新型酸性磷酸酶“Turn-on”型荧光底物

酸性磷酸酶(ACP)是前列腺癌、戈谢病、肾病等疾病的重要生物标记物,因此开发灵敏、高选择性的ACP检测方法具有重要的意义。目前,已发展出多种ACP检测方法,包括免疫法、光谱法、色谱法、电化学法等;其中,荧光检测方法因灵敏度高、选择性好、快速、准确等优点备受关注。通过席夫碱反应,利用2-氨基苯硼酸(2-APBA)二聚体和磷酸吡哆醛(PLP)合成了一种新型的ACP“Turn-on”型荧光底物APBA-PLP(ABPL)。反应后,PLP的—CHO基团和2-APBA二聚体的—NH 2基团的特征峰消失,同时ABPL的C N基团的特征峰出现;此外,^(1)H和^(1)H—^(1)H COSY核磁波谱的信号峰与ABPL的结构相对应。以上表征结果证实了ABPL的成功合成。进一步,将ABPL应用于ACP检测。我们发现向ABPL水溶液中加入ACP后,体系的荧光强度增强,机理为:2-APBA二聚体为聚集诱导发光增强(AIEE)分子,其AIEE特性源于2-APBA二聚体的高度有序堆积;当2-APBA二聚体分子上引入PLP后(即合成ABPL),分子的高度有序堆积结构被破坏;加入ACP后,PLP水解为吡哆醛并从2-APBA二聚体分子上脱落,2-APBA二聚体分子又可重新进行高度有序堆积,表现为体系的荧光增强。在0~5 U·L^(-1)活性范围内,376.5 nm处的相对荧光强度与ACP活性之间呈现出良好的线性关系(R 2=0.99)。此外,当ACP、果胶酶、木瓜蛋白酶和脂肪酶的活性分别为4、50000、80000和10000 U·L^(-1)时,四种酶对应的相对荧光强度分别为0.2、-0.006、0.03和0.05。该结果表明ABPL对ACP具有高选择性。ABPL分子易合成,对ACP具有线性和高选择性响应,为设计合成可用于ACP检测的新型高效荧光底物提供了新策略。

文化全球化视角下竞技武术发展研究

文章对竞技武术文化的发展历程和发展方向进行文化全球化视角解读,研究发现:文化全球化不可阻挡,直接导致我国少数民族文化和社会习俗文化流失,武术文化发展不断落寂,竞技武术发展险受阻。提出:竞技武术文化可与博物馆进行联动;创办体现武术本质的赛事;从战略高度做好竞技武术训练理论人才培养。

基于骨髓间充质干细胞焦亡探讨中医药防治激素性股骨头坏死的研究进展

激素性股骨头坏死是骨科临床常见病,其发病机制较为复杂,至今尚未阐明,近年研究发现由NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路介导的骨髓间充质干细胞焦亡与激素性股骨头坏死的发生密切相关,而中医药对NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路有着良好的调节作用。基于此,对NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路介导BMSCs焦亡与激素性股骨头坏死发病的相关性,以及中医药对NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路的调控机制进行综述,以期为中医药防治激素性股骨头坏死提供参考。

细胞焦亡在骨代谢异常疾病中的研究

骨代谢相关细胞通过发挥骨的形成、分泌、吸收等作用进行骨代谢调节,达到骨组织修复和重建的目的,在此过程中骨代谢相关细胞的功能受多种因素的调控。细胞焦亡是由Gasdermin基因家族介导的新型促炎性细胞程序性死亡方式,在骨代谢异常疾病的病程演变过程中发挥着关键调控作用。该文就骨代谢相关细胞焦亡的分子机制与激素性股骨头坏死、骨质疏松症、骨关节炎、类风湿关节炎等骨代谢异常疾病的相关研究进行综述,以期为骨代谢异常疾病的防治提供新策略。

原料氨装置升级工程褐煤预干燥系统设计

内蒙古某原料氨提供装置原工程褐煤预干燥系统存在干燥不均匀、粉尘泄露等问题,在运行过程中发生了煤粉爆炸事故。现原料氨升级工程采用蒸汽管式干燥机预干燥系统代替原有的滚筒式干燥机预干燥系统,结合褐煤煤粉易燃易爆的特性,通过合理的干燥系统设备密封结构设计及控制系统方案设计,减少煤粉泄露、降低煤粉爆炸的风险。原工程滚筒式干燥机出口干煤水分在20%以上,升级工程蒸汽管式干燥机出口干煤水分可降至15%以下,现场设备至今运行稳定,未发生粉尘泄露或爆炸现象。

