高而LVEDP明显降低(P<0.05)。结论:在恢复冠脉血流的早期施行缺血后适应可以有效地减少小鼠再灌注心肌梗死面积,降低血清心肌酶的水平,并改善心功能的恶化。

小鼠心肌缺血后适应模型的建立及其相关影响因素

目的建立小鼠心肌缺血后适应模型,评价其对缺血再灌注损伤的保护作用以及相关的影响因素。方法120只成年雄性KM小鼠随机接受缺血后适应、缺血再灌注以及假手术3种不同的处理方式。后适应组采用开胸手术结扎左冠状动脉缺血45 min,建立急性心肌梗死模型,在完全再灌注早期给予反复短暂再通/闭塞的后适应。采用Evans blue和TTC染色的方法确定缺血心肌面积以及梗死心肌面积,并测定血清磷酸肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)以及血流动力学指标。结果缺血后适应1组、后适应2组以及预适应+后适应组梗死心肌的重量百分比显著小于缺血-再灌注组,P<0.05;后适应2组以及预适应+后适应组与后适应1组比较差异无显著性;延迟后适应组梗死心肌的重量百分比与缺血-再灌注组比较差异无显著性,P>0.05。同时缺血后适应可以明显地降低缺血再灌注血清CK、MDA的浓度,提高SOD的水平以及改善血流动力学的恶化。结论在恢复冠脉血流的早期施行缺血后适应可以有效地减少小鼠再灌注心肌损伤。

离体小鼠心脏缺血后适应模型的建立及其效果评价

目的:探讨离体小鼠心脏缺血后适应模型建立的可行性以及对梗死心肌面积、再灌注心律失常及冠状动脉灌流量的影响。方法:将45只国产成年KM小鼠随机分为缺血后适应组、缺血再灌注组、空白对照组3组,每组15只。小鼠开胸心脏离体后,迅速将主动脉弓连接到Langendorff离体心脏灌注系统进行逆行灌流。各组均进行稳定灌流10min,缺血后适应组停止灌流30min,造成急性全心缺血,在完全再灌注早期给予反复短暂灌流/停止灌流的后适应,之后持续灌注120min;缺血再灌注组为同期离体完成缺血30min再灌注120min,在停止灌流前后不做任何特殊处理;空白对照组持续离体灌流,不加任何干预。采用三苯基氯化四氮唑染色的方法确定梗死心肌面积,并同步记录全程心电图,收集灌流液,测定冠状动脉灌流量。结果:缺血后适应组再灌注120min心肌梗死范围为(26.1±2.7)%,较对照组的(42.1±3.3)%明显减少(P<0.05);缺血后适应组心律失常积分为(10.2±2.5),较缺血再灌注组(12.2±1.7)低,但差异无统计学意义(P>0.05);再灌注后120min2组间冠脉血流量无明显差别。结论:离体小鼠心脏缺血后适应模型的技术稳定可靠,后适应能有效地降低灌注缺血/再灌注损伤,明显地减少心肌梗死范围,同时再灌注心律失常的发生率也有所降低。

具有多种抗心房颤动模式起搏器的临床应用

目的:评价心房程序起搏预防和治疗阵发性房颤的效果。方法:对15例阵发性房颤患者置入Selection 900E(AF2.0)型起搏器,调查分析术前2个月和术后2个月及4个月阵发性房颤事件各指标。 结果:患者术后2个月及4个月较术前2个月在有症状阵发性房颤事件数有明显地降低(34.2±18.01,19.73±7.79对66.30±26.06);术后4个月较术后2个月有症状阵发性房颤事件数、阵发性房颤事件总数、房颤总持续时间、房颤负荷均降低(P<0.05),而心房起搏比率无明显改变。 结论:生理性心房程序起搏减少阵发性房颤事件的发生,降低房颤负荷,并可以明显减少临床抗心律失常药物使用的种类和剂量。

新型抗心房颤动起搏器在阵发性房颤患者中的临床应用

目的:评价生理性心房程序起搏预防和治疗阵发性房颤的应用效果。方法:对14例阵发性房颤患者植入 Selection 900E(AF2.0)型双腔起搏器,进行术前2个月和术后2个月及4个月阵发性房颤事件各指标的调查。结果:患者术后2个月及4个月较术前2个月有症状阵发性房颤事件数有明显地降低(34.2±18.01,19.73±7.79 vs.66.30±26.06);术后4个月较术后2个月有症状阵发性房颤事件数(19.73±7.79 vs 34.2±18.01)、阵发性房颤事件总数(501.73±368.78 vs 872.60±536.52)、房颤总持续时间(8.13±5.17 vs 16.00±7.61)、房颤负荷(15.00～38.33 vs 5.00～20.00 T_(4-2)105)均降低(P<0.05),而心房起搏比率无明显差异(56.00～75.00 vs 60.00～80.00T_(4-235),P>0.05)。结论:生理性心房程序起搏减少阵发性房颤事件的发生,降低房颤负荷,并可以明显减少临床抗心律失常药物使用的种类和剂量,起搏技术与药物相结合有望成为治疗阵发性房颤的重要手段。

