Notch信号通路分子在舌鳞癌中的表达及意义

目的明确Notch信号通路受体Notch1、Notch3及其配体Jagged1、Jagged2在舌鳞癌中的表达及其意义。方法通过逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学和Western blot检测74例舌癌患者的组织标本(舌癌及癌旁组织)和人舌癌Cal-27细胞株中Notch1、Notch3、Jagged1和Jagged2 mRNA与蛋白质的表达水平,分析其与细胞增殖及临床病理的关系。结果舌癌、癌旁组织及Cal-27细胞株中均检测到Notch1、Notch3、Jagged1、Jagged2 mRNA和蛋白质的表达。Notch1和Notch3蛋白在舌癌中的表达率高于癌旁组织,而Jagged1和Jagged2蛋白在舌癌和癌旁组织中的表达率无明显差异。Notch1和Notch3蛋白的表达和舌癌的临床分期具有相关性。4种信号蛋白的表达与患者的年龄、性别和临床病理分级无相关性。Notch3和Jagged2的表达具有相关性。Notch1蛋白在淋巴结转移阳性病例中的表达率高于转移阴性的病例,Jagged1在转移阳性病例的表达分级高于阴性病例。结论 Notch信号通路分子在舌鳞癌中表达活跃,与舌癌的发生发展有重要的相关性。

Jagged1RNA干扰慢病毒载体抑制舌癌Cal-27细胞增殖、侵袭作用的研究

目的:观察Jagged1RNA干扰慢病毒载体抑制舌癌Cal-27细胞增殖、侵袭作用。方法:采用RT-PCR和Western Blot检测Jagged1siRNA对Cal-27细胞Jagged1基因和蛋白表达水平的敲减效果;克隆形成实验检测干扰后细胞群体依赖性和增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期的变化;Tranwell检测RNA干扰后侵袭率变化。结果:KD组较NC组Jagged1基因和蛋白表达受到明显的敲减。KD组细胞克隆形成率明显降低,较NC组下降42.42%。S期细胞比率均明显下调,约62.98%,G1期细胞比率上调,凋亡率明显增高。72hKD细胞生长抑制率为32.50%。Jagged1RNAi慢病毒载体感染后,KD组侵袭率无下降。结论:下调Jagged1基因和蛋白的表达,可使舌癌细胞克隆形成率明显降低、增殖活性降低、S期细胞比率下降、凋亡率升高、成瘤能力下降。

人源性Jagged1 RNAi慢病毒载体的构建及鉴定

目的构建人源性Jagged1 RNAi慢病毒载体,并观察其对舌癌细胞中Jagged1的敲减作用。方法 GenBank检索人Jagged1信息,设计Jagged1靶点。BLAST比对同源性,合成双链DNAoligo。线性化的RNA干扰载体质粒pAJ-U6-shRNA-CMV-eGFP/PuroR,双酶切,与合成的双链DNAoligo连接,转化感受态细胞,选择阳性克隆进行鉴定。慢病毒三质粒系统共转染293T细胞,包装,纯化,并转染Tca8113以及Cal27细胞,测定转染效率。PCR及Western Blot检测Jagged1基因及蛋白表达变化。结果成功构建靶向Jagged1 RNAi载体质粒,并成功进行慢病毒包装。该系统可有效地感染Tca8113及Cal27细胞。细胞内Jagged1基因及蛋白表达均有明显下调。结论成功构建Jagged1 RNAi慢病毒载体,为下一步研究Jagged1在人舌鳞癌的中的作用机制奠定基础。

儿童口腔颌面部狗咬伤的治疗

目的总结儿童口腔颌面部狗咬伤的治疗经验,为临床提供参考。方法对2011年7月-2018年6月期间收治的狗咬伤口腔颌面部的19例儿童患者行一期清创缝合,同时给予狂犬病疫苗、破伤风疫苗及被动免疫制剂人源免疫球蛋白肌肉注射,并使用阿莫西林克拉维酸钾等抗炎治疗,并进行随访及回顾性分析。结果19例儿童患者,经过治疗后18例一期愈合,1例二期愈合,随访半年至7年半,患儿面容恢复较好、未发生狂犬病。结论对于狗咬伤口腔颌面部患儿的治疗,一期清创缝合减轻了术后瘢痕,有利于面容的恢复。

