鳕鱼酶解液苦味肽的纯化鉴定

本文利用DA201-C大孔树脂对鳕鱼肉碱性蛋白酶酶解液进行脱盐后,用SP Sephadex C-25阳离子交换层析和反相高效液相色谱等方法对鳕鱼肉酶解液进行分离纯化,最终得到了浓度较高的两种苦味肽。将得到的苦味肽采用液相色谱-飞行时间串联质谱(LC-TOF-MS/MS)技术对多肽结构进行鉴定,确定其氨基酸序列分别为:HWPWMK(His-Trp-Pro-Trp-Met-Lys)和AVVLII(Ala-ValVal-Leu-Ile-Ile)。同时本文采用感官评定与多肽Q值相结合的方法对苦味进行评价,通过氨基酸分析仪对苦味样品进行氨基酸组成的测定,得出具有苦味的C7和S9组分的Q值分别为6.03 k J/mol和6.79 k J/mol,通过感官评定得出其苦味强度为:9±0.8和8.2±1.6。鉴定得到的苦味肽S9purity和S10purity的Q值分别为:8.85 k J/mol和8.53 k J/mol,苦味强度为:9.4±0.8和8.9±0.9。本文从鳕鱼肉酶解液中分离纯化得到的苦味肽为苦味肽家族增添了新成员,为下一步的研究提供了原料和实验基础。

DCC缩合酯化法制备壳聚糖山梨酸酯的工艺研究

以壳聚糖和山梨酸为主要原料,以壳聚糖山梨酸酯得率为指标,采用DCC酯缩合法研究壳聚糖山梨酸酯的制备工艺。在单因素试验基础上,选用时间、温度、山梨酸与氨基葡萄糖残基物质的量比3个因素,通过3因素3水平响应面分析法优化制备工艺。试验结果表明:最佳制备工艺条件是:反应时间3.37 h、温度29.2℃、反应物物质的量比3.1∶1;在此条件下,壳聚糖山梨酸酯得率为60.71%,验证试验产物得率为59.34%,表明试验结果与软件分析结果相符。采用红外光谱对产物结构进行表征,结果表明山梨酸与壳聚糖发生了酯化反应。

鳕鱼皮明胶的止血活性和机理研究

为了提高水产加工废料的高值化利用,为明胶作为止血产品开发的原料提供依据,研究了明胶的分子量与止血活性之间的关系以及明胶的止血机理。本研究在65℃下采用热水法提取鳕鱼皮明胶,通过SDS-PAGE电泳测定明胶的分子量分布情况。使用100 ku和50 ku的超滤膜对明胶进行超滤处理得到高、中、低三个分子量范围的样品。大鼠断尾止血实验、股动脉止血实验和肝创面止血实验结果表明高分子量组(Mr>100 ku)的出血时间最短,分别为4.54 min、2.30 min和1.91 min。说明提取的鳕鱼皮明胶样品与自然止血组相比具有止血效果,并且随着明胶分子量的上升,出血时间和出血量均下降,且高分子量明胶样品止血效果较好。APTT测定结果表明明胶可以明显缩短APTT时间,主要对内源性凝血途径起作用,并且可以促进血小板的聚集,还可以增加血小板活性因子PF4、P-选择素和TXB2的释放量从而缩短出血时间,起到快速止血的作用。