大鼠胃溃疡模型的制作方法

我们对okaba胃溃疡模型和家兔实验性胃溃疡模型加以改进,建立一个操作简便,结果稳定,酷似于人胃溃疡结构的大鼠实验性胃溃疡模型。70只雄性大鼠,重180-200米,用3%戊巴比妥钠,以1 ml/kg剂量麻醉。胸腹部剃毛,消毒,打开腹腔(手术切口长2cm左右),暴露出胃。在胃前壁近幽门处,将0.01 ml冰醋酸(含量99%以上)注入肌层近胃粘膜下层处。注射后,胃壁表面立即形成一个圆形或椭圆形的隆起,然后隆起变平出现一个圆形或椭圆形的乳白色不透明区。直径为5 mm。用缝线将大网膜固定于注射区,以防穿孔。逐层缝合切口。涂上一层稀释的火棉胶,保护伤口。在手术后2,4,6,10,14,21和28天取材。肉眼观察溃疡外形,测量溃疡直径,计算溃疡面积。固定于Bouin液,石蜡切片,厚6μm,常规H.E.染色。光镜下观察溃疡结构和愈合情况。

甲状腺素对大鼠胃溃疡愈合影响的形态学观察

本文在不同的甲状腺机能状态下,定量研究了大鼠胃溃疡愈合率的变化。大鼠摄取硫氧嘧啶(0.1%水溶液作饮水,饲养10天),引起实验性甲状腺机能低下(甲低组)。给予大鼠0.1%硫氧嘧啶的同时,给予甲状腺素(3μg/100g体重/日)10天,引起实验性甲状腺机能轻度亢进(甲轻亢组)。大鼠用过量甲状腺素(10μg/100g体重/日)10天,引起实验性甲状腺机能亢进(甲亢组)。对照组为正常大鼠,不作任何处理。然后用少量冰醋酸注射入胃粘膜下层造成胃溃疡。各组动物继续给药10天后,测量胃溃疡面积和容积,并计算愈合率。实验结果表明:甲低组溃疡容积(7.71±0.52mm^(3);对照组:5.5±0.78mm^(3))和面积(8.29±0.90mm^(2);对照组:4.39±0.73mm^(2))都增大,溃疡容积愈合率(-30±9.4%)和面积愈合率(-50±2.1%)显著降低;甲轻亢组溃疡容积(4.75±0.88mm^(3))和面积(4.05±0.93mm^(2))都减小,但无统计学意义,溃疡容积愈合率(37±3.8%)和面积愈合率(49±3.2%)显著升高;甲亢组溃疡容积(4.88±0.90mm^(3))和面积(5.16±0.74mm^(2))与对照组的接近,溃疡容积愈合率(28±1.1%)和面积愈合率(10±1.9%)升高,但无统计学意义。这些发现提示:1.甲状腺素是胃溃疡愈合所必需的激素,甲低时胃溃疡愈合速度减慢;2.小剂量甲状腺素可促进胃溃疡的愈合。

^(125)碘标记的三碘甲状腺原氨酸(^(125)I-T_(3))在大鼠胃溃疡局部的结合位点

本实验采用雄性Wistar大鼠,体重60~80 g,在无菌条件下打开腹腔,将少量冰醋酸注射入胃粘膜下层,造成胃溃疡。手术后10天,大鼠重80~100 g,以50μCi/100 g^(125)I-T_(3)的放射性剂量(比放射性为3,000μCi/μg)由颈静脉直接注射入体内。注射120分钟后做以下处理:1.取胃溃疡局部组织,入10%中性福尔马林液固定,石蜡切片(厚5μm),脱蜡,涂核乳胶,4℃曝光5~10天;2.用2%的戊二醛液(0.1 mol/L磷酸缓冲液配制,pH7.4)灌注固定,经丙酮脱水,环氧树脂包埋,做0.5~1μm的薄切片,涂核乳胶,4℃中曝光4~6天,显影定影;石蜡切片,HE染色;薄切片入1%甲苯胺蓝中染色。