试析高性能混凝土在道路桥梁工程中的应用

近几年,高性能混凝土凭借自身性能,在工程行业中得到了全面推广和广泛应用,尤其是该材料在道路桥梁工程施工中发挥着重要作用。高性能混凝土强度高、性能好等特点对改善道路桥梁工程结构稳定性具有重要意义。基于此,文章以高性能混凝土为探究重点,分析了高性能混凝土在道路桥梁工程中的应用优势,并从指标设计、配合比设计、施工工艺、养护等方面阐述了高性能混凝土在道路桥梁工程中的应用要点,然后通过结合实际的道路桥梁工程案例,重点论述了高性能混凝土在道路桥梁工程中的具体应用,最后提出了高性能混凝土在道路桥梁工程中应用的质量控制措施。

两亲Cu-氮杂亚甲基二吡咯染料J-聚集体纳米片的制备及表征

以含两条十二烷氧基疏水链的氮杂亚甲基二吡咯(ADP)和含两条聚乙二醇亲水链的ADP为配体与Cu(Ⅱ)络合,合成了一种两亲性Cu(Ⅱ)-ADP配合物(染料Ⅰ),通过1HNMR、MS及元素分析仪确认了其化学结构,采用UV-Vis、AFM、TEM、小角X射线散射仪对染料Ⅰ聚集体的形貌和结构进行了表征。结果表明,染料Ⅰ在乙醇/水混合溶剂中自组装形成J-聚集体,最大吸收峰发生89 nm的红移。染料Ⅰ聚集体呈现二维纳米片形貌,并以双分子层形式进行堆积。

胞葬在骨稳态调控中的作用及研究进展

骨稳态是破骨细胞骨吸收与成骨细胞骨形成动态调节的过程,是人体骨骼正常发育的基础,骨稳态失衡影响着骨代谢相关疾病的发生和发展。然而,骨稳态的调节机制较为复杂,至今尚未完全阐明。近年研究发现,成骨细胞、破骨细胞及骨髓间充质干细胞胞葬在骨稳态的调节过程中发挥着至关重要的作用。胞葬能够维持成骨细胞、破骨细胞及骨髓间充质干细胞的正常功能,促进骨稳态,抑制骨质流失,增强骨骼强度。笔者就胞葬的发生机制进行阐述,对成骨细胞、破骨细胞及骨髓间充质干细胞胞葬与骨稳态的关系进行总结,以期为调节骨稳态,防治骨代谢相关疾病的研究提供新角度。

新时代高校武术专业课程思政开展现状与实施路径研究

为探索武术专业课程思想政治教育整合价值与实施路径,文章运用文献资料法和逻辑分析法,发现传统武术未将思想政治嵌入、武术专业课未能落实“技德并进”教学目标、武术教师对专业课思想政治元素缺乏深度挖掘能力以及武术专业课思想政治教育评价体系不完善等问题,总结出通过提高教师挖掘思想政治元素、落实“技德并进”教学目标、健全其组织体系与评价体系等措施,使武术技能教学与思想政治教育内容相融合,达到武术专业课思想政治教育塑造学生正确价值观和培养学生优秀精神品质的教学目标。

大型仪器分析实验教学的困境及虚拟仿真技术的应用

仪器分析实验是仪器分析类课程的重要实践环节,是高校培养高素质实践型人才的重要途径。然而,受制于仪器价格、运行维护成本、实验周期等因素,大型仪器分析实验教学面临困境。虚拟仿真技术是助力大型仪器分析实验教学走出困境的有效工具。本文探讨了大型仪器分析实验教学所面临的困境,并对虚拟仿真技术在大型仪器分析实验教学中的应用进行了总结和分析。