冠状动脉结扎与主动脉弓缩窄所致小鼠慢性心力衰竭模型比较

目的:比较冠状动脉结扎术与主动脉弓缩窄术所建立的小鼠慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)模型在超声心动图、血液动力学及病理学方面的差异。方法:成年雄性C57BL小鼠,随机分为正常对照组(N组)、冠状动脉结扎术组(A组)和主动脉弓缩窄术组(B组)。行冠状动脉结扎术和主动脉弓缩窄术建立CHF模型。于术后8周测量左、右心室重量指数(LV/BW、RV/BW)、动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力上升和下降最大速率(±dp/dtmax)、左室舒张末期内径(LVEDd)、左室舒张末期外径(EXLVDd)、左室收缩末期内径(LVESd)、短轴缩短率(FS,并行病理学检查。结果:冠状动脉结扎术与主动脉弓缩窄术均成功建立CHF模型。A组和B组LV/BW、RV/BW分别升高22.5%、26.3%和27.5%、30.3%,B组LV/BW升高较A组更明显(P<0.05);与N组相比,8周时A组和B组SBP、DBP、LVSP、±dp/dtmax、FS均显著降低(P<0.01),A组较B组降低更为显著(P<0.05)。A组LVEDd、LVESd较N组显著增加。B组LVEDd较N组显著降低(P<0.05)。光镜下A组梗死区纤维组织替代坏死心肌细胞,大量炎性细胞浸润,非梗死区心肌细胞肥大伴间质显著增生;B组心肌细胞肥大、排列紊乱,小血管壁增厚,间质增生伴少量炎性细胞浸润。结论:冠脉结扎术建立模型能模拟心肌梗死后低心输出量,并逐渐演变到心力衰竭的全部病理生理过程,而主动脉弓缩窄术能模拟压力负荷增高导致心力衰竭,其病理生理过程与高血压导致心力衰竭更接近。

小鼠主动脉弓缩窄模型的建立及评价

目的通过显微外科技术建立小鼠主动脉弓缩窄压力超负荷模型,探讨心脏形态及功能变化的规律。方法135只雄性昆明小鼠随机分为主动脉弓缩窄组75只和假手术组60只。在术前、术后1周、4周、6周、8周1、2周进行高频心脏超声、血流动力学、心脏病理学检测,并对器官称重,对死亡原因进行分析。结果(1)主动脉弓缩窄手术成功率为88%;(2)与假手术组比较,术后4周,缩窄组小鼠出现左室向心性肥厚,左心室收缩期、舒张期后壁厚度(Pwsth;Pwdth)、左心室重量指数(LVMI)显著增加(P<0.05),术后6、8、12周上述指标呈轻度上升趋势;术后4、68、、12周,缩窄组小鼠动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)显著增加(P<0.05);术后8周,缩窄组小鼠表现为离心性肥厚,左心室收缩末期、舒张末期内径(LVESd;LVEDd)显著增加(P<0.05);术后12周,缩窄组小鼠出现失代偿性心力衰竭,左心室射血分数(EF%)、左心室压力上升和下降最大速率(dp/dtmax;dp/dtmin)显著降低(P<0.05),与8周缩窄组比较,12周缩窄组SBP、DBP、LVSP、LVEDP显著降低(P<0.05)。结论通过主动脉弓缩窄,可以建立稳定的小鼠压力超负荷诱导左室向心性肥厚致心衰的动物模型,类似人类心肌肥厚向心衰发展的病理过程,是用于临床研究的一种较理想动物模型。

猪急性心肌梗死模型建立中心律失常的防治体会

目的:总结猪急性心肌梗死模型建立过程中心律失常的发生特点及防治方法。方法:选择健康雌性家猪14只,3～5月龄,体重25～40kg。随机分为2组:实验组(n=8)行缺血预适应处理,依次扩张球囊阻断前向血流1min、2min、5min,每次间隔60s,然后扩张60min,扩张压力为2atm。在建立模型过程中,心率>150次/min时即静脉推注美托洛尔5mg。对照组(n=6)不行缺血预适应处理,直接扩张球囊阻断前向血流60min,扩张压力为2atm,静脉不推注美托洛尔。2组动物发生室性早搏后均静脉推注利多卡因,发生室性心动过速、室颤后均行直流电复律。建立模型前、后行心电图检查,术中行心电监护。结果:2组动物在建模过程中均有室性心律失常发生,实验组6只发生室早(75.0%),4只发生室速(50.0%),3只发生室颤(37.5%),无一只死亡,建模成功率为100%。对照组4只发生室早(66.7%),4只发生室速(66.7%),6只发生室颤(100%),死亡2只(33.3%),建模成功率为66.7%。实验组3只发生再灌注心律失常(37.5%),对照组6只发生再灌注心律失常(100%),2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组动物较对照组动物缺血性心律失常发生晚(P<0.05)。实验组动物直流电转复成功率高于对照组。结论:缺血预适应、静脉推注美托洛尔可以有效地减少急性心肌梗死建模过程中心律失常的发生,提高建模成功率。