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中甲状腺滤泡细胞的超微结构变化

本实验采用雄性Wistar大鼠39只,体重180~220 g,分成溃疡组、盐水组和空白组。溃疡组在无菌条件下打开腹腔,将少量冰醋酸注射入胃粘膜下层,造成胃溃疡;盐水组模拟手术,用等量生理盐水代替冰醋酸;空白组为正常大鼠。于手术后4~28天分批取材,进行超微结构的观察。盐水组:手术后4~6天,甲状腺滤泡细胞变得扁平,顶部质膜光滑,微绒毛减少。

大鼠实验性胃溃疡期间甲状腺的组织学和酶组织化学的研究

雄性Wistar大鼠80只,分成溃疡组、盐水组和空白组。溃疡组在无菌条件下打开腹腔,将少量冰醋酸注入胃粘膜下层,造成实验性胃溃疡;盐水组模拟手术,用等量生理盐水注入胃粘膜下层;空白组为正常大鼠。在手术后1~28天分批取材,进行组织学和酶组织化学观察。盐水组:手术后2~21天,甲状腺滤泡细胞的AcP、AlP、α-GPD、SDH、G 6 PD和NsE的活性减弱,并且比空白组的低,手术后4~21天,滤泡细胞变低,滤泡腔变大;溃疡组:手术后2~21天的AlP活性比盐水组略高,但比空白组的稍有减弱,α-GPD、SDH和G6 PD活性都比盐水组高,与空白组的相同。NsE与盐水组的相似,在手术后4~21天,此酶活性有所减弱。手术后4~10天溃疡组的滤泡细胞变低,滤泡腔变大。手术后14天,滤泡细胞高度恢复正常,滤泡腔大小与空白组的相似。本实验结果与家兔实验性胃溃疡期间甲状腺滤泡细胞功能活性增强基本一致。从而提示,在实验性胃溃疡期间,大鼠和家兔的甲状腺滤泡细胞可能都参与了胃溃疡修复的代谢活动。

大鼠胃窦粘膜5-羟色胺免疫反应阳性细胞的体视学研究

本文用免疫组织化学PAP法显示SD大鼠胃窦部含5-HT的细胞,并用Weibel体视学方法对其进行定量分析。结果如下:大鼠胃窦部免疫反应阳性细胞仅存在于腺上皮和胃小凹上皮中。该细胞在胃窦粘膜中的体积密度(V_v)为0.0038±0.0004,面数密度(N_A)为42.86±3.20个/mm^2,数密度(N_V)为2627.11±200.42个/mm^3。该细胞的分布有明显的区域性差异。从胃小弯至胃大弯部,细胞密度逐渐降低。小弯区密度最高,两侧壁密度次之;胃大弯区密度最低。大部分5-HT免疫反应阳性细胞位于粘膜深1/3段,该段密度最高,粘膜中1/3段密度次之,粘膜浅1/3段密度最低。此外,本文还对5-HT免疫反应阳性细胞的形态,进行了较详细的观察。

大鼠肾小管碱性磷酸酶动力学特征的组织化学研究

采用大鼠肾皮质新鲜冰冻连续切片，厚６μｍ。对相邻切片进行不同时间、不同ｐＨ值和不同底物浓度的Ｇｏｍｏｒｉ钙－钴法显示碱性磷酸酶（ＡＫＰ）。反应后的标本先用ＯｌｙｍｐｕｓＢＨ－２型显微镜Ｃ－３５ＡＤ－２型照相设备中曝光控制器，控制相同的入射光强度，对上述各不同组织化学反应条件的肾皮质，每一切片随机测定１０个视野曝光时间作为灰度参数。用图像分析仪测定同一切片的ＡＫＰ反应产物的平均灰度值和用曝光控制器显示的灰度参数进行相关、回归分析，结果如下：①随着反应时间的延长，灰度值相应增加，５分钟内，反应速度基本呈线性关系，３０分钟时，在光镜下发现反应产物有扩散现象；②在ｐＨ８时反应产物很弱，ｐＨ９和ｐＨ９．４时反应产物的灰度值最大；③随着底物浓度的增高，灰度值相应增加，而底物浓度０．５％～２％比３％～３０％时灰度值显著低；④灰度参数和图像分析的平均灰度呈明显的正相关，并计算出回归方程可以从灰度参数推算出图像分析的平均灰度值。根据实验结果绘制出不同时间反应曲线，不同ｐｈ值反应曲线，不同底物浓度反应曲线和直线相关曲线。可得出最佳反应时间。

