膜结构中膜片间的连接构造

膜片间的连接是将两块膜材连接在一起。基于对膜结构中基本单元(膜、索)的认识,全面系统地从构造原则及受力原理上介绍并分析了膜片间连接的各种典型节点,希望能对膜结构的设计和应用有所帮助。

SD大鼠超数排卵的优化

目的通过对鼠龄及激素剂量的控制研究其对SD大鼠排卵的影响。方法分别采用三种不同剂量PMSG／hCG组合（PMSG／hCG：20IU／20IU、25IU／25IU、30IU／30IU）对4、5、6周龄的SD大鼠进行超数排卵处理，以超数排卵总卵数、正常受精卵数、异型卵数作为评判标准，确定最佳超排剂量及鼠龄。结果20IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎24．72枚、33．12枚、15．22枚，其中正常受精卵：21．58枚、29．1枚、13．1枚，异型卵：2．01枚、1．01枚、2．12枚；25IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎37．63枚、43．62枚、20．78枚，其中正常受精卵22．67枚、38．6枚、18．5枚，异型卵：2．82枚、1．23枚、2．28枚；30IU剂量时，三种周龄大鼠分别获取胚胎51．69枚、61．36枚、30．2枚，其中正常受精卵47．2枚、60．8枚、25．6枚，异型卵：1．23枚、0．56枚、1．3枚。结论5周龄，激素剂量30Iu为大鼠超排的最适周龄及最佳激素剂量，为基因工程动物制备及胚胎冷冻实验提供技术保障。

磨牙石在大、小鼠饲养中的应用

目的探讨磨牙石在大、小鼠饲养中对饲料消耗量与动物活动力的影响。方法C57／BL6小鼠30只和SD大鼠30只按随机数字表法分为对照组（没放置磨牙石）和放置磨牙石组，每组5笼。给予定量饲料，称取和记录消耗饲料量并进行数据对比，实验时间，进行开场实验，记录分析动物自主探究及活动能力。结果对照组饲料消耗量明显高于放置磨牙石组，磨牙石成为了大、小鼠日常休闲娱乐的玩具，且到实验结束为止对照组与磨牙石组动物在活动力与探究行为上无明显差异（P〈0．05）。结论饲养笼内放置磨牙石既能节约饲料成本还能丰富动物的日常生活，符合动物福利。

大／小鼠组织DNA两种提取方法的比较

目的获取质量稳定的基因组DNA，快速鉴定模型动物基因型。方法以鼠尾组织为实验材料，采用苯酚／氯仿法和改良煮沸法提取鼠基因组DNA；分别用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量，采用PCR检测两种方法获得DNA的扩增效果。结果酚／氯仿提取法提取的基因组DNA质量优于改良煮沸法，但两种方法获得的DNA模板均能成功应用PCR扩增进行基因型鉴定，且改良煮沸法DNA提取具有无毒、简单、高效、便捷的优点。结论大批量转基因大／小鼠基因型鉴定可以优先选择改良煮沸法提取基因组DNA。

eNOS基因敲除大鼠模型的建立及表型初步研究

目的建立内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因敲除大鼠模型。方法利用锌指核酸酶（ZFN）技术，通过显微注射的方法将编码eNOS特异性锌指酶的mRNA注入SD大鼠受精卵并移植到同期受孕的SD受体母鼠输卵管内。出生后仔鼠用PCR产物测序的方法鉴定基因型。对敲除大鼠进行外观观察，HE染色分析组织结构形态。通过Westernblot分析敲除大鼠模型的心脏和肾脏组织中eNOS的表达情况。测量8～16周大鼠体质量，分析eNOS基因敲除对体质量的影响。采用尾套法测量大鼠心率、血压、收缩压和舒张压，比较与野生型大鼠的差异。结果通过显微注射方法共注射441枚受精卵，存活365枚，分别移入12只SD大鼠输卵管，共产出23只F0代大鼠。PCR产物测序分析获得4只阳性原代大鼠，对8号大鼠筛选获得纯合子。阳性纯合子大鼠表现为肢体缺损，HE染色显示动脉血管结构形态异常。Westernblot结果显示，eNOS敲除大鼠的心脏和肾脏组织中不表达eNOS蛋白。敲除大鼠的体质量明显低于野生型大鼠，体质量增长幅度慢。血压、收缩压、舒张压均高于野生型SD大鼠，有极显著差异（P〈0．01）。eNOS敲除雌鼠心率低于野生型SD雌鼠（P〈0．05）。eNOS敲除雄鼠心率与野生型SD雄鼠相比无统计学差异。结论成功建立eNOS基因敲除大鼠模型，该模型或可成为高血压疾病研究的理想动物模型。