同种异体舌移植的研究进展

先天或后天原因所致舌严重畸形、缺损或缺失是口腔颌面外科临床中常见问题。目前常规方法修复存在很多问题,效果尚不能令人满意。学者们逐渐将目光转向同种异体舌移植。本文就舌同种异体移植外科技术方面及抑制免疫排斥反应等方面的研究进展作一综述。

兔VX2舌鳞癌移植瘤模型3种建立方法的比较

目的采用3种不同移植瘤方法建立稳定的兔VX2舌鳞癌移植瘤模型,并对这3种方法建立的模型的生物学特性进行比较。方法将72只新西兰大白兔随机分成3组,每组24只,分别用瘤组织块植入法、改良瘤细胞悬液注入法及瘤细胞悬液注入法植于兔舌侧缘中1/3黏膜下,建立兔舌鳞癌的移植瘤模型。观察和比较3种方法所建立的模型的肿瘤生长状况、成瘤率和自发转移发生率。结果瘤组织块植入组、改良瘤细胞悬液注入组、瘤细胞悬液注入组的成瘤率分别为83.3%、91.7%、33.3%,局部淋巴结转移率分别为71.4%、100.0%、37.5%,肺转移率分别为35.7%、81.3%、0;3种方法建立的兔VX2舌鳞癌移植瘤模型的组织学形态均符合中分化鳞状细胞癌特征。结论3种方法建立的移植瘤模型均较接近人舌鳞癌自然生长过程。其中,改良瘤细胞悬液注入法建立的动物模型,因成瘤率高、转移率高、同期瘤体大小差异较小,更适合于舌鳞癌研究。

CBCT辅助下应用超声骨刀行儿童上颌埋伏多生牙拔除术临床研究

目的:研究锥形束电子计算机断层扫描(CBCT)辅助下应用超声骨刀行儿童上颌埋伏多生牙拔除术的临床价值。方法:选取2019年10月-2020年6月笔者医院收治的90例上颌埋伏多生牙患儿为研究对象,按照抽签方式将其随机分为超声骨刀组和微动力组,每组45例(埋伏牙均为76颗),微动力组采取电动式颌面外科微动力手术治疗,超声骨刀组采取超声骨刀手术治疗;比较两组手术时间、出血量、离院时间、麻醉药用量及手术成功率,比较两组治疗后1、3、7d疼痛视觉模拟评分(VAS)、张口度,比较两组治疗后上腭黏膜麻木和牙齿松动发生情况,比较两组手术并发症发生情况。结果:超声骨刀组出血量、离院时间显著低于微动力组,差异有统计学意义(P<0.05),两组手术成功率比较无统计学意义(P>0.05)。超声骨刀组术后各时间段VAS评分组间比较,显著低于微动力组,张口度比较显著高于微动力组,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后VAS评分组内比较,术后1d>术后3d>术后7d,张口度组内比较,术后1d<术后3d<术后7d,差异有统计学意义(P<0.05)。超声骨刀组术后未发生黏膜麻木及牙齿松动患者比例显著高于微动力组,差异有统计学意义(P<0.05)。超声骨刀组并发症总发生率为8.89%,与微动力组17.78%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CBCT引导下利用超声骨刀拔除上颌埋伏多生牙有较好的临床疗效,能更好的减少手术创伤,加快患者恢复,安全性良好,临床价值较高。

siRNA特异性沉默hTERT mRNA对人舌癌Tca8113细胞体内外生长的影响

目的:探讨靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的siRNA抑制舌癌Tca8113细胞的效果和机制。方法:构建hTERT基因的siRNA(siRNA-hTERT1),阳离子脂质体法转染舌癌Tca8113细胞,以无同源性的siRNA-hTERT2作阴性对照,以未转染的细胞为空白对照。MTT法检测细胞生长率,流式细胞术分析细胞凋亡的情况。建立裸鼠舌癌皮下种植瘤模型,瘤内注射法将siRNA-hTERT1转导,观察3组种植瘤的大小,细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒检测种植瘤内细胞凋亡的情况。逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测细胞株和种植瘤内hTERT mRNA表达的变化。结果:细胞株转染siRNA-hTERT172h后,抑制率达47.2%,显著高于阴性对照组(2.6%),P<0.01;细胞凋亡率也明显增加,达27.30%±0.18%,显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。种植瘤转染siRNA-hTERT114d后,种植瘤体积为(298.8±138.7)mm3,显著小于阴性对照组的(495.1±151.6)mm3和空白对照组(506.8±207.4)mm3,抑瘤率达到40.0%(P<0.01);同时可见转染组的细胞凋亡数目增加,显著多于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。检测hTERTmRNA的表达,可见siRNA-hTERT1转染后,细胞株和种植瘤内的表达显著减少(P<0.01),而阴性对照和空白对照间无显著差异。结论:siRNA-hTERT1在体内外均能有效抑制舌癌Tca8113细胞的生长,抑制hTERT基因的表达和促进细胞的凋亡是其主要机制。

