CTLA4-Ig改善EAMG大鼠脑功能障碍的分子机制研究

目的:探讨CTLA4-Ig对实验性自身免疫性重症肌无力(experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG)大鼠脑功能障碍的改善作用及可能涉及的分子机制。方法:采用乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor,AChR)α97-116肽免疫35只Lewis大鼠制作EAMG大鼠模型,然后用地塞米松和CTLA4-Ig处理大鼠。ELISA法检测血清AChR IgG和AChR IgG2b水平及后肢肌AChR含量;Lennon临床评分评价各组大鼠临床症状;避暗实验观察大鼠空间学习记忆的变化;紫外分光法测海马丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、Caspases-3、Caspases-9和Caspases-12活性;RT-PCR测海马Caspases-3、Caspases-9、Caspases-12及Trx-1 mRNA表达;Western-blot测海马Trx-1蛋白表达。结果:模型成功率为85.7%,与正常对照组比较,EAMG大鼠模型组Lennon临床评分显著增高;肌肉AChR含量明显减少;血清AChR IgG、AChR IgG2b浓度明显升高;避暗实验结果显示,EAMG组大鼠避暗潜伏期缩短,而3 min错误次数增加,海马MDA含量增加,SOD活性降低,且Trx-1 mRNA及蛋白表达下调;Caspases-3、Caspases-9和Caspases-12 mRNA表达及活性均增加。与模型组比较,地塞米松组和CTLA4-Ig组可显著改善EAMG大鼠临床症状,并降低血清AChR IgG、AChR IgG2b浓度,同时增加肌肉AChR含量;避暗潜伏期明显延长,错误次数减少;海马组织MDA含量降低,SOD活性增加,Trx-1 mRNA及蛋白表达上调;Caspases-3、Caspases-9和Caspases-12 mRNA及活性均降低。结论:EAMG大鼠可合并脑功能障碍,Trx-1表达下调介导的氧化应激及细胞凋亡可能是其CNS受损的主要原因之一;CTLA4-Ig通过上调Trx-1表达改善EAMG大鼠海马氧化/抗氧化系统功能紊乱并抑制细胞凋亡。