北方刺参与南方糙海参口感及营养成分比较分析

为了解南方和北方主要海参品种的口感及营养品质差异,分别对北方刺参(Apostichopus japonicus)和南方糙海参(Holothuria scabra)体壁的口感和营养成分,包括粗蛋白、灰分、总糖、粗脂肪、氨基酸组成、活性多糖及3种主要常量元素进行了比较分析。结果显示,糙海参的硬度、弹性明显高于刺参,而吞咽度和润滑感低于刺参;干样复水后,刺参的含水量(94.36%)明显高于糙海参(81.79%)。以干基计,刺参和糙海参的粗蛋白和灰分质量分数分别为62.51%、5.62%和81.01%、1.43%;总糖和粗脂肪质量分数分别为8.20%、1.23%和2.15%、1.40%。氨基酸分析显示:糙海参的谷氨酸、甘氨酸和脯氨酸的含量明显高于刺参,尤其胶原蛋白特征氨基酸——甘氨酸、脯氨酸的含量明显高于刺参,因此糙海参含有较多的胶原蛋白;刺参和糙海参的必需氨基酸含量分别为33.06%和18.51%,糙海参明显低于刺参。以干基计,刺参体内矿物元素Ca、Fe和Zn的含量和多糖含量高于糙海参。

实验用猪急性心肌梗死模型的制备

目的探讨经皮冠状动脉内球囊封堵法建立实验用猪急性心肌梗死模型的可行性及有效性。方法健康家猪14只,3～5月龄,体重25～40 kg(35.5±6.6)。麻醉后穿刺股动脉,行冠脉造影后沿血管送冠脉球囊至冠状动脉左前降支(LAD)近中段,即第二间隔支动脉分出处。动物随机分为2组,A组动物(n=7)行缺血预适应处理,依次扩张球囊阻断前向血流12、5、min,每次间隔60 s,然后扩张60 min,扩张压力为2 atm。B组动物(n=7)不行缺血预适应处理,直接扩张球囊阻断前向血流扩张60 min,扩张压力为2 atm。建立模型前、建立模型后1 h行心脏MRI及心电图检查,术中行心电监护。结果成功建立猪心肌梗死模型12例,B组动物死亡2例。术中共有12例动物发生室颤,其中10例经过电复律等抢救成功转复。12例建模成功动物术中心电图出现急性心肌梗死典型图形变化,术后心脏MRI检查出现间隔及前壁首过灌注缺损,延迟强化。结论经皮腔内冠脉球囊封堵冠状动脉可以建立实验用猪急性心肌梗死模型,缺血预处理可提高建模成功率。

自体骨髓间充质干细胞心肌移植治疗急性心肌梗死的实验研究

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSC)植入猪急性心肌梗死(AMI)区的转归及治疗作用。方法:选择10只体重35～45kg的家猪,经导管应用球囊封堵前降支动脉,建立心肌梗死模型,将存活的9只动物随机分为2组:(1)实验组5只,取骨髓分离BMSC体外培养扩增,建立模型2周后,通过心肌注射的方法将自体骨髓BMSC移植至AMI区;(2)对照组4只动物注射等量生理盐水。4周后比较2组的生存率、心功能变化、心肌功能性蛋白质表达的差异。结果:BMSC移植后,实验组动物心功能得到明显改善,梗死区室壁运动速度加快,局部室壁厚度加快,心肌移植细胞部位表达连接蛋白GATA-4等心肌功能性蛋白质。结论:骨髓BMSC经冠脉转运在心肌微环境下可向心肌细胞分化,并能改善心功能。

