TRAF5通过调控IL-17A/NF-κB信号通路减轻氧-糖剥夺/再灌注引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡

目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子5(tumor necrosis factor receptor-associated factor 5,TRAF5)对氧-葡萄糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡的影响及相关分子机制。方法 体外培养大鼠心肌细胞系H9c2细胞,构建OGD/R诱导的H9c2细胞模型,以脂质体转染法将TRAF5过表达质粒(pcDNA-TRAF5)和空载质粒(pcDNA-NC)转染至OGD/R诱导的H9c2细胞。采用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测细胞中TRAF5基因表达,CCK-8法测定细胞活力,试剂盒法检测细胞中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和炎性因子水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中相关蛋白表达。结果 与对照组比较,OGD/R组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达量降低,细胞活力降低,细胞中LDH、cTnT、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)浓度升高,细胞凋亡率升高,细胞中B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达量降低,Bcl-2相关蛋白(B-cell-lymphoma-2 related protein,Bax)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved cysteine aspartate proteolytic enzyme-3,cleaved caspase-3)、白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)蛋白表达量及磷酸化核转录因子-κB(phosphorylated nuclear factor-κB,p-NF-κB)/NF-κB比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与OGD/R组比较,OGD/R+pcDNA-TRAF5组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达量升高,细胞活力升高,细胞中LDH、c TnT、TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1浓度降低,细胞凋亡率降低,细胞中Bcl-2蛋白表达量升高,Bax、cleaved caspase-3、IL-17A蛋白表达量及p-NF-κB/NF-κB比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TRAF5可减轻OGD/R引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡,其作用机制可能与调控IL-17A/NF-κB信号通路有关。

肿瘤坏死因子受体相关因子5对缺氧诱导心肌细胞损伤的影响及作用机制研究

目的:分析肿瘤坏死因子受体相关因子5(TRAF5)对缺氧诱导心肌细胞损伤的影响及相关分子机制。方法:体外培养H9c2细胞,以800μmol/L浓度的二氯化钴(CoCl2)处理细胞建立缺氧诱导心肌细胞损伤模型,采用脂质体转染法将TRAF5过表达质粒(pcDNA-TRAF5)和空载质粒(pcDNA-NC)转染至缺氧诱导的H9c2细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测细胞TRAF5基因表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,试剂盒法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测细胞中TRAF5、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达水平。结果:与Control组比较,Hypoxic组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达水平均降低,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中LDH水平、MDA含量升高,SOD、GSH-Px水平降低,细胞中p-ERK/ERK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-JNK/JNK比值均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Hypoxic组比较,Hypoxic+pcDNA-TRAF5组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达水平均升高,细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,细胞中LDH水平、MDA含量降低,SOD、GSH-Px水平升高,细胞中p-ERK/ERK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-JNK/JNK比值均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:TRAF5通过介导心肌酶活性和氧化应激水平减轻缺氧诱导的心肌细胞损伤,其作用机制可能与调控MAPK信号通路有关。

人参皂苷Rb3对多柔比星诱导心脏毒性的保护作用及其机制

目的探究人参皂苷Rb3(G-Rb3)对多柔比星(DOX)诱导心脏毒性的作用及机制。方法将30只SD大鼠随机分为3组,分别对照组,DOX组(2.5 mg/kg),DOX+G-Rb3组(20 mg/kg);另加入PI3K抑制剂分为DOX+Wortmanin组(1 mg·kg^-1·d^-1)和DOX+G-Rb3+Wortmanin组(1 mg·kg^-1·d^-1)。将DOX(2.5 mg/kg)以腹腔注射方式在2周内达到注射次数为6次即可建立心肌毒性损伤模型,并且观察G-Rb3对DOX所致心肌毒性过程中的作用;使用HE染色观察大鼠心肌病理改变;用ELISA试剂盒检测心肌组织中心肌损伤标志物,炎症因子标志物,氧化应激标志物等水平;用Western blotting检测p-PI3K、PI3K、p-AKT和AKT的蛋白水平。结果DOX诱导心肌毒性会导致心肌损伤加剧,炎症和氧化应激反应增加。G-Rb3可改善DOX所致的心脏损伤,主要体现在心肌中胶原积累显著减少,心肌损伤标志物表达水平降低。G-Rb3可显著抑制DOX诱导的心肌炎症和氧化应激反应。G-Rb3对DOX诱导心肌毒性损伤具有保护作用主要通过激活PI3K/AKT信号通路,而PI3K/AKT抑制剂Wortmanin可以逆转人参皂苷Rb3对心肌的保护作用。结论人参皂苷Rb3可通过激活PI3K/AKT通路改善DOX诱导的心脏毒性。

急诊PCI术后早期应用沙库巴曲缬沙坦对急性ST段抬高型心肌梗死患者的保护作用

目的观察急诊PCI术后早期应用沙库巴曲缬沙坦对急性ST段抬高型心肌梗死患者术后心肌损伤及预后的影响。方法采用回顾性研究方法收集156例在我院行急诊PCI的急性ST段抬高型心肌梗死患者住院及随访资料,根据用药情况分为ARNI组(55例)和ACEI组(101例)。ARNI组患者在入院行急诊PCI术后24 h内开始口服沙库巴曲缬沙坦,ACEI组则服用ACEI类药物(培哚普利、贝那普利),统计患者术后CK峰值、院内急性心力衰竭发生率、出院前NT-proBNP水平及左室收缩功能(LVEF)、出院后半年LVEF及再入院率。结果与ACEI组相比,ARNI组患者术后CK峰值较低,院内急性心衰发生率较低、出院前NT-proBNP水平较低、LVEF值较高,出院后半年随访心功能指标较好、再入院率更低(P<0.05)。结论早期应用沙库巴曲缬沙坦能够减轻接受急诊PCI术STEMI患者的心肌损伤并改善心功能。

远端缺血预处理对急性ST段抬高型心肌梗死患者的保护作用

目的探讨远端缺血预处理(remote ischaemic conditioning,RIC)对急性ST段抬高型心肌梗死患者经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗后心肌损伤及预后的影响。方法本研究为一项单中心、前瞻、随机对照研究,采用随机数字表法将2017年1月至2017年12月鄂东医疗集团黄石市中心医院76例行急诊PCI治疗的急性ST段抬高型心肌梗死患者分为RIC组(n=39)和对照组(n=37)。RIC组患者在入院后即接受3次RIC,对照组则不做处理。统计患者术中造影结果、术后肌酸激酶(CK)峰值浓度、ST段回落率及术后3个月随访情况。结果与对照组比较,RIC组术中无血流、慢血流发生较少(7.7%vs.27%,P<0.05),术后肌酸激酶同工酶峰值浓度较低[(24.54±1.06)μmol/L vs.(28.54±1.30)μmol/L,P<0.05]、ST段回落更明显(64.82%±1.88%vs.58.19%±1.53%,P<0.05),差异均有统计学意义;术后3个月随访,心脏左心室射血分数更高(51.13%±1.28%vs.46.92%±1.36%,P<0.05)、心肌梗死面积更小[(8.22±0.08)mm^2 vs.(8.46±0.08)mm^2,P<0.05],差异有统计学意义。结论RIC能够减少行急诊PCI治疗的ST段抬高型心肌梗死患者的心肌损伤并改善心功能。