交互固位在后牙多植体支持固定桥修复的临床应用

目的探讨多种植体支持式交互固位固定桥在修复后牙区牙缺失并伴有咬合空间不足病例中的应用,评估其可行性及初步临床效果。方法选择后牙区种植固定桥修复并伴有咬合空间不足的病例4例,每例2颗种植体,8个植体位点,龈距离平均3.3 mm,均使两颗种植体基台外形形成相互倒凹的关系,在基台无共同就位道情况下,种植修复桥和基台,在半接合状态,通过旋转方式同时准确就位,并由基台螺丝最终旋紧固定,无需使用粘接剂。制作时与修复技师充分沟通交互固位的理念和方法,技师按照旋转就位方式完成修复体制作。临床操作中,按照技师制作的特点,戴入种植体支持式交互固定桥,并观察临床效果。结果所有种植修复体顺利戴入,种植体与基台及基台与修复体之间就位精确,恢复咬合关系满意。行使功能3~18个月后,所有修复体和基台无松动,无脱落,无基台折断;修复体周围粘膜无红肿,无压痛。结论种植固定桥的交互固位方式可以有效解决后牙区种植修复空间不足的情况,其长期效果有待长期和大量病例观察。

超声骨刀结合分根术拔除上颌磨牙区残根的临床分析

目的:探讨超声骨刀结合分根术拔除上颌磨牙区残根的临床应用价值。方法:选取2016年1月—2017年12月期间来我院口腔颌面外科门诊就诊需拔除上颌磨牙区残根的患者200例作为观察对象,用电脑随机将其分为两组,各100例,对照组使用传统锤凿法拔除,观察组使用超声骨刀结合分根术拔除,比较两组的手术效果。结果:观察组的手术时间比对照组短,术后拔牙窝颊侧骨板完整率、疼痛程度及患者满意度均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:超声骨刀结合分根术拔除上颌磨牙区残根能提高手术效果,减轻患者术后疼痛,拔牙窝颊侧骨板几乎没有破坏,利于后期的种植修复,安全性高,值得临床进一步推广。

舌鳞癌舌颌颈联合根治及游离皮瓣转移修复术的临床护理分析

目的:探析临床护理在舌鳞癌舌颌颈联合根治及游离皮瓣转移修复术护理中的应用效果。方法:选取本院2013年11月-2014年11月收治的行舌鳞癌舌颌颈联合根治及游离皮瓣转移修复术的患者20例为研究对象,随机分为两组,每组各10例,观察组给予临床护理干预,对照组不予以任何护理措施,观察应用效果。结果:对比两组患者住院时间、住院费用以及语言恢复情况,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:临床护理用于舌鳞癌舌颌颈联合根治及游离皮瓣转移修复术护理,能有效提高治疗效果。

坚强内固定技术治疗下颌骨骨折114例

目的探讨坚强内固定技术治疗下颌骨骨折的临床应用体会,以提高治疗水平。方法 2006年3月～2011年3月采用坚强内固定技术对下颌骨不同部位骨折141例,共计187处骨折的患者进行治疗观察分析创口愈合情况、术后咬合关系及开口度、接骨板保留情况。结果术后有6例出现创口感染,余伤口愈合良好;4周后检查有8例伴有颌干扰;57例开口度>3 cm,69例开口度2～3 cm、7例开口度<2 cm;141例患者的187处骨折术后X线检查,176处骨折对位良好,占94.1%;所有病例均没有出现固位钉松脱、钛板折断等情况,均未取出夹板。结论坚强内固定技术应用于下颌骨骨折的治疗具有创口愈合好,对颞颌关节功能影响小,固定稳固等特点,是一种疗效可靠的治疗方法。

