绿鲍(Haliotis fulgens)线粒体基因组全序列测定及分析

为高效鉴别鲍属物种和更好地管理和保护鲍种质资源,本研究通过高通量测序获得了养殖绿鲍(Haliotis fulgens)稚贝的线粒体基因组全序列,并对其序列和结构特征进行分析。结果表明,绿鲍线粒体基因组全长17 041 bp,含有37个编码基因,其中蛋白质编码基因13个、t RNA基因22个、r RNA基因2个。13个蛋白质编码基因均以AUG为起始密码子,以UAG或UAA为终止密码子。除t RNA-Ser^((AGN))外的21个tRNA基因可折叠成典型三叶草结构。分析发现t RNA-Glu和COX3间存在富含A+T的非编码区,其内含有2个带回文序列的发卡结构。基于已报道的10个鲍属线粒体基因组全序列构建系统发育树,发现绿鲍与皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)、红鲍(Haliotis rufescens)、黑鲍(Haliotis cracherodii)聚为一支。将绿鲍与皱纹盘鲍13个线粒体编码蛋白的结构域比较,发现二者ND2、ND4的跨膜结构域数量存在差异,这是否与二者的高温耐受性差异有关,有待进一步研究。总之,绿鲍线粒体基因组全序列的首次获取和分析,丰富了鲍类细胞遗传信息,为分类、种质鉴定与种质资源保护提供了基础数据和参考。

大黄鱼体内寄生纤毛虫病的诊断与治疗

本文首次报道了罗源湾内网箱养殖的大黄鱼发现一种由体内寄生纤毛虫引起的新的疾病。该纤毛虫病发生水温为17℃～22℃,造成日死亡率1%～2%。镜检结果表明大黄鱼体表粘液、鳍条、鳃、肝、脾、肾脏、肠道、脑组织都有该虫寄生,其中以鳃血管内虫体数量最多。笔者自拟了一个由百部、黄柏、苦参、蛇床子、茯苓等11种中药组成的复方,采用内服治疗15d,取得良好效果。表明中药复方可以用于大黄鱼体内寄生纤毛虫病的防治。

大黄鱼生长激素在毕赤酵母中的表达

为大量获得具有生物活性的大黄鱼生长激素(Pseucdosciaena crocea,Growth Hormone,pcGH),利用本实验室分离的天然大黄鱼生长激素基因在毕赤酵母表达系统中的表达进行了研究。把pcGH克隆到酵母整合型质粒载体中构建重组表达载体pPIC9K-pcGH,电击转化将pcGH转化进his4缺陷型毕赤酵母GSll5菌株染色体上,经甲醇诱导得以高效表达,SDS-PAGE证实了表达产物为大黄鱼生长激素,表达量约为62.5mg/L。

福州地区大黄鱼变形假单胞菌的分离与鉴定

为研究2013年春夏之际罗源湾海区网箱养殖大黄鱼(Pseudosciaena crocea)内脏出现白点症状的病原,从具有临床症状的大黄鱼内脏中分离到优势菌,经回接感染试验证实该菌为病原菌;分析该病原菌的形态特征、理化特性、分类地位及药物敏感性等特性,结合16S r DNA序列构建的进化树与假单胞菌属恶臭群中的变形假单胞菌同源性最高,在99%以上,并通过看家基因gyr B序列分析进一步验证该菌为变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida);该菌对强力霉素、诺氟沙星、恩诺沙星3种抗生素敏感,对奥氟沙星、左氟沙星、四环素3种抗生素中度敏感。