显微曝光控制器对大鼠肾碱性磷酸酶组织化学进行定量研究的可行性探讨

采用大鼠肾皮质新鲜冰冻连续切片，厚６μｍ，对相邻切片进行不同时间、ｐＨ值和底物浓度的Ｇｏｍｏｒｉ钙—钴法显示碱性磷酸酶（ＡＫＰ）。反应后的标本用图像分析仪测试上述不同组织化学反应条件下肾小管ＡＫＰ反应产物的灰度值，进行定量分析。结果：①随着反应时间延长，灰度相应增加；②在ｐＨ７和ｐＨ１１条件下无反应产物，ｐＨ９和ｐＨ９．４时反应产物的灰度值最大；③随着底物浓度的增高，灰度值相应增加。根据上述实验结果绘制出不同时间、ｐＨ值、底物浓度的反应曲线，可得最佳反应时间、最适ｐＨ值和米氏常数。

大鼠结肠粘膜EC细胞的定量研究

用免疫组织化学PAP法显示大鼠结肠粘膜EC细胞,并用Veibel体视学方法对该细胞进行定量分析。结果表明,大鼠结肠粘膜EC细胞的体密度(Vv)为:0.0029士0.0003,面数密度(NA)为22.85士1.1.20个/mm^2;数密度(Nv)为1629士100.43个/mm^3。

家兔实验性胃溃疡期间甲状腺的组织学和组织化学变化(Ⅰ.滤泡细胞)

用成年雄性家兔52只,分为溃疡组、盐水组和空白组。溃疡组在无菌条件下打开腹腔,将少量冰醋酸注入胃粘膜下层,造成实验性胃溃疡;盐水组模拟手术,用生理盐水注入胃粘膜下层;空白组为未经处理的正常家兔。三组动物饲养条件相同,分别在手术后1~40天取材,进行组织学和组织化学的观察。盐水组:手术后3~28天,甲状腺滤泡细胞的酶活性比空白组的低,手术后7~28天,滤泡细胞变低,滤泡腔增大;溃疡组:手术后1~3天,滤泡细胞的各种变化与盐水组的相同,手术后7天,部分酶活性增高。手术后14~28天,溃疡组的AcP、SDH、G6PD、PO、ATP酶和AIP活性都比盐水组的高。滤泡细胞内PAS阳性的胶体小滴数量,也比盐水组的多,细胞较高,滤泡腔直径较小。手术后40天,两组动物的各项观察指标都恢复正常。本文结果提示,在家兔实验性胃溃疡期间,甲状腺滤泡细胞可能参与了抗疾患的代谢活动。

家兔实验性胃溃疡期间甲状腺的组织学和组织化学变化(Ⅱ.滤泡旁细胞)

用成年雄性家兔49只,分为正常组、溃疡组和盐水组。正常组是未经处理的正常家兔;溃疡组为在无菌条件下,打开动物腹腔,用少量冰醋酸注入胃粘膜下层,造成实验性胃溃疡;盐水组模拟手术,用生理盐水注入胃粘膜下层。手术后1~28天,分批取甲状腺,进行组织学和组织化学的观察。实验结果表明,各组甲状腺滤泡旁细胞没有明显的组织学变化。正常家兔甲状腺滤泡旁细胞的乙酰胆碱酯酶、非特异性酯酶和酸性磷酸酶反应很强,乙酰胆碱酯酶有一定的特异性;硫胺素焦磷酸酶反应很弱;琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶反应弱阳性。盐水组的甲状腺滤泡旁细胞在手术后1~7天,某些组织化学产生一定的变化;在手术后14~28天恢复正常。溃疡组的甲状腺滤泡旁细胞在手术后1~3天,各组织化学反应与盐水组相似;手术后7~28天,许多组织化学反应均在一定程度上比盐水组的反应增强。本文讨论了以上组织化学变化的意义,提示在实验性胃溃疡期间,甲状腺滤泡旁细胞可能参与了调节活动。