稳定表达荧光素酶裸鼠垂体腺瘤移植瘤模型的建立

目的建立稳定表达荧光素酶的裸鼠垂体腺瘤移植瘤模型，并通过活体生物发光成像系统实时观察移植瘤的生长特点。方法经G418药物选择性对转染细胞进行筛选，获得稳定表达荧光素酶的GH3-luc和MMQ-luc细胞系。将两株细胞系分别皮下接种于BALB／c裸鼠，建立BALB／c裸鼠移植瘤模型，利用活体生物发光成像系统观察肿瘤的成瘤和生长情况。结果本组成功构建稳定表达荧光素酶的裸鼠GH3-luc和MMQ-luc移植瘤模型。体表直尺测量显示：移植瘤在接种MMQ-luc和GH3-luc细胞后10d内生长均较缓慢，15—30d肿瘤体积迅速增长．且MMQ-luc移植瘤较GH3-luc移植瘤生长快。活体生物发光成像系统荧光测量显示：接种GH3-luc细胞移植瘤20d时的荧光强度明显高于10d的荧光强度。活体生物发光成像系统荧光测量与取瘤直尺测量的肿瘤体积变化趋于一致，而体表直尺测量的肿瘤体积偏小。结论稳定表达荧光素酶的裸鼠垂体腺瘤移植瘤模型的成功建立，不仅可用于活体生物发光成像系统实时观察肿瘤的成瘤及生长情况，而且为垂体腺瘤的研究及药物开发提供了方便、有效的平台。

地中海贫血产前遗传筛查流程简化的风险评估

目的评估全血细胞分析(full blood count,FBC)结合常见地中海贫血(简称地贫)基因检测(简称两步法)取代传统的FBC结合血红蛋白(hemoglobin,Hb)分析和地贫基因检测(简称三步法)用于地贫产前遗传筛查的可行性。方法采用回顾性分析的方法,对近2年(2014年1月1日至2015年12月31日)珠海市产前门诊6 291名孕妇及其配偶FBC、Hb分析和地贫基因检测的结果采用x2检验进行统计学分析,比较两步法和三步法在产前地贫遗传筛查中的可靠性及经济性。结果以经典的三步法作为标准,两步法对孕妇及其配偶地贫检测的灵敏度、特异性、阴性预测值和阳性预测值以及总的诊断效率分别为98.25%、99.52%、85.98%、88.12%、91.23%,两步法对血红蛋白H(hemoglobin H,Hb H)病、轻型β-地贫、异常Hb和δβ-地贫/遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征(hereditary persistence of fetal hemoglobin,HPFH)的漏检率分别为2.59%(2/77)、0.01%(2/1 695)、8.78%(13/148)和48.30%(43/89)。结论产前地贫遗传筛查流程中采用三步法有其科学性,既可避免Hb H、异常Hb以及δβ-地贫/HPFH等个体的漏检,还可为地贫DNA诊断指明方向。在未建立覆盖中国人异常Hb病基因谱的分子筛查技术之前,两步法暂不能取而代之。

深圳市龙华地区人乳头瘤病毒感染率及亚型分析

目的了解深圳市龙华区某医院及其所覆盖的社康中心就诊女性人乳头瘤病毒(HPV)感染率、年龄及基因亚型分布的最新数据,以期为建立和完善当地女性HPV监测、HPV疫苗开发和宫颈癌防治系统提供科学依据。方法选取最近1年内在我院总部及其所覆盖的29个社康中心接受宫颈HPV检查的12658例女性为研究对象,按照年龄分为10组(每5岁为一组),采用PCR-膜杂交法检测28种HPV基因亚型。结果12658例检测样本中,HPV阳性2202例,总感染率17.40%。HPV亚型感染率排名前五位的分别是:HPV52、HPV16、HPV58、HPV51和HPV53。低危型、疑高危型、高危型感染率分别为6.56%(830/12658)、1.88%(238/12658)和15.67%(1984/12658)。16~20岁年龄组女性HPV感染率(48.44%)及HPV高危型感染率(58.59%)均最高,46~50岁年龄组女性HPV感染率(12.26%)及HPV高危型感染率(9.75%)均最低。多重感染方面,以单一基因感染为主,感染率为12.68%(1605/12658),两种基因型感染率为3.38%(428/12658),三种及以上基因型感染率为1.34%(169/12658),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论该地区就诊女性HPV感染以高危型为主,年轻组(16~25岁)和中老年组(≥56岁)为高发人群,临床应采用针对性措施,推广HPV多价疫苗的应用,同时加强对年轻女性和中老年女性的卫生宣传、保健教育等工作以及对病毒感染的监测力度。

深圳龙华地区β-地中海贫血基因型与红细胞参数分析

目的分析深圳市龙华地区最新β地中海贫血(地贫)携带(患)者基因型分布特点,并全面探讨该地区不同基因型的β地贫携带(患)者的血液学特征。方法以怀疑地贫就诊者为研究对象,采用PCR-流式荧光杂交法进行β地中海贫血基因突变检测,采用血细胞分析仪检测红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW)等血液学参数;采用毛细血管电泳法检测血红蛋白亚型(HbA、HbA2和HbF)比率。并对14岁以上不同基因型组红细胞及血红蛋白参数进行t检验统计分析。结果从4 983例怀疑地贫就诊者标本中,检出400例β地中海贫血,检出率为8.03%。最常见3种基因型为CD41-42/N(137,34.25%)、IVS-II-654/N(122,30.50%)、CD17/N(56,14.00%)。β-地中海贫血患者血液学参数主要表现为HGB、MCV、MCH降低,即红细胞呈小细胞、低色素形态。与正常人参考值相比,男性β^0/β^N与β^+/β^N基因型的RDW和HbA2更高,女性β^0/β^N与β^+/β^N基因型MCV、MCH、MCHC更低,而RDW和HbA2更高,βE/β^N与β^0/β^N和β^+/β^N基因型在MCV、MCH、MCHC、RDW、HbA和HbA2参数上更接近正常人参考值,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论深圳市龙华区β地贫基因突变最常见类型为CD41-42/N、IVS-II-654/N和CD17/N基因型,不同性别不同基因型的β地贫拥有其独特的血液学特征,可用于辅助不同类型地贫的参考鉴别。