体外受精-胚胎移植技术在APP/PS1双转基因小鼠繁育中的应用

目的 研究体外受精-胚胎移植（IVF-ET）技术在APP/PS1双转基因小鼠繁育中的应用.方法 分别应用自然交配与体外受精方法进行APP/PSl双转基因繁育,比较受精率及产仔数量;腹腔注射PMSG-HCG超排雌性C57BL/6小鼠,分别与12周龄、24周龄、36周龄、52周龄、72周龄的成年雄性APP/PSl双转基因小鼠进行体外受精,将获得的2-细胞胚胎移植到假孕雌鼠的输卵管,通过PCR方法对仔代小鼠进行鉴定.结果 6只雄性转基因小鼠与18只野生型雌性小鼠自然方式交配,实验周期为21d,获得胚胎的受精率为73.3％.应用体外受精的方法用1只雄性转基因小鼠的精子与18只雌性野生型小鼠的胚胎进行体外受精,受精率达到95％,实验周期为4d.两种繁育方式产仔数量阳性生小鼠数量有显著差异（P＜0.05）,阳性生率无显著性差异（P＞0.05）. 12周龄、24周龄、36周龄的APP/PSl转基因雄性小鼠的体外受精结果显示,三种不同周龄的雄性APP/PS1转基因小鼠受精率、产仔数量及阳性率均无显著性差异（P＞0.05）.对应用常规繁育方法难以获得后代的老龄APP/PS1双转基因雄性小鼠（52周龄、72周龄）体外受精率分别为85.6％、84.1％,获得阳性后代18只和14只.结论 APP/PS1双转基因小鼠可以采用IVF-ET技术进行繁育,为APP/PS1双转基因小鼠快速扩大繁育提供一种新方式.

金黄仓鼠Apoa5基因表达载体的构建及在不同组织器官中的差异表达

目的构建金黄仑鼠载脂蛋白A5（Apoa5）基因表达载体以及在不同组织中的表达差异分析，为深入研究Apoa5基因在金黄仓鼠不同组织中功能奠定基础。方法提取金黄仓鼠肝脏组织总RNA，采用RT—PCR方法对金黄仓鼠Apoa5基因的cDNA进行克隆，构建Apoa5基因表达载体并将其转染293T细胞，分别采用RT—PCR和Westernblot方法检测mRNA及蛋白质表达水平。采用荧光定量PCR检测并分析Apoa5mRNA在8个组织中的表达量。结果经PCR检测鉴定，Apoa5基因表达载体构建成功，经测序分析金黄仓鼠Apoa5基因cDNA全长1243bp，编码366个氨基酸，与人、大鼠、小鼠等物种比对，核苷酸和氨基酸序列均具有较高的同源性，金黄仓鼠与人、大鼠、小鼠的氨基酸同源性分别为75％、84％、84％。转染293T细胞48h后，RT—PCR和Westernblot结果表明，Apoa5基因在mRNA和蛋白质水平都有表达。荧光定量PCR结果显示，Apoa5mRNA在肝脏表达量最高，在脑和睾丸中中度表达，在心、脾脏、肺、肾、卵巢组织中低度表达。结论成功构建Apoa5基因表达载体并分析其在不同组织中的表达差异，为制备Apoa5转基因金黄仓鼠动物模型以及研究Apoa5基因在金黄仓鼠脂类代谢中的功能奠定基础。