不同品系小鼠主动脉弓缩窄压力负荷模型的比较

目的比较两种不同品系小鼠建立主动脉弓缩窄压力负荷模型后心脏形态及功能变化的差异。方法将雄性KM小鼠及C57BL/6小鼠各一组随机分为术前(n=10)、假手术组(n=10)及主动脉弓缩窄(TAC)组(n=30)。术前及术后8周应用高频心脏超声、血流动力学、心脏病理组织学方法进行检测,并进行死亡原因观察。结果(1)KM小鼠及C57BL/6小鼠缩窄组围手术成功率分别为80%及87%;8周存活率分别为67%及77%(。2)与各假手术组比较,缩窄术后8周KM及C57BL/6小鼠TAC组心脏超声指标左心室收缩期、舒张期前壁厚度(Awsth;Awdth)、左心室收缩期、舒张期后壁厚度(Pwsth;Pwdth)、左室重量指数(LVMI)、动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室压力上升和下降最大速率(dp/dtmax;dp/dtmin)及病理解剖指标心脏重量指数(H w/Bw)、左心室重量(LVw)、左心室重量指数(LV w/Bw)均显著增加(均P<0.05),显示左心室肥厚;KM缩窄组左心室收缩末期、舒张末期内径(LVESd;LVEDd)、左心室舒张末期外径(EXLVDd)较其假手术组显著增加(均P<0.05);与C57BL/6缩窄组比较,术后8周KM缩窄组LVESd、LVEDd、EXLVDd、LVw、肺脏重量指数(Lungw/Bw)显著增加(均P<0.05)。结论KM小鼠主动脉弓缩窄动物模型与C57BL/6小鼠实验结果相似,均产生左室肥厚,但KM小鼠较早出现离心性肥厚趋势。

缺血后适应对压力超负荷肥厚心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨缺血后适应(IPost)在离体小鼠肥厚心肌缺血再灌注(I/R)损伤中的保护作用及可能的作用机制。方法 12周龄C57/BL小鼠通过主动脉弓缩窄4周建立心肌肥厚模型,利用Langendorff灌流装置建立小鼠肥厚心肌I/R模型,稳定灌流10 min后分为3组,空白组(SH组,给予灌流液持续灌流150 min)、缺血再灌注组(I/R组,予30 min全心缺血随后再灌注120 min)、缺血后适应组(IPost组,予30 min全心缺血后,采取缺血10 s及再灌注10 s的3次IPost周期,再灌注120 min)。使用微球囊进行心脏血流动力学检测,采用三苯基氯化四氮唑染色的方法确定梗死心肌面积及生化法测定心肌酶、检测心肌细胞超微结构,TUNEL法检测心肌细胞的凋亡。结果与SH组I、/R组比较,IPost组小鼠心脏血流动力学指标LVSP、dp/dtmax显著改善,心肌梗死范围减小,心肌酶释放减少,调亡指数显著降低(P均<0.05)。与I/R组比较,IPost组透视电镜下心肌细胞线粒体损伤明显减轻。结论 IPost能通过减少心肌梗死范围、减少线粒体损伤、抗心肌凋亡而有效地减轻离体小鼠肥厚心肌缺血再灌注损伤。

应用MRI活体示踪干细胞心肌移植可行性的实验研究

目的:探讨应用MRI活体示踪干细胞心肌移植的可行性。方法:选择8只雌性家猪,体重35～45kg,经导管应用球囊封堵前降支动脉建立心肌梗死模型后,将存活的7只随机分为Feridex标记的干细胞移植组(n=4)和Feridex未标记的干细胞移植组(n=3)。建立模型2周后开胸,在梗死区中央及梗死边缘区共5个点注射骨髓间充质干细胞(BMSC)(1.25～7.54×106)。于移植前及移植后1h、1周、2周分别行心脏MRI检查,比较移植前后MRI心脏影像学变化。移植后2周,取心脏组织行HE染色和普鲁士蓝染色。结果:移植后1h,Feridex标记的干细胞移植组中4只动物(100%)间充质干细胞移植区在MRI上呈明显的低信号改变,术后1周示心脏低信号改变达100%(4只动物),术后2周示2只动物(50%)细胞移植区有低信号改变。病理检查示梗死区内大量炎性细胞浸润,Feridex标记的干细胞移植组心脏注射点处的组织普鲁士蓝染色阳性。结论:Feridex标记的干细胞在MRI上呈低信号改变,应用MRI活体示踪BMSC是可行的。

益气活血汤对男性AsAb阳性病人外周血T细胞亚群分类的影响

目的 :通过观察中药益气活血汤对男性免疫性不育的作用 ,进一步研究中药对生殖免疫的作用机理。 方法 :30例血清抗精子抗体 (AsAb)阳性的不育病人 ,服用益气活血汤 2个月 ,测定用药前后外周血CD3,CD4 ,CD8以及CD4 CD8比值的变化。 结果 :治疗前后CD3数值变化不明显 (P >0 .0 5 ) ,治疗后CD4数值明显降低 (P <0 .0 5 ) ,CD8数值明显升高 (P <0 .0 5 ) ,CD4 CD8数值明显降低 (P <0 .0 5 )。 结论 :中药益气活血汤可能通过影响外周血T细胞亚群分类的水平 ,从而起到调节机体免疫力。