多步法分离和纯化雪旺细胞的实验研究

目的 改进雪旺细胞（SCs）的体外培养条件,以获得足够数量较纯净的雪旺细胞应用于周围神经修复。方法 5-7 d的SD仔鼠坐骨神经,采用混合酶长时间多次消化法分离雪旺细胞,阿糖胞苷（cytosine arabinoside,Ara-C）、G418（geneticin）抑制成纤维细胞生长,氟丝扣林促进雪旺细胞分裂增殖,低浓度胰酶快速消化传代进一步纯化雪旺细胞。结果 使用上述方法可以获得大量的高纯度雪旺细胞,经抗S-100蛋白单抗通过SABC法染色鉴定,雪旺细胞纯度可达到97％以上。结论本文所使用的方法是培养和纯化雪旺细胞较为理想的方法,可以满足目前组织工程神经修复的需要。

组织工程周围神经修复坐骨神经缺损应用研究

目的 应用组织工程方法构建周围神经以修复坐骨神经缺损。方法 体外培养的雪旺细胞 (SC)与牛去细胞基质 (BAM)、胎牛血清和培养液按一定的比例混合注入聚乳酸聚羟基己酸共聚物(PLGA)导管中 ,构建成组织工程周围神经。 30只SD大鼠随机分为 3组 ,实验组 :使用组织工程周围神经修复坐骨神经缺损 ;对照组 :用不含雪旺细胞的导管修复 ;自体神经组 :自体神经移植。 16周后通过免疫组化、电生理、透射电镜、辣根过氧化物酶 (HRP)逆行示踪及坐骨神经功能指数 (SFI)等方法检测神经再生及坐骨神经功能恢复情况。结果 PLGA导管至 16周已基本吸收 ,再生神经已通过缺损区长至远端 ,组织工程周围神经的修复效果接近自体神经组 ,优于空白组。结论 体外构建的组织工程周围神经可以修复周围神经缺损。

复合转化生长因子-β的组织工程化周围神经修复坐骨神经缺损

探讨了转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)在周围神经缺损修复中的作用。将50 ng·ml-1 TGF-β加入体外培养的雪旺细胞(Sehwann cells,SC)中,MTT和流式细胞仪观测到TGF-β能够明显促进SC增殖;ELISA方法检测到TGF-β组上清神经生长因子(NGF)含量高于对照组(P<0．05);将牛去细胞基质(Bovine acellular matrix,BAM)、SC、血清和培养基按一定的比例混合,注入聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)神经导管去修复15 mm坐骨神经缺损。30只SD大鼠分为3组,实验组:PLGA导管+SC+TGF-β;空白组PLGA导管+SC;和自体神经移植组。16周后通过电生理、透射电镜等检测方法显示各组坐骨神经均得到再生,修复效果实验组与自体神经移植组无显著性差异,均优于空白组。TGF-β一方面可以明显促进SC的增殖,另一方面可以增强SC分泌NGF的功能。因此周围神经修复过程中使用外源性的TGF-β对修复周围神经缺损有较好的疗效。

转化生长因子β及重组人骨形成蛋白2对雪旺细胞生物学行为影响的实验研究

目的研究转化生长因子β(transformin ggrowth factorβ,TGF-β)、重组人骨形成蛋白2(recom binant humanbonemor phogenetic protein2,rhBMP-2)对雪旺细胞生物学行为的影响。方法体外培养SD乳鼠雪旺细胞,按5×103/孔接种96孔板,分为3组。A组:加入50ng/mlTGF-β;B组:加入50ng/mlrhBMP-2;C组不作任何处理,作为空白对照组。采用MTT法每天取4孔连测9d细胞数,并绘制生长曲线;流式细胞仪测定细胞周期以观察雪旺细胞增殖情况;ELISA双夹心法测定培养液中神经生长因子(nervegrowth factor,NGF)含量。结果MTT法检测显示A、B组细胞生长曲线远离C组,逐渐上升到第8、9天差异明显,A组较B组上升趋势更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪测定显示A组和B组细胞增殖指数较C组高(P<0.05)。ELISA法检测A组上清NGF含量最高,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论外源性TGF-β、rhBMP-2均能促进雪旺细胞增殖和分泌NGF的功能,而TGF-β更优于rhBMP-2。