水溶性四氧化三铁纳米粒子制备及其在大鼠体内分布

目的 制备水溶性四氧化三铁纳米粒子并研究其在动物体内的分布.方法 采用高温分解法制备有机相Fe3O4磁性纳米粒子,然后采用2,3-二巯基丁二酸（DMSA）对磁性纳米晶体进行表面修饰,得到水溶性氧化铁纳米颗粒（Water-Soluble Iron Oxide Nanparticles,WION）,将WION通过尾静脉注射入SD大鼠体内,在不同时间处死大鼠,组织切片染色观察WION在大鼠体内的分布,对WION的生物相容性做初步探讨.结果 透射电子显微镜观察发现,晶体的表面通过疏水长链烷烃稳定,Fe3O4纳米晶体在环己烷中具有较好的分散性,颗粒并无聚集现象;尾静脉注射0.5 ml的WION溶液（l mg/ml）24 h后,WION主要集中在脾脏和肝脏,其次是肾脏和肺.结论 采用高温分解法成功制备了Fe3O4磁性纳米粒子,其具有良好的表面形貌.进一步采用2,3-二巯基丁二酸（DMSA）对其进行表面修饰,获得了分散性良好的水溶性氧化铁纳米颗粒（WION）.

发展我国风险投资的几点思考

风险投资是高新技术产业的孵化器。它产生于第二次世界大战之后,至今只有50多年的历史,在我国则尚处于起步阶段。当前,知识经济初见端倪,21世纪将是全球化知识经济占主导地位的时代。一个国家和民族的创新能力,尤其是知识创新和技术创新能力。

应用Talen法制备apoE基因敲除大鼠模型

目的应用转录激活因子样效应因子核酸酶（Talen）法制备载脂蛋白E（apoE）基因敲除大鼠模型，为进一步研究apoE基因功能，动脉粥样硬化（AS）疾病发病机制及治疗方法奠定基础。方法设计并合成针对大鼠apoE基因的Talen序列，应用原核显微注射方法制备子代鼠。通过PCR．测序及TA克隆-测序法检测仔鼠中apoE的突变，经传代及兄妹交配获得纯合型仔鼠，并对其基因型进行鉴定。应用Westemblot方法检测apoE-/-仔鼠各组织中ApoE蛋白表达水平；血清学分析血脂总胆固醇（CHO）及甘油三酯（TG）含量；应用RT—PCR方法检测脂质代谢相关基因三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）的表达。结果经鉴定选取在第二外显子处缺失1bp，造成开放阅读框移码突变的大鼠为阳性F0代仔鼠，该鼠经传代及筛选，最终获得apoE-/-大鼠。Westernblot检测显示apoE-/-鼠在心、肝、肾、脑、卵巢组织中未见ApoE蛋白的表达，表明在该模型中成功实现了apoE基因的敲除。apoE-/-鼠血脂CHO、TG均高于野生SD大鼠，其中CHO水平呈现显著性差异（P〈0．05）。在apoE-/-鼠肝组织中ABCA1的表达降低，可能起到促进AS形成的作用。结论应用Talen法成功制备apoE基因敲除SD大鼠；经筛选获得了纯合型apoE-/-大鼠，该模型实现了apoE基因敲除，并表现为高血脂及As性状。

不同方法提取基因组DNA的比较

目的通过对不同方法的比较建立一种遗传工程鼠基因组DNA鉴定提取最简单快速的方法。方法以大鼠和小鼠的鼠尾及脚趾为实验材料,采用酚氯仿、煮沸法、涡旋离心法提取基因组DNA;通过琼脂糖凝胶的方法检验DNA质量,通过对时间的统计分析比较3种方法提取DNA的速率。利用PCR技术检测DNA的扩增效果。结果煮沸法、涡旋离心法和酚氯仿提取的DNA比较,电泳条带均较弱。涡旋离心法所耗费的时间最短,煮沸法次之,酚氯仿法耗时最长。除了煮沸法外,涡旋离心法和酚氯仿方法提取的DNA在用于PCR检测时都能得到清晰的目的条带。结论在使用PCR进行基因型初步鉴定时,涡旋离心法是三种方法中最简单快速的首选方法。