大鼠失舌神经对舌味蕾Shh表达的影响

目的:探讨SD大鼠失舌神经对舌味蕾Shh表达的影响。方法:216只SD大鼠随机分为3组即正常组、单侧失神经组和双侧失神经组,每组各72只。腹腔注射麻醉后,正常组于下颌磨牙舌侧切开显露舌神经后直接缝合口底黏膜,单侧失神经组暴露并剪除右侧舌神经约0.5cm,双侧失神经组暴露并剪除双侧舌神经各0.5cm。分别于术后6h、12h、1d、2d、3d、5d、10d、15d、20d、1个月、2个月、3个月时处死动物,切取舌前2/3组织,以免疫组织化学法及原位杂交法检测味蕾Shh(sonic hedgehog)基因及蛋白的表达。结果:大鼠失舌神经支配后,舌味蕾Shh的表达逐渐降低,一侧失神经不影响健侧Shh的表达;在一定时间内,单侧失神经组可观察到术侧舌味蕾Shh表达的恢复,而双侧失神经组未见恢复。结论:SD大鼠失舌神经后,舌味蕾Shh表达明显减弱。

鼻咽癌患者放疗后血清玻连蛋白的变化研究

目的:通过对鼻咽癌放疗后发生放射性颌骨坏死(osteoradionecrosis of the jaws,ORNJ)患者及放疗后未发生ORNJ患者、正常人血清中玻连蛋白(VN)进行定量分析,初步研究其是否可作为鼻咽癌患者放疗后预测ORNJ发生的潜在血清标志物。方法:收集鼻咽癌患者放疗后发生ORNJ患者和放疗后未发生ORNJ患者及正常人,各20例,分别作为试验组、试验对照组及空白对照组。应用ELISA方法初步分析三个组血清中VN的表达。结果:试验组为19.62(8.97,27.71)ng/mL,试验对照组为2.34(1.34,5.21)ng/mL,空白对照组为19.24(8.49,22.68)ng/mL,试验对照组的VN浓度低于试验组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),而试验组和空白对照组的VN浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:VN可能作为预测鼻咽癌放疗后ORNJ发生的潜在血清标志物。

大型颌骨囊性病变的开窗减压治疗

目的探讨大型颌骨囊性病变的开窗减压治疗效果。方法 2013—2017年在中山市人民医院·口腔分院口腔颌面外科就诊的大型颌骨囊性病变患者18例,均采用开窗减压治疗术,观察术后3年囊腔的变化情况。结果术后随访1～3年,15例患者囊腔基本消失、2例复发、1例治疗无效(改为传统的手术)。开窗治疗的病例病变区域骨质生长恢复良好,临床症状消除。结论大型颌骨囊性病变的开窗减压治疗切实可行。对于病变累及的患牙牙髓尽量保留,待囊腔周围骨质生长回后,开窗减压治疗术后1年时根据活力测试考虑是否需要根管治疗。

骨纤维异常增殖症的研究进展

骨纤维异常增殖症（fibrous dysplasia of bone．FDB）．又称为纤维结构不良．是一种发生于骨髓内的良性骨纤维组织病损．可发生任何部位的骨．1938年Garlock分别命名了“纤维结构不良”。FDB可表现为单骨或多骨组织病损．以畸形、疼痛和病理骨折为特点。多骨性可分为两类：（1）Jaffe-Lichtenstien型．见于任何年龄．女性略多见．存在两处以上的病变．常伴有皮肤的色素沉着（褐色斑）：（2）MeCune-Albright（MAS）型，多见于年轻女性．多数骨骼受侵．皮肤色素沉着和女性性早熟等分泌症状。现对近几年来有关FDB的病因、病理学、发病机制、影像学、诊断及鉴别诊断、治疗等方面的研究所取得的进展做一综述．

Notch信号通路调控调节性T细胞作用机制的研究进展

Notch信号通路是脊椎动物和非脊椎动物进化上高度保守的信号途径。Notch信号传导途径与免疫系统存在着密切的关系，参与T细胞功能的调控，包括T细胞的活化和增殖，细胞因子分泌和Th1或Th2分化，也参与调节性T细胞（Treg）的产生、扩增和功能发挥。Notch信号途径不仅参与了免疫系统的发育，同时在成熟的免疫细胞功能调节中也具有重要的作用。