6株鱼源嗜水气单胞菌的分子鉴定与毒力基因分析检测

为了分子鉴定6株鱼源嗜水气单胞菌,并从分子层面验证通过检测毒力基因以推测嗜水气单胞菌潜在致病性的可行性。实验采用PCR扩增16S rDNA和gyrB基因并结合系统发育树的构建和分析进行菌种的分子鉴定,检测气溶素(aerolysin,aer)、溶血素(haemolysin,hly)、丝氨酸蛋白酶(serine protease,ahp)、热稳定细胞肠毒素(heat-stable cytotonic enterotoxin,ast)和热敏感细胞肠毒素(heat-labile cytotonic enterotoxin,alt)5种毒力基因,且使用Mega 5.2对核苷酸和氨基酸序列进行分析。结果显示6株菌均为嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila,检测出5种毒力基因中的至少4种,其中均检测出溶血素和2种肠毒素,序列分析表明气溶素、溶血素和丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列高度保守。本研究基于16S rDNA和gyrB基因可以准确地对嗜水气单胞菌进行分子鉴定,6株菌的毒力基因丰富预示着一定的致病性,aer、hly和ahp基因相对保守,编码的毒力因子高度同源,在临床分子诊断中建议使用aer、ahp和hly基因对嗜水气单胞菌的潜在致病性进行检测。

金鱼(Carassius auratus)咽部寄生洪湖碘泡虫(Myxobolus honghuensis)的分子鉴定和系统发育分析

在福州地区开展金鱼病害监测调查中,发现一种寄生于金鱼(Carassius auratus)咽部的粘孢子虫。为了明确虫株,本文以该粘孢子虫为研究对象,使用18S rDNA和ITS-5.8S基因对其进行分子鉴定及系统发育树的构建和分析。结果表明,虫株形态与洪湖碘泡虫(Myxobolus honghuensis)相似,18S rDNA基因测序结果与已报道的洪湖碘泡虫对应基因序列相似性为98.08%,使用洪湖碘泡虫特异性检测引物可扩增该碘泡虫ITS-5.8S基因片段,结合虫株寄生部位、形态和2个基因的系统发育树分析,可鉴定本文碘泡虫为洪湖碘泡虫。本研究首次发现洪湖碘泡虫除了会危害异育银鲫[C.auratus gibelio(Bloch)]外,还可寄生于金鱼咽部,丰富了对洪湖碘泡虫寄主和寄生部位的认识,对该碘泡虫病害的早期诊断具有一定的参考价值。

福州地区秋季渔事重点

一、淡水常规鱼类 1．成鱼养殖：立秋、处暑、白露节气气温渐降，但水温下降相对于气温具有明显滞后性，淡水水温31—29℃，仍处全年最高值，临近淡水常规鱼类的生长适温上限，鱼类生长速度仍较快，摄食量大，同时残饵、代谢产物的累积易致水质突变，水质管理难度加大，因而防暑降温、水质调控是此阶段的管理重点。

条斑紫菜叶状体细胞的发育与分化

条斑紫菜壳孢子经室内10～80d培养后长成的叶状体分别被酶解成单个细胞,后者在液体培养基中发育成正常叶状体、畸形叶状体、细胞团、性细胞囊等10种不同类型的再生体,它们的形态与结构、细胞排列与大小,放散单孢子难易程度及最终发育结果等均不同。来自日龄不同的种藻的细胞,其再生体类型的数目和各类再生体的百分数不同。当种藻日龄为10～30d时,在它们的单离细胞再生体中出现了极少的细胞团,正常叶状体和具假根畸形叶状体的百分数随着种藻日龄的增加,急剧减少,但不具假根的畸形叶状体百分数却随着种藻日龄的增加而增加。当种藻日龄大于40d以后,它们的单离细胞就几乎不能直接再生成正常叶状体。随着种藻日龄的增加,细胞再生体中不具假根的畸形叶状体百分数也显著减少,而细胞团的百分数急剧上升,精子囊和果胞子囊的数量也逐渐上升。来自同一藻体不同部位的细胞,在它们的再生体中,随着细胞所处藻体部位的上移,正常叶状体和畸形叶状体的百分数急剧减少,而细胞团百分数却不断增加。上述结果说明,在离体条件下,条斑紫菜叶状体的单离细胞发育成不同类型的再生体,是由于它们在种藻里处于不同分化阶段的缘故;同时,初步得出在条斑紫菜叶状体的发育过程中,从壳孢子细胞分化成性原细胞的过程可分为8个不同的分化阶?