雪旺细胞三维培养体系的构建

目的 :构建雪旺细胞三维培养体系 ,获得细胞 -生物材料复合的理想方法。方法 :将牛去细胞基质 (BAM)、BrdU标记的雪旺细胞、血清和培养基按一定的比例混合 ,注入PLGA神经导管 ,37℃、5 0mL/LCO2 孵育形成凝胶。培养 1d后植入SD大鼠臀大肌中 ,3周后观察雪旺细胞在体内的生长情况。结果 :3周后导管内充满大量雪旺细胞 ,经BrdU抗体染色观察 ,植入的雪旺细胞仍存活。结论 :本实验中使用的雪旺细胞三维培养体系组织工程方法 ,可用于诱导周围神经再生。

纳米坡缕石的分散工艺对润滑油摩擦性能的影响

研究了纳米坡缕石的分散工艺对润滑油摩擦性能的影响。结果表明,三种分散工艺均可将纳米坡缕石均匀分散到基础油中。在室温下放置24h后,方案二和方案三出现少量沉淀,方案一无沉淀出现。在摩擦试验条件下,三种方案对应的平均摩擦系数分别为0.06518、0.06688、0.07011。

多层次整合：基层社会治理中党组织的行动逻辑探析——以北京市党建引领“街乡吹哨、部门报到”改革为例

基层社会治理一直是关涉党执政的社会基础和国家政权根基稳固的重大问题。本文基于政党在国家与社会关系中的功能定位以及当代中国党、国家和社会的权力组织结构提出了"多层次整合"的分析框架,以此来概括新时代基层社会治理中党的行动逻辑。通过对北京市党建引领"街乡吹哨、部门报到"的创新实践考察,发现:党为了解决其在基层社会中悬浮化、无根化的困境,构建了以党的领导为轴心体系,具有纵向多层级、横向广辐射特点的立体化权力网络。凭借这样的权力网络,党实现了对行政力量和社会力量的多层次有机整合。具体包括:向内整合,增强基层党组织对于各级行政力量的渗透;向外整合,强化基层党组织对于各级社会力量的吸纳;向下整合,加强基层党组织对于广大群众的融入。最终,实现党、国家与社会在基层社会的有机协调,形成共生共强的格局。

基于SRAP分子标记的三桠乌药遗传多样性分析

采用SRAP分子标记对山东省三桠乌药4个居群的遗传多样性进行了分析。16对引物共检测到174个位点,其中多态位点142个,多态位点百分率(PPL)81.61%,Nei’s基因多样性指数(H)0.254 8、Shannon’s信息指数(I)0.385 2,表明三桠乌药的遗传多样水平较高。遗传分化系数(G st)0.317 1,表明31.71%的遗传变异存在于居群间,68.29%的遗传变异存在于居群内。在居群水平上,崂山居群的遗传多样性最高,徂徕山最低。居群间遗传一致度(G S)和遗传距离(G D)分别为0.853 0～0.943 3和0.058 4～0.159 0,居群间的遗传距离和地理位置间无直接相关性。

崂山三桠乌药群落组成和结构分析

对山东崂山三桠乌药群落结构进行研究,以揭示其生态学特征。采用样地调查和群落学统计方法。崂山三桠乌药群落共有木本植物31科54属88种;群落中物种Raunkiaer频率等级分布为A>B>C>D=E;重要值位于前7位的树种有三桠乌药、赤松、小米空木、日本落叶松、盐肤木、日本花柏、胡枝子其重要值分别为8.82%、8.53%、8.19%、6.31%、5.96%、5.44%、5.37%;群落建群种为赤松,日本落叶松为第二建群种。崂山三桠乌药群落物种组成较为丰富,常见种的多度优势明显,物种分布较为均匀,群落垂直结构明显。

渐进式改革中的政策试点机理

政策试点作为我国渐进式改革中总结出的一套方法论,在推动我国经济社会发展以及政策和制度创新中发挥着独有的优势。政策试点-推广的过程从本质上讲是我国政策创新与扩散的过程,其遵循典型试验、合法性认可与组织化扩散的线性逻辑。尤其是合法性认可在这种基于政策试点的政策扩散实践中起着重要作用。这种独具中国特色的政策试点-推广的线性逻辑并不是一次性结束,而可能在现实中往复多次进行。通过对我国政府购买公共服务推广过程的案例分析,可以清晰地看到我国公共政策创新与扩散的内在演变逻辑。这个过程不仅是新政策逐渐具体化、细致化、成熟化的过程,而且是新政策不断吸取经验并"纠错"的过程。