高速公路隧道段水泥路面抗滑性不足的原因及对策分析

为解决高速公路隧道段水泥混凝土路面抗滑性不足的问题,对引起高速公路隧道段水泥路面抗滑性不足的原因进行了现场调查及成因分析,提出了抛丸、精铣刨、微表处、加铺沥青混凝土等可行性处治对策。结合现场实际情况,决定前期采用精铣刨技术,在隧道净空满足要求的条件下,后期加铺沥青混凝土,从而有效提高了高速公路隧道段水泥路面的抗滑性能,保障了车辆行驶安全。

卷边翼缘工形构件稳定性能及经济性能分析

以卷边工形构件和普通工形构件为研究对象,从稳定性能和经济性能两方面进行对比。首先,分析二者屈曲形式的异同,并通过对比二者腹板和翼缘的屈曲系数来反映二者稳定性能的差异。然后,基于弹塑性范围内的稳定承载力有限元分析,从两方面入手对二者的经济性能进行研究:一是用钢量相同,比较二者的承载力;二是承载力相同,比较二者的用钢量。研究结果表明:卷边工形构件是一种较工形构件更为经济高效的型材。

卷边翼缘工形截面构件的局部稳定性能

提出了一种翼缘卷边的工形截面薄壁构件,可以应用在轻型钢结构房屋结构中。由于翼缘板有卷边的加强作用,极大地提高了其局部屈曲荷载,从而使翼缘板可以不受板件宽厚比限值的约束,能获得比较好的经济效益。为此建立了翼缘卷边工形截面构件有效长宽比的概念及其计算公式,并通过变化几何参数对这种截面的局部屈曲性能进行研究和分析,从而确定卷边宽度系数的合理取值以及卷边翼缘宽厚比限值。

卷边翼缘工形截面构件在轴心压力作用下的稳定承载力研究

与普通工形截面比较,卷边工形截面构件由于卷边的存在增强了翼缘的抗压屈曲能力,进而提高了截面的承载效率,是一种新型的薄壁截面构件。采用大挠度弹塑性板壳有限元分析方珐,对卷边工形构件在轴心压力作用下的稳定承载性能进行了研究。在考虑构件与板件几何初始缺陷和截面残余应力的情况下,研究了卷边工形截面参数(截面宽高比、腹板高厚比、翼缘宽厚比)与构件长细比的变化对轴心压力构件稳定承载性能的影响。最后,在大量数值分析结果的基础上,归纳总结出了卷边工形构件在轴向压力作用下的稳定承载力设计公式。

卷边翼缘工形截面梁的稳定性能及设计方法

基于大挠度弹塑性板壳有限元分析方法,系统地研究了卷边工形梁在两端等弯矩作用下的失稳机理与稳定承载力,揭示了卷边工形截面构件的局部屈曲、畸变屈曲、整体侧向失稳以及它们之间的相互作用。系统地分析了截面宽高比、腹板高厚比、翼缘宽厚比、长细比等构件参数对侧向稳定承载力的影响,并基于大量的数值计算数据给出了卷边工形梁在两端等弯矩作用下的稳定承载力设计公式,可为规范修订以及工程设计提供依据。

卷边翼缘工形构件在压弯荷载作用下的稳定承载力设计理论

卷边工形截面构件作为一种高效型材,在弯矩与轴力共同作用下的破坏模型常常是伴随板件局部屈曲的整体失稳。利用板壳有限单元法,研究卷边工形截面构件在板件局部屈曲下的构件整体稳定承载力,建立其稳定承载力设计公式。首先,通过设计大量算例,研究了截面宽高比、腹板高厚比、翼缘宽厚比等截面参数对短柱承载性能的影响,其中考虑了板组之间屈曲的相关作用,获得了考虑板组局部屈曲特性的短柱稳定承载力相关公式。在短柱板件局部失稳承载力研究的基础上,计入构件长细比对长柱面内和面外稳定承载性能的影响,通过数值分析建立了卷边工形构件在压弯荷载作用下的稳定承载力设计公式。