EGCG对昆明小鼠早胚体外发育的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(-)(EGCG)对昆明(kunming,KM)小鼠早胚体外发育的影响,为改善小鼠早胚体外培养体系奠定实验基础。方法以空白M16培养液为对照组,M16中添加浓度为0.1μg/mL、1μg/mL、10μg/mL、20μg/mL EGCG为实验组,收集KM小鼠1-细胞胚进行体外连续培养,计数各组发育至2-、4-细胞胚、桑椹胚和囊胚等各个阶段的数目,并以2-细胞胚为基数,计算各组至不同阶段的发育率。结果添加EGCG实验组发育到桑椹胚和囊胚的比率明显高于对照组,其中以添加浓度为10μg/mL和20μg/mL的EGCG实验组的效果最显著,其桑椹胚发育率分别为77.3%和78.7%,而对照组只有43.2%(P<0.01)。10μg/mL和20μg/mL的EGCG实验组的囊胚发育率分别为53.0%和47.3%,也明显高于对照组(19.2%,P<0.01)。结论EGCG可以显著提高KM小鼠1-细胞胚体外发育到桑椹胚及囊胚的比率,以10μg/mL和20μg/mL浓度的EGCG效果最显著。

急诊科护士心理状况调查及干预

随着社会的进步和发展,人们日益关注工作压力及心理健康问题。护理工作尤其是急诊工作的特殊性,护士均有不同程度的心理压力,这不仅影响护士的日常工作,而且还会给护士的身心健康带来危害，甚至产生某些心理障碍。由于这种心理压力是长期蓄积，慢性发展，长此以往对急诊的护理工作及护士的身体健康造成一定的损害，因此建立合适的心理评估方法对急诊科护士心理状态进行定期评估，

M16添加硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ无法克服昆明小鼠早胚体外发育2-细胞阻滞

目的观察硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ(Peroxiredoxin Ⅱ,PrxII)是否可以克服昆明(Kunming)小鼠早胚体外发育2-细胞阻滞。方法取昆明小鼠1-细胞胚置于含PrxII蛋白的M16培养液中培养,观察PrxII对昆明小鼠早胚发育潜能和2-细胞胚内活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平的影响;同时比较昆明和B6C3F1小鼠1-细胞胚在M16中各自的发育情况;激光扫描共聚焦显微镜分别检测比较昆明与B6C3F1小鼠体外培养2-细胞胚内ROS水平以及昆明小鼠体外培养与体内发育2-细胞胚内ROS水平。结果M16培养液中添加PrxII蛋白(1nmol/L和100nMol/L)可以明显降低昆明小鼠体外培养2-细胞胚内ROS水平(P<0.05),但不能克服昆明小鼠体外发育2-细胞阻滞;昆明小鼠1-细胞胚在M16中培养存在2-细胞阻滞现象,而B6C3F1小鼠无2-细胞阻滞现象;昆明小鼠体外培养2-细胞胚内ROS水平显著低于体内发育2-细胞胚(P<0.05),亦略低于B6C3F1小鼠体外培养2-细胞胚内ROS水平(P>0.05)。结论M16培养液中添加PrxII可以明显降低2-细胞胚内ROS水平,但并不能克服2-细胞阻滞。与昆明小鼠体内发育2-细胞和B6C3F1体外发育2-细胞胚相比,体外培养昆明小鼠2-细胞胚内ROS水平并不升高,这些结果提示昆明小鼠体外培养出现2-细胞阻滞的原因并非是胚内ROS水平升高引起。

成纤维细胞生长因子受体-1、2和3在昆明小鼠卵母细胞和植入前胚中的表达与分布

目的：观察成纤维细胞生长因子受体（FGFR）-1、2和3在昆明小鼠卵母细胞和植入前胚中的表达和分布，为进一步探讨成纤维细胞生长因子（FGF）对昆明小鼠卵母细胞和植入前胚发育的影响提供实验依据。方法：逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）、免疫荧光细胞化学显色和共聚焦扫描显微镜观察。结果：RT-PCR检测显示，FGFR1、FGFR2和FGFR3mRNA在昆明小鼠卵母细胞和植入前胚均有表达；免疫荧光细胞化学显色、共聚焦扫描显微镜观察显示FGFR1、FGFR3免疫阳性反应见于卵母细胞和植入前胚胞质周边，靠近细胞膜；FGFR2阳性反应较均匀分布于卵母细胞和植入前胚的胞质。结论：FGFR1、FGFR2、FGFR3在小鼠卵母细胞和植入前胚发育的不同阶段都有表达，可能介导FGF调节小鼠卵母细胞和植入前胚的发育。

FGF10及其受体FGFR1、FGFR2在昆明小鼠输卵管和子宫内的分布

目的观察成纤维细胞生长因子10(FGF10)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR1、FGFR2)在昆明小鼠输卵管和子宫内的定位与分布。方法应用免疫组织化学法进行蛋白质定位观察。结果FGF10和FGFR1免疫阳性反应定位于昆明小鼠输卵管上皮细胞,FGFR2的免疫阳性反应见于肌层平滑肌。FGF10和FGFR1免疫阳性反应分布于昆明小鼠子宫内膜上皮、子宫腺上皮和肌层平滑肌,而FGFR2免疫阳性反应见于肌层平滑肌。结论FGF10及其受体在输卵管和子宫的分布可能参与输卵管和子宫的重要功能。

硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅵ在小鼠卵巢、输卵管和子宫中的分布

目的探讨硫氧还蛋白过氧化物酶VI(PrxVI)卵母细胞生长发育和早期胚胎发育中的可能作用。方法用免疫组织化学方法观察6～8周雌性昆明小鼠卵巢、输卵管和子宫PrxVI的分布。结果在卵巢中,PrxVI免疫阳性见于卵巢卵母细胞和黄体;在输卵管中,输卵管上皮呈PrxVI免疫阳性反应;在子宫中,PrxVI免疫阳性反应见于子宫内膜上皮、腺上皮和子宫内膜基质细胞。结论PrxVI的定位分布提示其可能参与小鼠卵母细胞生长发育和卵母细胞成熟过程的调节,并为受精卵和早期胚胎发育提供抗氧化的良好微环境。

动情期和动情间期小鼠输卵管中氧化应激和抗氧化基因表达差异

目的观察昆明(Kunming,KM)小鼠输卵管中氧化应激和抗氧化基因的表达是否随动情周期而改变。方法分别取动情期和动情间期小鼠输卵管进行RNA提取,用PCR芯片检测氧化应激和抗氧化基因表达的差别,然后用Real Time PCR对差异表达基因进一步验证。结果与动情间期比较,动情期小鼠输卵管中NADPH氧化酶1(NADPH oxidase1,NOX1)、谷胱甘肽过氧化物酶2(glutathion peroxidase 2,GPX2)、超氧化物歧化酶3(superoxide dismutase 3,SOD3)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)等4个基因表达上调。结论动情期小鼠输卵管中NOX1、GPX2、SOD3和NOS2等4个基因表达上调,提示其可能参与维持动情期小鼠输卵管腔内适度的活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和一氧化氮(nitric oxide,NO)水平,为卵子受精和早胚发育提供必要第二信号分子。

结直肠癌中EpCAM的表达及与DNA倍体改变的关系

目的探讨结直肠癌细胞中EpCAM(CD326)表达的临床病理学意义及与DNA倍体改变的关系。方法应用流式细胞直接免疫荧光法检测55例结直肠癌组织及癌旁正常黏膜组织中EpCAM的表达,用阳性率(percentage of positive cells,PPC)、平均荧光强度(mean fluorescence index,MFI)表示;应用细胞周期分析仪对结直肠癌细胞进行细胞周期分析。用细胞定量术分析EpCAM表达和DNA倍体改变的相关性及其在结直肠癌早期诊断、预后中的价值。结果 55例结直肠癌组织中EpCAM蛋白的PPC为(83.48±7.07)%,明显高于癌旁正常黏膜组织(43.56±5.29)%(t=39.22,P<0.001)。55例结直肠癌组织中EpCAM蛋白MFI值为28.90(19.60~45.89),明显高于癌旁正常黏膜组织的4.89(3.79~6.28)(Z=-6.45,P<0.001)。癌组织:浸润型+溃疡型vs肿块型(包括浸润型vs溃疡型),中+低分化vs高分化(包括低分化vs中分化),Dukes分期C+D vs A+B,p TNM分期Ⅲ+ⅣvsⅠ+Ⅱ,浸润深度pT3+T4 vs pT1+T2,淋巴结转移pN1 vs pN0,差异均有统计学意义,即生物学行为越差,EpCAM蛋白表达MFI值与PPC越高,而与患者年龄、性别无关。DNA含量分析结果显示:55例结直肠癌中39例(70.90%)为多倍体,DNA指数(DNA index,DI)和DNA倍体与肿瘤分化程度、Dukes分期相关,与淋巴结转移无关。同时,在EpCAM阳性病例中,DI随着EpCAM表达增强而升高(r=0.668,P=0.000);而增殖指标S期细胞比率(S-phase fraction,SPF)和增殖指数(proliferation index,PI)也随着EpCAM表达增强而升高(r_1=0.664,P_1=0.000;r_2=0.651,P_2=0.000)。结论EpCAM在结直肠癌中的表达明显上调,与肿瘤细胞侵袭转移、增殖密切相关,同时检测EpCAM表达和DNA含量分析能为结直肠癌早期诊断和预后判断提供参考依据。

三阴性乳腺癌临床病理特征及预后探讨

目的:探讨三阴性乳腺癌疾病的临床特点和预后。方法:选取笔者所在医院在2015年3月-2017年4月收治的行乳腺癌手术患者65例,根据HER-2、PR及ER等相关检测结果将65例行乳腺癌手术患者予以分组,试验组为三阴性乳腺癌患者28例,参照组为非三阴性乳腺癌患者37例。对65例乳腺癌患者的临床特征、生存质量及预后效果作研究。结果:试验组患者中未绝经状态患者13例(46.43%)、肿瘤最大直径≥5 cm的患者21例(75.00%)、有乳腺癌家族史的患者22例(78.57%)、组织学分级(Ⅲ级)的患者17例(60.71%)、手术方式(其他术式)的患者13例(46.43%)等相比于参照组患者较多,参照组患者的各项指标分别为8例(21.62%)、18例(48.65%)、19例(51.35%)、12例(32.43%)、7例(18.92%)。组间对比差异有统计学意义(P<0.05);两组乳腺癌患者的出现远处转移、局部复发发生概率进行比较,试验组较高,差异有统计学意义(P<0.05),其中试验组患者各部位转移例数高于参照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:三阴性乳腺癌呈年轻化发展,存有乳腺癌家族史患者的发生率较高,其分期时间较晚,淋巴结具有较高的转移率,其肿瘤直径偏大,易出现复发、转移的情况。三阴性乳腺癌具有较高的器官转移率,其手术方法、临床病情、肿瘤组织学分析及等对治疗效果存在一定的影响。