自体富血小板纤维蛋白复合脂肪干细胞对自体脂肪组织移植存活的影响

目的观察自体富血小板纤维蛋白（PRF）复合脂肪干细胞（ASCs）对自体脂肪组织移植存活率影响。方法取健康成年人下腹部脂肪组织颗粒进行体外分离培养扩增提取脂肪干细胞；同时抽取其静脉血20m1，一次离心法提取自体PRF；制成4组混合物：实验组A：100g／L的PRF200¨l＋ASCs＋脂肪组织（Fat）500mg；实验组B：生理盐水200Izl＋ASCs＋Fat500mg；实验组C：100g／LPRF200斗l＋Fat500mg混合而成；实验组D：生理盐水200¨l＋Fat500mg混合而成。在裸鼠背部中线两侧各分离2个皮下腔隙，将以上4组复合移植物各自随机注射入裸鼠的任一腔隙深筋膜下。移植3个月后将移植物取出，检测并对比各组脂肪移植物的微血管密度、脂肪成活率及脂肪细胞纤维化坏死率等。结果统计学分析显示：各组脂肪细胞存活率分别为A组（78．5±6．2）％，B组（66．3±5．1）％，C组（63．8±5．5）％，D组（32．4±3．9）％。吸光率为A组（5．1-t-O．8）％，B组（3．5±0．4）％，c组（3．2±0．6）％，D组（1．3-t-O．3）％。脂肪细胞密度为A组（51．7±6．6）／mm。，B组（39．8±5．2）／mm。，C组（37．5±5．7）／mm。，D组（20．3±3．1）／ram。．脂肪组织微血管密度为A组（42．7±3．8）／ram。，B组（31．5±2．9）／mm。，C组（29．2±3．3）／mm。，D组（11．4±2．5）／ram。。A组的脂肪成活率（细胞存活率、脂滴量及细胞密度等）及微血管密度显著高于其他三组（P〈0．05），而D组的脂肪成活率及微血管密度则显著低于其他三组（P〈0．05）。结论早期应用PRF复合脂肪干细胞可促进移植脂肪组织局部的血管再生，增加脂肪组织的质量保持率，减少脂肪移植后的纤维坏死程度。

超声骨刀联合高速涡轮钻拔除复杂下颌阻生智齿的临床护理

目的探讨超声骨刀拔除复杂下颌阻生智齿的效果及护理经验。方法选择90例下颌阻生智齿患者,随机平均分为三组:(1)A组,采用涡轮钻法拔除;(2)B组,采用超声骨刀法拔除;(3)C组,采用超声骨刀结合涡轮钻法除。观察三组患者手术时间、术后疼痛、肿胀程度等情况。采用SPSS 13.0软件包进行统计学分析。结果 C组拔牙时间低于A、B组,差异有统计学意义(t A=25.49,tB=9.44,P均<0.05),且并发症较低(3%)。结论超声骨刀结合涡轮钻法的应用,可明显提高工作效率,减少术后并发症,降低手术风险,优质的护理配合及熟练的"六手操作"是超声骨刀结合涡轮钻法微创、高效拔除复杂下颌阻生智齿的重要保障。

顺铂和阿霉素联合抑制舌鳞癌Tca8113细胞增殖

目的观察顺铂和阿霉素联合作用对人舌鳞癌Tca8113细胞生长的抑制作用，以及对细胞周期和凋亡的影响。方法不同浓度顺铂、阿霉素及两者联合作用于人舌鳞癌Tea8113细胞，用MTT法观察细胞增殖情况以及药物对细胞生长的抑制效应。用流式细胞仪观察细胞凋亡和细胞周期。结果顺铂（r=0．538，P〈0．01）和阿霉素（r=0．642，P〈0．01）呈剂量和时间依赖性抑制Tca8113细胞生长。单独用1．25μmol／L阿霉素作用24h，对Tca8113细胞的生长无显著影响。不同浓度顺铂（2～10mg／L）单独作用24h，仅10mg／L浓度可显著抑制Tca8113细胞的生长（P〈0．01）。1．25μmol/L阿霉素与顺铂联合应用24h后，4、6、8、10mg／L顺铂均可显著抑制Tca8113细胞生长，且与相应浓度的单独用药组比，差异均有统计学意义（均为P〈0．001）。1．25μmol／L阿霉素、6mg／L顺铂以及阿霉素1．25μmol／L＋顺铂6mg／L均显著改变G0～G1期（50．00±0．32％，43．53±2．026％，50．77±3．83％）和S期（36．5±1．05％，40．8±2．52％，30．87±2．65％）细胞百分比（均为P〈0．01），联合用药的作用较单一用药组更显著（P〈0．05）。上述药物对细胞凋亡的作用均不明显，联合用药后坏死细胞比例明显增加。结论顺铂和阿霉素联合作用，可显著地抑制人舌鳞癌细胞分化增殖，并增强药物的细胞毒性作用。