基于实时荧光定量技术建立定量检测乳粉中羊源性成分的方法

基于实时荧光定量聚合酶链式反应建立了乳粉中羊源性成分相对定量检测方法。对羊引物进行特异性、灵敏度和稳定性实验。通过模拟不同质量浓度羊乳粉与马乳粉混合样本,根据其ΔCt值的函数关系进行线性拟合进而绘制标准曲线,建立乳粉中羊源性成分相对定量检测。结果显示,该方法最低检测限为0.000 1 ng/μL、标准曲线方程为y=0.720 9x+5.651 9(R2=0.987 5)、回收率为96.22%~112.00%、组间变异系数≤0.79%、组内变异系数≤1.77%。

婴幼儿配方乳粉中叶酸检测用鼠李糖乳杆菌定量菌株制备

为优化生物法测定婴幼儿配方乳粉中叶酸含量制备鼠李糖乳杆菌定量菌株。通过添加保护剂冻存菌株的方式制作适用检测条件的菌球,对菌球做运输条件模拟试验和贮存条件模拟实验验证菌球稳定性,随机抽取10瓶菌株做均匀性验证;应用鼠李糖乳杆菌定量菌株测试质控样品叶酸含量。结果表明,鼠李糖乳杆菌定量菌株在25℃和37℃条件下菌落数变动较小,在-20℃和4℃环境中复苏率均在80%以上,鼠李糖乳杆菌定量菌株稳定性良好;通过单因素方差分析方法分析结果表明鼠李糖乳杆菌定量菌株均匀性良好;测得质控样品叶酸含量结果准确。鼠李糖乳杆菌定量菌株具有检测结果准确,便于保存,简化实验步骤等优点,满足婴幼儿乳粉中叶酸检测需求。

常见食品添加剂对植物蛋白饮料植物源性成分检测的影响

为了探究常见添加剂对植物蛋白饮料植物源性成分检测的影响,在荧光PCR反应体系中添加不同浓度的添加剂来判定其对大豆DNA荧光PCR反应的干扰浓度,测定其DNA紫外吸收峰值,并比较了试剂盒、试剂盒+氯仿、《植物蛋白饮料中植物源性成分鉴定方法》(BJS201707)三种方法。当安赛蜜的浓度大于105.00μg/μL,甜蜜素浓度大于100.00μg/μL,抗坏血酸浓度大于108.30μg/μL,D-异抗坏血酸钠浓度大于132.00μg/μL,肌苷酸二钠浓度大于335.00μg/μL,谷氨酸钠大于150.00μg/μL,氯化钾的浓度大于37.85μg/μL时,使得大豆DNA荧光PCR反应出现假阴性。安赛蜜浓度大于75.00μg/μL,甜蜜素浓度大于133.38μg/μL时,抗坏血酸浓度大于65.00μg/μL,D-异抗坏血酸浓度大于79.13μg/μL,肌苷酸二钠浓度大于335.00μg/μL,检测不到DNA紫外吸收峰。298.75μg/μL浓度的肌苷酸二钠、100.00μg/μL、200.00μg/μL的谷氨酸钠与对照组DNA紫外吸收峰差异显著,其他添加剂组与对照组差异不显著。三种方法中(BTS201707)提取DNA的效果最好,Ct值最小,与其他两种方法差异显著。安赛蜜、甜蜜素、抗坏血酸、D-异抗坏血酸钠、肌苷酸二钠、谷氨酸钠、氯化钾对植物源性成分荧光PCR检测具有影响作用,使得检测结果出现假阴性,并且这些添加剂到一定浓度时会通过影响DNA峰值而影响荧光PCR反应的准确性。该研究为今后探究添加剂对检测植物源性成分的影响奠定了基础。

一种羊乳粉的微滴式数字PCR定量分析方法

基于市场上对乳品溯源技术的迫切需求,以微滴式数字聚合酶链式反应技术对羊乳粉中的乳源进行准确判别。基因检测技术对判别乳源来源方面克服了成分复杂、检测时间长等的缺点,更加精准地针对本源进行检测,减少了误判的可能性。本实验以羊乳粉质量、DNA质量浓度及其拷贝数为实验指标,建立了以羊乳粉拷贝数与质量的关系式,准确地判断出羊乳粉的质量,其公式为M=(C-4.75)/3.56,其中,M代表羊乳粉的质量(mg),C代表每微升的拷贝数(copies/μL),该方法的建立对现有市场上的羊乳粉定量检测提供了新的方法和思路。