中国人常见GJB2基因突变片段TA克隆载体构建

目的应用TA克隆技术构建含中国人常见GJB2基因突变片段的载体，为构建突变绿色荧光蛋白融合载体提供基础。方法首先利用定点诱变法在体外构建235delC．299-300delAT和176del16bp绿色荧光蛋白非融合载体，以此为模板利用PCR扩增突变基因片段，然后将PCR扩增产物克隆到TA载体上，用限制性内切酶法和测序法鉴定重组质粒序列正确性。结果用限制性内切酶法和测序方法证实扩增片段为目的片段。结论成功地构建了235delC、299-300delAT和176del16bp突变基因片段TA克隆载体，为构建突变绿色荧光蛋白融合载体、进一步研究突变致聋机制奠定了基础。

吉林省听力障碍及耳疾流行病学调查研究

目的明确吉林省以人群为基础的耳疾与听力障碍的流行病学情况,为吉林省耳疾的防治工作提供科学依据。方法应用《WHO耳疾与听觉障碍调查方案》,通过容量比例概率抽样(PPS)的方法选择40个调查点,实际调查人数为6976人。耳聋残疾的定义和听觉障碍程度的分级采用WHO/PDH97.3推荐的标准,采用EARFORM V6.2(由WHO提供)软件进行资料输入和基本分析。结果911(13.1%)人有听力减退,311(4.5%)人存在听力残疾;城乡人群听力减退率和听力残疾患病率差异无显著性;男性听力减退和听力残疾患病率明显高于女性,差异有显著性;听力减退和听力残疾主要集中在60岁以上人群;患病率较高的耳疾病有耵聍(1.2%),慢性化脓性中耳炎(0.7%),鼓膜干性穿孔(1.4%),分泌性中耳炎(1.0%);19.3%的调查对象需要耳科或听力干预。结论所有听力减退的人群中,老年性耳聋患病率最高。听力残疾的患病率有上升的趋势,急需制定新的预防和治疗听力障碍和耳疾病的政策。

保留喉功能的下咽癌手术后缺损的修复

目的初步探讨在保留喉功能的下咽癌手术中,肿瘤切除后局部创面的修复方式。方法回顾性分析2013年3月~2018年3月33例下咽癌患者行保留喉功能肿瘤切除术后的临床资料,其中14例采用局部黏膜拉拢缝合,2例采用胸骨舌骨肌筋膜瓣修复缺损,4例采用异种牛脱细胞真皮基质修复膜,2例采用胸大肌皮瓣修复,4例锁骨上岛状皮瓣修复缺损,4例采用游离股前外侧皮瓣修复缺损,3例采用食管内翻拔脱胃上徙手术;观察缺损修复后患者伤口的愈合情况。结果33例患者喉功能良好,3例患者早期有轻微误吸,锻炼2周后即可正常进食。全部患者恢复吞咽功能,食管入口狭窄2例,后经局部扩张好转。咽瘘2例,局部换药1个月愈合。所有患者术后随访1年以上,生存率为78.79%(26/33),目前正在随访中。结论在保留喉功能的下咽癌手术中,防止误吸和避免咽食管狭窄是肿瘤切除后修复的主要目标;根据患者的具体情况,选择适合患者的个体化修复方法,既可以恢复下咽的结构和功能,还可以避免不必要的副损伤。

初中语文教学中学生语言能力的培养策略分析

随着教育制度的不断改革，素质教育越来越成为教育的目标。加强初中语文教学过程中对学生语言能力的培养是当前语文教学的一个重要目标。鉴于此，本文详细论述了语言能力的内容，并提出了相应的提高措施。

以鼻塞为主诉的儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症1例

1病例报告患儿,女,20个月,因右侧鼻腔通气不良伴血涕1个月、加重10d入我院。3个月前右耳反复中耳炎发作,予以抗感染治疗后好转;2个月前发现小细胞低色素性贫血,予以补铁对症治疗;50d前因发热（最高38.5℃）、肝功能异常于我院儿科诊断为＂肝损害＂予以对症治疗后好转。入我科查体：一般状态及反应良好,无贫血貌,皮肤及巩膜无黄染,全身浅表淋巴结未触及肿大,两肺呼吸音粗。

中国人常见GJB2基因突变表达载体的构建及鉴定

目的:构建中国人常见GJB2基因突变235de1C、299-300delAT和176de116bp与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白表达载体,寻找体外研究GJB2基因缺失突变致聋机制的有效途径。方法:用体外定点突变法构建235de1C、299-300delAT和176de116bp突变全序列与EGFP表达载体,以此为模板PCR扩增突变有效表达序列,将PCR产物连接到pMD19-T载体中,EcoRI/BamHI双酶切克隆载体,测序鉴定序列正确性后,将酶切产物插入pEGFP-N1载体中,脂质体转染HEK293细胞,荧光显微镜观察表达的融合蛋白。结果:GJB2基因突变235de1C、299-300delAT和176de116bp在HEK293细胞中高效表达,表达主要位于细胞质中。结论:成功构建了中国人常见GJB2基因突变235de1C、299-300delAT和176de116bp与EGFP的融合蛋白表达载体,为进一步研究其致聋机制奠定了基础。

低温等离子刀治疗声门下多形性腺瘤2例

1病例报告例1,患者,女,51岁,因甲状腺术后呼吸困难1个月于2011年5月15日入院。体检：心率80次/min,呼吸20次/min,血氧饱和度98%,血压140/100mmHg（1 mmHg=0.133kPa）。神清语明,无声音嘶哑,平静状态下呼吸尚可,轻度活动后即出现呼吸困难,锁骨上窝可见凹陷。